一种基于生长轴相关基因血液生化标记选育武定鸡的方法

文档序号:9749377阅读:568来源:国知局
一种基于生长轴相关基因血液生化标记选育武定鸡的方法
【技术领域】
[0001 ]本发明属于家禽血液生化标记技术领域,具体地说,涉及一种基于生长轴相关基 因血液生化标记选育武定鸡的方法。
【背景技术】
[0002] 随着家禽市场的飞速发展,人们生活水平的提高,人们对禽类产品的要求越来越 高。人们对地方鸡种的消费呈上升趋势,致使其价格远高于快大型肉鸡;基于这种良好的市 场开发利用前景,有针对性的选择相关的表型性状进行研究,努力培育适应市场需求的新 品种和新产品,对地方品种资源的保护和开发具有深远地意义。体型性状是重要的表型性 状之一,由微效多基因控制,在生长发育中呈现动态变化,体型的大小除了从外观上用肉眼 观察外,还可以运用常规技术进行测量,通过对数据的分析可以对体型性状加以评定。
[0003] 目前,生长发育的测定项目主要是对体重和体尺的测量。其中体尺是反映家禽身 体各部分是否发育完全,是否匀称和符合某一生产类型、品种的特征。通常是用卡尺或皮尺 进行测量。生长轴相关基因对鸡体型的大小的研究,也是最近的热点之一。Leung等和 Scanes等都在早期对矮小型鸡做过相关方面的研究,认为矮小型鸡的代谢低,胫长短,体脂 大量积蓄,最初推测是生长激素失活或单脱碘化酶存在缺陷才导致矮小型鸡甲状腺机能衰 退、体型矮小等表型特征,随后在大量的研究中,通过不断地挖掘,发现通过介导生长激素 (GH)来调控IGFs的表达,从而在体内起着重要的调节生长发育的作用。由于生长轴上相关 基因的缺失结构的变异会影响到其表达蛋白的结构和功能,从而影响GH结合的结合活性, 致使生长受到抑制。吴桂琴等对矮小型鸡和普通型鸡进行研究发现,8周龄时矮小型鸡的胫 长比普通鸡的要短约l〇mm;性成熟后,即20周龄时,其胫长要普通鸡的短20多mm;从基因表 达中,IGF-1的表达趋势无论是刚出生,快速生长发育时期,还是性成熟后,矮小鸡肝脏中 IGF-lmRNA的表达水平均远远低于普通鸡,差别更是达到2个数量级。此外,Tanaka等研究发 现鸡肝脏中IGF-lmRNA的表达呈GH依赖模式,而其在其他组织中的表达并不依赖于GH的作 用。
[0004] 武定鸡是云南省楚雄彝族自治州的地方良种肉用鸡,素以体大著称,以肉质肥嫩 鲜美闻名,备受人们喜爱。迄今为止,尚无有关生长轴相关基因 GH、GHBP和IGF-1对慢长型和 快长型武定鸡的体型变化影响的研究,为满足人们对地方鸡种的需求,有必要探讨一种能 选育快长型云南武定鸡的新方法,通过对生长轴相关基因的研究,建立一个血液生化标记, 为云南武定鸡的早期选育做铺垫。

【发明内容】

[0005] 针对上述问题,本发明提出一种基于生长轴相关基因血液生化标记选育武定鸡的 方法,通过测定生长轴上相关基因 GH、GHBP和IGF-1在慢长型和快长型武定鸡中的浓度变 化,结合测量的武定鸡的体尺指数,确定慢长型和快长型武定鸡体型血液生化标记,筛选优 质鸡只,为武定鸡的早期育种提供理论基础,同时也是探索武定鸡的育种新方法,为云南地 方鸡种在育种工作中提供新思路。
[0006] 为实现上述目的,本发明是通过如下技术方案实现的:
[0007] -种基于生长轴相关基因血液生化标记选育武定鸡的方法,具体步骤为:
[0008] 1)采集待测武定鸡的血液,制备血清,检测血清中鸡胰岛素样生长因子(IGF-1)的 浓度值;
[0009] 2)将步骤1)测得的浓度值与武定鸡血液生化标记进行对比,将待测武定鸡区别为 快长型武定鸡和慢长型武定鸡;所述武定鸡血液生化标记的确立步骤为:
[0010] a、从武定鸡资源群体中随机选择慢长武定鸡家系和快长武定鸡家系,分别测量体 尺指标,采集血液,收集血衆;
[0011] b、选用GH、GHBP和IGF-1酶联免疫分析(ELISA)试剂盒,应用双抗体夹心法测定样 品中鸡的相关基因的水平,然后用酶标仪在450nm波长下测定吸光度,最后通过标准曲线计 算样品中GH、GHBP和IGF-1的含量;
[0012] c、根据步骤b所得数据,得出慢长型武定鸡和快长型武定鸡各生长相关基因的浓 度值,再根据所选取武定鸡的体尺指标,进行生长相关基因与体尺的相关性分析;
[0013] d、根据步骤c所得到的分析结果确定武定鸡的血液生化标记。
[0014] 进一步地,所述的云南武定鸡的血液生化标记为IGF-1基因的浓度值,在一月龄 时,当IGF-1基因的浓度值在2.36±0.05ug/l以下,判定为慢长型武定鸡,当IGF-1基因的浓 度值在2.36±0.05ug/l以上,判定为快长型武定鸡;在二月龄时,当IGF-1基因的浓度值在 2.55 ±0.04ug/l以下,判定为慢长型武定鸡,当IGF-1基因的浓度值在2.55 ±0.04ug/l以 上,判定为快长型武定鸡。
[0015] 进一步地,在一月龄时,当IGF-1基因的浓度值在2.36ug/l以下,判定为慢长型武 定鸡,当IGF-1基因的浓度值在2.36ug/l以上,判定为快长型武定鸡;在二月龄时,当IGF-1 基因的浓度值在2.55ug/l以下,判定为慢长型武定鸡,当IGF-1基因的浓度值在2.55ug/l以 上,判定为快长型武定鸡。
[0016] 进一步地,所述的体尺指标包括体斜长、胸宽、胸深、龙骨长、胫长、胫围和骨盆宽。 [0017]进一步地,选用含有EDTA二钾的抗凝剂的采血管采集血液,混合后,采用低温 3000rpm离心10分钟,仔细收集上清,获得血浆。
[0018]本发明的有益效果:本发明通过测定生长轴上相关基因 GH、GHBP和IGF-1在慢长型 和快长型武定鸡中的浓度变化,结合测量的武定鸡的体尺指数,确定慢长型和快长型武定 鸡体型血液生化标记,筛选优质鸡只,为武定鸡的早期育种提供理论基础,同时也是探索武 定鸡的育种新方法,为云南地方鸡种在育种工作中提供新思路。
【具体实施方式】
[0019] 实施例1
[0020] 1.慢长型与快长型武定鸡体尺的测量
[0021] 在慢长型武定鸡家系和快长型武定鸡家系中随机选取一月龄和二月龄慢长型和 快长型武定鸡各90只(一月龄各45只,二月龄各45只),停食12h,分别测量其体斜长、胸宽、 胸深、龙骨长、胫长、胫围和骨盆宽(体斜长为沿体表测量肩关节至坐骨结节间距离;胸宽为 肩关节之间的距离;胸深为第一胸椎到龙骨前缘的距离;龙骨长为从龙骨前端到末端的距 离;胫长为从胫部上关节到第三、四趾间的直线距离;胫围为胫部中部的周长;骨盆宽为两 腰角间宽)。
[0022] 2.血液的采集和血浆的制备
[0023]选择用含有EDTA二钾的抗凝剂的采血管收集血液,混合后,采用低温3000rpm离心 10分钟,仔细收集上清,即为所需要的血浆。
[0024] 3.武定鸡生长相关基因酶联免疫(ELISA)分析
[0025]按照鸡生长因子(GH)、鸡生长激素结合蛋白(GHBP)和鸡胰岛素样生长因子(IGF-1)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒进行严格规范操作,应用双抗体夹心法测定样品中鸡的相 关基因的水平,然后用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(0D值),最后通过标准曲线计算样 品中鸡生长因子(GH)、鸡生长激素结合蛋白(GHBP)和鸡胰岛素样生长因子(IGF-1)含量。 [0026] 4.统计结果
[0027]表1 一月龄武定鸡体尺数据(cm)
[0028]
[0029] 注:同行数据,小、大写字母表示差异显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)
[0030] 表2二月龄武定鸡体尺数据(cm)
[0031]
[0032] 注:同行数据,大写字母表示极显著(P<0.01)
[0033] 表3 -月龄武定鸡生长相关基因 GH、GHBP和IGF-1的含量
[0034]
[0035] 衷4二月龄武宙鸡牛长相关某闵GH、GHRP和TGF-1的含量
[0036]
[0037] 表5 -月龄慢鸡生长相关基因与体尺相关性分析
[0038]
[0039] 注:**表示在0.01水平(双侧)上显著相关;*表示在0.05水平(双侧)上显著相关。
[0040] 表6 -月龄快鸡生长相关基因与体尺相关性分析
[0041]
[0042] 注:**表示在0.01水平(双侧)上显著相关;*表示在0.05水平(双侧)上显著相关。
[0043] 表7二月龄慢鸡生长相关基因与体尺相关性分析
[0044]
[
[0046] 注:**表示在0.01水平(双侧)上显著相关;*表示在0.05水平(双侧)上显著相关。
[0047] 表8二月龄快鸡生长相关基因与体尺相关性分析
[0048]
[0049] 注:**表示在0.01水平(双侧)上显著相关;*表示在0.05水平(双侧)上显著相关。 [0050] 5.结果分析
[0051]由表1和表2可知,一月龄武定鸡的体尺数据:慢鸡的胸深、胫长和骨盆宽都显著的 低于快鸡(P<〇.05),慢鸡的体斜长和龙骨长都极显著的低于快鸡(P<0.01);二月龄武定 鸡的体尺数据:慢鸡的体斜长、胸宽、龙骨长、胫长和骨盆宽均极显著的低于快鸡(P< 0.01)。由表3和表4可知,生长相关基因 GH、GHBP和IGF-1的含量。通过将一月龄和二月龄武 定鸡生长相关基因与体重相关性分析可知,胫围和龙骨长呈显著的正相关,相关系数为 0.888;骨盆宽与胸深和胫长呈显著的正相关,相关系数分别为0.915和0.883;GH与体斜长 呈显著的正相关,相关系数为0.936;骨盆宽与IGF-1呈显著的负相关,相关系数为-0.932 (见表5)。胸深和胸宽呈显著的正相关,相关系数为0.929;龙骨长和体斜长呈显著的正相 关,相关系数为〇. 884; GHBP与龙骨长呈显著的正相关,相关系数为0.894;骨盆宽与IGF-1呈 显著的正相关,相关系数为0.883(见表6) AH与胸宽呈显著的正相关,相关系数为0.925; GHBP与胸深呈显著的正相关,相关系数为0.941,与胫围呈显著的负相关,相关系数为-0.954; IGF-1与胸深、胫围均呈显著的负相关,相关系数分别为-0.928和-0.924(见表7)。体 斜长和胸宽呈显著的正相关,相关系数为0.945;龙骨长和体斜长、胸宽均呈显著的正相关, 相关系数分别为〇. 927和0.913 ;GH与胫长呈显著的负相关,相关系数为-0.870 ;GH和GHBP呈 极显著的正相关,相关系数为0.967;胫围与IGF-1呈显著的正相关,相关系数为0.907(见表 8) 〇
[0052] 由上述相关性数据结果得出,生长轴相关基因 GH、GHBP和IGF-1对早期慢长和快长 型武定鸡的体型变化有决定性作用,尤其是IG
当前第1页1 2 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1