一种小儿连番止泻颗粒的质量检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药领域，具体涉及一种小儿连番止泻颗粒中巧药巧的含量测定方 法。
【背景技术】
[0002] 小儿连番止泻颗粒是由连番止泻胶囊改剂而成，更适用于小儿患者服用。由黄连、 黄辜、白巧、广蕾香、番石楷叶、巧冬共6味中药组成，具有清热解毒，燥湿止泻功能，有明显 的抑菌作用、抗病毒作用和止泻作用，主要用于轮状病毒性肠炎、致泻性大肠杆菌肠炎所致 的急性感染性腹泻。连番止泻胶囊中仅测定了小築碱的含量，改剂型后，为了更好地控制产 品质量，需要寻找一种更有效的质量检测方法。
[0003] 改剂型后为更好的控制产品质量，本研究采用高效液相色谱法测定该制剂中巧药 巧的含量，使该剂型质量稳定、可控，检测方法操作简便、快捷，准确灵敏，重现性好，干扰 小。
【发明内容】
[0004] 本发明所要解决的技术问题是提供一种采用高效液相色谱法测定小儿连番止泻 颗粒中巧药巧的含量的方法，W利于更好的控制产品质量，使该剂型质量稳定、可控，检测 方法操作简便、快捷，准确灵敏，重现性好，干扰小。
[0005] 本发明所要解决的技术问题通过W下技术方案予W实现： 一种小儿连番止泻颗粒的质量检测方法，包括高效液相色谱法测定小儿连番止泻颗粒 中巧药巧的含量，其中操作步骤如下： 步骤1,供试品溶液和对照品溶液的制备； 步骤2,采用高效液相色谱法测定； 所述的高效液相色谱法W十八烷基娃焼键合硅胶为填充剂；W己腊-0. 1%磯酸为流动 相；检测波长为230nm，理论板数按巧药巧计不低于5000,分别精密吸取对照品溶液与供试 品溶液注入液相色谱仪，测定，即得。
[0006] 进一步的，所述的流动相为己腊-0. 1%磯酸体积比12-13 ;87-88。
[0007] 更进一步的，所述的流动相为己腊-0. 1%磯酸体积比12. 5 ;87. 5。
[0008] 进一步的，所述的供试品溶液的制备为取小儿连番止泻颗粒0.1 g，研细，精密称 定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀己醇25ml，密塞，称定重量，超声处理，放冷至室温，再称定 重量，用稀己醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
[0009] 更进一步的，所述的超声处理为功率100W，频率40曲Z条件下超声处理5-15分钟。
[0010] 更进一步的，所述的己醇浓度为20%-45〇/〇。
[0011] 更更进一步的，所述的己醇浓度为2(TC时含己醇体积比应为49. 5%~50. 5%。
[001引本品每克含白巧W巧药巧化23恥011)计，不得少于3. 3mg。
[0013] 本发明的有益效果：本发明方法操作简便，结果准确，灵敏度高，重现性好，回收 率好，干扰小，且阴性对照溶液对测定无干扰，可w作为控制小儿连番止泻颗粒内在质量的 有效方法。
【附图说明】
[0014] 图1为小儿连番止泻颗粒的HPLC图谱。
[0015] 图2为小儿连番止泻颗粒中缺白巧的阴性对照溶液的HPLC图谱。
[0016] 图3为巧药巧的线性图。
[0017]
【具体实施方式】
[001引本实施例中本品所述的仪器与试剂为： 高效液相色谱仪（岛津LC-20A系列；岛津LC-20A泉、岛津SPD-M20A二极管检测器、岛 津SIk20A自动进样器);超声波处理机（TH-350型、济宁天华超声电子仪器有限公司）。巧 药巧对照品（中国食品药品检定研究院，批号：110736-201337);己腊为色谱纯(西隙化工股 份有限公司）;水为双蒸水；其他试剂均为分析纯；小儿连番止泻颗粒(惠州市九惠制药有限 公司产，批号；20130217)。
[0019] 提取溶剂的选择 参照中国药典2010年版药典一部白巧药材含量测定方法下的供试品溶液制备方法： 取同一批（2020130217)小儿连番止泻颗粒约0.1 g，研细，精密称定，置25血容量瓶中，分 别精密加入己醇(本处所述己醇浓度为2(TC时含己醇体积比应为49. 5%~50. 5%)，30%甲醇， 50%甲醇，70%甲醇，甲醇各23ml，分超声处理(功率100W，频率45曲Z) 30min后，放冷，加相 应的溶剂至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得。结果见表1。
[0020] 表1小儿连番止泻颗粒不同提取溶剂巧药巧的含量
从表1结果看出，采用稀己醇作为提取溶剂是，巧药巧含量最高，基于安全无毒原则， 故本发明采用提取溶剂为稀己醇。
[0021] 超声时间的选择 取同一批（2020130217)小儿连番止泻颗粒约0.1 g，研细，精密称定，置25mL容量瓶中， 精密加入稀己醇23ml，分别采用不同时间超声处理(功率100W，频率45曲Z)后，放冷，加稀 己醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得。
[0022] 表2小儿连番止泻颗粒不同提取时间巧药巧的含量
经过大量实验数据对比发现，超声处理10分钟左右时，巧药巧的含量最高；当超声处 理60分钟时，含量显著下降。故本发明超声处理优选5-15分钟，最优方案为10分钟。
[002引 1.专属性试验 按处方比例及制法，制成缺白巧的阴性对照样品，取相当于供试品的量，按供试品溶液 的制备方法，制成缺白巧的阴性对照溶液。按小儿连番止泻颗粒中巧药巧的含量测定方法， 测定巧药巧含量，结果见图1、2。
[0024] 从图中可W看出，缺白巧的阴性对照溶液的图谱中，在与巧药巧图谱相应的位置 上，没有对应的峰。说明该检测方法的专属性好。
[0025] 2.线性关系考察取巧药巧对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含有 0. 1003mg巧药巧的溶液，即得。分别精密吸取巧药巧对照品溶液（0. 1003mg / ml)0. 1ml、 0. 5ml、lml、2. 5ml、5ml、10ml加甲醇定容至10ml，分别精密吸取对照品溶液1〇μ1，按正文拟 定的方法测定，W测得峰面积积分值为纵坐标，对照品量为横坐标，绘制标准曲线(表3、图 3)，得回归方程，Υ=12776. 7 Χ+422,相关系数r=0. 9998,线性范围；0. 0广1.00 ug/ml. 表3巧药巧峰面积及含量表
从表3结果看出，巧药巧在0. 0广1. 00 μ g/ml范围内与峰面积积分值呈良好的线性关 系，符合药典要求。
[002引 3.稳定性试验取小儿连番止泻颗粒册号：20130217)约0.1 g，研细，精密称取 0.1076g，按小儿连番止泻颗粒中巧药巧的含量测定方法测定巧药巧含量，取同一供试品溶 液，分别在0、2、4、6、8、10、12、24小时连续进样检测，结果见表4。其RSD值为1. 35%，在24h 内供试品溶液有良好的稳定性。
[0027] 表4稳定性实验测定结果
4.精密度(重复性） ① 仪器精密度的考察取同一批(批号：20130217)小儿连番止泻颗粒约0.1 g，研细，精 密称定，称1份，按小儿连番止泻颗粒中巧药巧的含量测定方法，测定巧药巧含量，连续进 样，结果见表5。其含量的RSD值为0. 62%，说明仪器有良好的精密度 表5仪器精密度试验测定结果（n=6)
② 中间精密度的考察取小儿连番止泻颗粒(批号：20130217)约0.1 g，研细，精密称定， 称6份，分别由A、B、C Η人在不同的时间，用同一台设备，按正文拟订的含量测定方法测定 巧药巧含量，结果见表6。不同人员操作之间的RSD为1. 38%，说明本方法中间精密度良好。 [002引表6中间精密度试验结果（η=6)
⑨重复性试验取小儿连番止泻颗粒(批号：20130217)约0. 5g，研细，精密称定，共6份， 按小儿连番止泻颗粒中巧药巧的含量测定方法，测定巧药巧含量，结果见表7。6次操作之 间的RSD为0. 80 %，说明本方法重现性良好。
[0029] 表7重复性试验结果（n=6 )
5.准确度精密称取小儿连番止泻颗粒(批号：20130217)约0.05g，研细，精密称定，称 6份，分别置25ml量瓶中，分别精密加入巧药巧对照品溶液诲1ml含巧药巧0. 233mg的甲 醇溶液)1ml，按小儿连番止泻颗粒中巧药巧的含量测定方法，测定巧药巧含量，结果见表8。
[0030] 表8回收试验测定结果（n=6)
从表8结果看出，平均回收率为99. 72, RSD为1. 64%，表明该方法回收率良好。
[0031] 6.含量限度的确定 通过对9批小试产品、3批中试产品的含量测定结果，按照惯例，求出平均值后下调 20%，得出本产品中巧药巧含量限度。结果见表9。
[0032] 表9含量限度的确定
从表9得知，本产品中巧药巧的含量限度为3. 3mg/g。
【主权项】
1. 一种小儿连番止泻颗粒的质量检测方法，其特征在于：包括高效液相色谱法测定小 儿连番止泻颗粒中芍药苷的含量，其中操作步骤如下： 步骤1，供试品溶液和对照品溶液的制备； 步骤2,采用高效液相色谱法测定； 所述的高效液相色谱法以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-〇. 1%磷酸为流动 相；检测波长为230nm，理论板数按芍药苷计不低于5000,分别精密吸取对照品溶液与供试 品溶液注入液相色谱仪，测定，即得。2. 根据权利要求1所述的一种小儿连番止泻颗粒的质量检测方法，其特征在于：所述 的流动相为乙腈-〇. 1%磷酸体积比12-13 :87-88。3. 根据权利要求2所述的一种小儿连番止泻颗粒的质量检测方法，其特征在于：所述 的流动相为乙腈-〇. 1%磷酸体积比12. 5 :87. 5。4. 根据权利要求1所述的一种小儿连番止泻颗粒的质量检测方法，其特征在于：所述 的供试品溶液的制备为取小儿连番止泻颗粒〇.lg，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密 加入稀乙醇25ml，密塞，称定重量，超声处理，放冷至室温，再称定重量，用稀乙醇溶液补足 减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。5. 根据权利要求4所述的一种小儿连番止泻颗粒的质量检测方法，其特征在于：所述 的超声处理为功率100W，频率40kHz条件下超声处理5-15分钟。6. 根据权利要求4所述的一种小儿连番止泻颗粒的质量检测方法，其特征在于：所述 的乙醇浓度为40%-60%。7. 根据权利要求6所述的一种小儿连番止泻颗粒的质量检测方法，其特征在于：所述 的乙醇浓度为20°C时含乙醇体积比应为49. 5%~50. 5%。
【专利摘要】本发明涉及医药领域，具体涉及一种小儿连番止泻颗粒中芍药苷的含量测定方法。包括高效液相色谱法测定小儿连番止泻颗粒中芍药苷的含量，其中操作步骤如下：步骤1,供试品溶液和对照品溶液的制备；步骤2，采用高效液相色谱法测定；所述的高效液相色谱法以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1%磷酸为流动相；检测波长为230nm，理论板数按芍药苷计不低于5000，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液注入液相色谱仪，测定，即得。本发明方法操作简便，结果准确，灵敏度高，重现性好，回收率好，干扰小，且阴性对照溶液对测定无干扰，可以作为控制小儿连番止泻颗粒内在质量的有效方法。
【IPC分类】G01N30/02
【公开号】CN105486760
【申请号】CN201410480389
【发明人】刘强, 黄辉球
【申请人】惠州市九惠制药股份有限公司
【公开日】2016年4月13日
【申请日】2014年9月19日