一种脂蛋白磷脂酶a2测定试剂盒及其使用方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种脂蛋白磷脂酶A2测定试剂盒及其使用方法。
【背景技术】
[0002]脂蛋白相关性磷脂酶A2是磷脂酶A2超家族的成员。循环中的脂蛋白相关性磷脂酶A2是一种主要由巨噬细胞产生的反映血管炎症的特异性标记物，在低密度脂蛋白的氧化、促进动脉粥样硬化以及冠心病和卒中的形成等方面发挥重要作用。脂蛋白相关性磷脂酶A2水平升高是预测冠心病和卒中风险的一种独立危险因子。但目前所使用的关于脂蛋白磷脂酶A2测定试剂盒其准确性低，且操作复杂，不易推广。
【发明内容】
[0003]本发明的目的在于提供一种脂蛋白磷脂酶A2测定试剂盒及其使用方法，其通过胶乳增强免疫比浊法，操作简单，准确性高，便于推广。
[0004]为了达到上述目的，本发明的技术方案是:
一种脂蛋白磷脂酶A2测定试剂盒，包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括第一检测液磷酸盐缓冲液、聚乙二醇，各组份的组成按重量百分比计分别为:第一检测液磷酸盐缓冲液95—99%，聚乙二醇I一5%；第二检测液包括第二检测液磷酸盐缓冲液、鼠抗人Lp-PLA2单克隆抗体的致敏乳胶颗粒，各组份的组成按重量百分比计分别为:第二检测液磷酸盐缓冲液97—99%，鼠抗人Lp-PLA2单克隆抗体的致敏乳胶颗粒I一3%。
[0005]第一检测液包括第一检测液磷酸盐缓冲液、聚乙二醇，各组份的组成按重量百分比计分别为:第一检测液磷酸盐缓冲液98.7%，聚乙二醇1.3%;第二检测液包括第二检测液磷酸盐缓冲液、鼠抗人Lp-PLA2单克隆抗体的致敏乳胶颗粒，各组份的组成按重量百分比计分别为:第二检测液磷酸盐缓冲液99%，鼠抗人Lp-PLA2单克隆抗体的致敏乳胶颗粒1%。
[0006]所述第一检测液磷酸盐缓冲液为PH值为6.5的磷酸盐缓冲液。
[0007]所述第二检测液磷酸盐缓冲液为PH值为8.0的磷酸盐缓冲液。
[0008]所述聚乙二醇采用聚乙二醇6000。
[0009]—种脂蛋白磷脂酶A2测定试剂盒的使用方法，包括如下步骤:首先准备第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管;接着在第一试剂管内加入第一检测液240yL，蒸馏水12yL混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第一检测液240yL，标准液12yL混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第一检测液240yL，检测液12yL混合均匀并孵育5分钟；然后在第一试剂管内加入第二检测液加入70yL混合均匀并孵育I分钟，同时在第二试剂管内加入第二检测液加入70yL混合均匀并孵育I分钟，同时在第三试剂管内加入第二检测液加入70yL混合均匀并孵育I分钟；最后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管在546 nm波长检测反应液吸光度的变化，其变化程度与标准液中的Lp_PLA2含量成正比，从而测得检测液中Lp-PLA2含量。
[0010]所述孵育时的温度均为37°C。
[0011]检测液中的脂蛋白磷脂酶A2在磷酸盐缓冲系统中与试剂中鼠抗人LP-PLA2单克隆抗体的致敏乳胶颗粒发生抗原抗体反应，在促聚剂聚乙二醇作用下产生凝集以使浊度上升，在546 nm波长检测反应液吸光度的变化，其变化程度与样本中的Lp_PLA2含量成正比。
[0012]本发明的有益效果是:一种脂蛋白磷脂酶A2测定试剂盒及其使用方法，其通过胶乳增强免疫比浊法，操作简单，准确性高，便于推广。
【具体实施方式】
[0013]实施例1
一种脂蛋白磷脂酶A2测定试剂盒，包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括第一检测液磷酸盐缓冲液、聚乙二醇，各组份的组成按重量百分比计分别为:第一检测液磷酸盐缓冲液98.7%，聚乙二醇1.3%;第二检测液包括第二检测液磷酸盐缓冲液、鼠抗人Lp-PLA2单克隆抗体的致敏乳胶颗粒，各组份的组成按重量百分比计分别为:第二检测液磷酸盐缓冲液99%，鼠抗人Lp-PLA2单克隆抗体的致敏乳胶颗粒1%。
[0014]所述第一检测液磷酸盐缓冲液为PH值为6.5的磷酸盐缓冲液。所述第二检测液磷酸盐缓冲液为PH值为8.0的磷酸盐缓冲液。所述聚乙二醇采用聚乙二醇6000。
[0015]一种脂蛋白磷脂酶A2测定试剂盒的使用方法，包括如下步骤:首先准备第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管;接着在第一试剂管内加入第一检测液240yL，蒸馏水12yL混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第一检测液240yL，标准液12yL混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第一检测液240yL，检测液12yL混合均匀并孵育5分钟；然后在第一试剂管内加入第二检测液加入70yL混合均匀并孵育I分钟，同时在第二试剂管内加入第二检测液加入70yL混合均匀并孵育I分钟，同时在第三试剂管内加入第二检测液加入70yL混合均匀并孵育I分钟；最后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管在546 nm波长检测反应液吸光度的变化，其变化程度与标准液中的Lp_PLA2含量成正比，从而测得检测液中Lp-PLA2含量。所述孵育时的温度均为37°C。
[0016]本实施例的一种脂蛋白磷脂酶A2测定试剂盒及其使用方法，其通过胶乳增强免疫比浊法，操作简单，准确性高，便于推广。
[0017]实施例2
一种脂蛋白磷脂酶A2测定试剂盒，包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括第一检测液磷酸盐缓冲液、聚乙二醇，各组份的组成按重量百分比计分别为:第一检测液磷酸盐缓冲液95%，聚乙二醇5%；第二检测液包括第二检测液磷酸盐缓冲液、鼠抗人Lp-PLA2单克隆抗体的致敏乳胶颗粒，各组份的组成按重量百分比计分别为:第二检测液磷酸盐缓冲液98%，鼠抗人Lp-PLA2单克隆抗体的致敏乳胶颗粒2%。
[0018]所述第一检测液磷酸盐缓冲液为PH值为6.5的磷酸盐缓冲液。所述第二检测液磷酸盐缓冲液为PH值为8.0的磷酸盐缓冲液。所述聚乙二醇采用聚乙二醇6000。
[0019]一种脂蛋白磷脂酶A2测定试剂盒的使用方法，包括如下步骤:首先准备第一试剂管、第二试剂管、第三试