977C 质谱仪(Agilent，USA);增强型脂质去除产品(；Enhanced Matrix Removal，EMR)购于美国安 捷伦科技有限公司。
[002；3]试剂 乙腊、丙酬、正己烧化PLC级，Merke，Germany);无水硫酸儀、氯化钢为分析纯，均购自国 药集团化学试剂有限公司。
[0024] 标准物质:纯度98.0 %，购自美国Sigma公司。
[0025] 实施例1:猪肉中化嚷菌胺残留量的检测
[0026] (1)样品前处理
[0027] 提取 称取经充分混匀的5g猪肉样品于50mL离屯、管中，加入lOmL水复苏30min后，准确加入 20mL乙腊溶液，振荡提取20min，超声提取5min，加入3g无水硫酸儀和2g氯化钢，满旋Imin 后，7000;r/min离屯、5min后，待净化。
[00測净化 加入4mL水于装有增强型脂质去除产品EMR的净化管中，满旋使其充分活化，移取6mL样 品提取液于活化好的EMR净化管中，满旋Imin后，700化/min离屯、5min，转移全部上清液至装 有无水硫酸儀和氯化钢的离屯、管中进行盐析，满旋离屯、后，移取4MJ:清液，浓缩至干后，用 体积比为1/1的丙酬/正己烧混合溶剂溶解定容，过膜后，待气相色谱-电子轰击离子源-质 谱(GC-EI-MS)检测。
[0029] (2)标准工作溶液的配制 准确称取25 ± 0.1 mg标准品于25mL容量瓶中，用乙腊溶解，定容得1000.0 yg/mL标准储 备液;移取l.OmL标准储备液置于lOOmL容量瓶中，用用体积比为1/1的丙酬/正己烧混合溶 剂定容得到10.Oyg/mL标准中间液;将lOyg/mL标准溶液稀释配成5、2、1、0.5、0.2、0.化g/mL 标准溶液。将不含化嚷菌胺的猪肉空白样品按上述前处理步骤处理，得样品提取净化残渣， 在此残渣中加入9(Κ)化体积比为1/1的丙酬/正己烧混合溶剂和10化L上述标准溶液，满旋混 匀，配成10、20、50、100、200、500yg/L基质标准工作溶液。
[0030] (3)气相色谱-电子轰击离子源-质谱法(GC-EI-MS)测定 将不同浓度梯度的标准工作液分别注入GC-EI-MS，W外标法进行化嚷菌胺含量的定量 分析，即W标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线;在相 同条件下将样品提取液注入GC-EI-MS进行测定，测得样品液中化嚷菌胺的色谱峰面积，代 入标准工作曲线，得到样品液中化嚷菌胺含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得 到样品中化嚷菌胺残留量。
[0031] 其中色谱条件为：
[0032] 色谱柱:HP-5MS毛细管色谱柱，柱长30m，内径0.25mm，膜厚0.25皿。
[0033] 进样口溫度:250. (TC，进样模式:不分流进样，进样量:lyL。
[0034] 载气:化，恒流模式，流速1. OmL/min。
[0035] 炉箱升溫程序:初溫60°C保持2min，W每分钟20°C的速度升至200°C，然后W每分 钟2°C的速度升至220°C，再W每分钟20°C的速度升至280°C，保持lOmin。
[0036] 传输线溫度:280°C。
[0037] 其中，质谱参数为：
[0038] 电离模式:电子轰击电离，目陳模式，能量70eV。
[0039] 离子源溫度：150°C ;四极杆溫度150°C。
[0040] 扫描方式：选择离子监测（SIM)模式；SIM监测的离子为：302.1、177.0、359.1、 166.1;定量离子为302.1。
[0041] 定性鉴定:在相同的条件下，如果样液中农药色谱峰保留时间与标准溶液中相应 农药保留时间相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，所选择的离子均出现，而且离子 丰度比与标准溶液的离子丰度比相一致，则可判断样液中存在运种农药;若上述两个条件 不能同时满足，则判断不含该种农药。
[0042] 线性关系： W标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线为Υ = 3323.31Χ-28747.46，相关系数为0.9993。
[0043] 加标回收率和重复性： 在不含化嚷菌胺的猪肉中加入10、20和20化g/kg 3个浓度水平的化嚷菌胺标准溶液， 待农药添加30min后按上述处理步骤进行残留量测定，将测定浓度与农药理论添加浓度进 行比较，得到农药添加回收率，每个添加水平平行测定6次，得其相对标准偏差，测定结果见 表1。由表1可W看出，在3个加标水平上，化嚷菌胺的平均回收率为92.7%~93.4%，平均相 对标准偏差(RSD)为4.9 %~7.6 %，说明本发明方法的回收率高，重复性好。
[0044] 表1化嚷菌胺的回收率和重复性(n = 6)
[0045] 检出限； 将不同浓度的化嚷菌胺基质标准工作溶液注入GC-EI-MS，W最低浓度基质标准溶液色 谱峰的3倍信噪比和样品处理过程的浓缩倍数(猪肉的浓缩倍数为1.0倍)计算检出限，化嚷 菌胺的检出限为4.3祉g/kg。
[0046] W上的实施例仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行 限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通工程技术对本发明的技术方案作出 的各种变型和改进，均应落入本发明的权利要求书确定的保护范围内。
【主权项】
1. 一种吡噻菌胺残留量的GC-EI-MS快速测定方法，其特征在于，所述方法包括以下步 骤： (1) 提取 称取混匀样品于具塞离心管中，加适量水后，加入乙腈溶液均质提取后，加入氯化钠和 无水硫酸镁，剧烈涡旋lmin后离心； (2) 净化 将增强型脂质去除产品EMR用水活化，移取样品提取液于活化好的EMR净化管中，祸旋 lmin后，7000r/min离心5min，转移全部上清液至装有无水硫酸镁和氯化钠的离心管中进行 盐析，涡旋离心后，移取一定体积的上清液，浓缩至干后，用体积比为1/1的丙酮/正己烷混 合溶剂溶解定容，过膜后，待气相色谱-电子轰击离子源-质谱(GC-EI-MS)检测； (3) 标准工作溶液的配制 将不含吡噻菌胺的同种类基质空白样品按上述步骤（1)、（2)处理，得样品提取净化残 渣，加入适量溶剂和标准溶液，涡旋混匀，配制成至少3个浓度的吡噻菌胺系列标准工作液； (4) 测定和结果计算 将步骤(3)中的各浓度梯度的标准工作液进行GC-EI-MS测定，以标准工作液的色谱峰 面积对其相应浓度进行回归分析，得到基质标准工作曲线;在相同条件下将步骤(2)中净化 后的样品液注入GC-EI-MS进行测定，测得样品液中吡噻菌胺的色谱峰面积，代入基质标准 工作曲线，得到样品液中吡噻菌胺含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到样品 中吡噻菌胺残留量;若上机溶液中吡噻菌胺残留量超过线性范围上限，需用定容溶剂将上 机溶液浓度稀释至线性范围之内。2. 根据权利要求1所述的一种吡噻菌胺残留量的GC-EI-MS快速测定方法，其特征在于， 步骤(1)中样品若为含水量较少的样品，提取前须加适量水充分浸润。3. 根据权利要求1所述的一种吡噻菌胺残留量的GC-EI-MS快速测定方法，其特征在于， 步骤(4)中GC-EI-MS分析条件为:色谱柱:HP-5MS毛细管色谱柱，柱长30m，内径0.25mm，膜厚 0. 25μπι;进样口温度250.0°C;载气：He，不分流模式进样，进样量：lyL;恒流模式，流速 1. OmL/min;升温程序:初温60°C保持2min，以每分钟20°C的速度升至200°C，然后以每分钟2 °C的速度升至220°C，再以每分钟20°C的速度升至280°C，保持lOmin;传输线温度:280°C ;电 离模式：电子轰击电离，即EI模式，能量70eV;离子源温度150°C ;扫描方式:选择离子监测 (SHO 模式，监测的离子为：302.1、177.0、359.1、166.1。
【专利摘要】本发明公开了一种吡噻菌胺残留量的GC-EI-MS快速测定方法，该方法主要用于测定脂肪含量高的动物源性食品中残留的吡噻菌胺含量的方法。用乙腈均质提取样品中残留的吡噻菌胺，提取液经增强型脂质去除产品（Enhanced？Matrix？Removal，EMR）基质分散净化、反萃管萃取浓缩后，气相色谱-电子轰击离子源-质谱（GC-EI-MS）检测，采用不含待测农药的空白基质溶液建立校正的标准工作曲线，外标法定量。本方法平均回收率为92.7%～93.4%，平均相对标准偏差（RSD）为4.9%～7.6%，检出限低于4.38？μg/kg，具有操作简便、快速、去杂效果好、灵敏度高、特征性强、重复性好、定性定量准确的优点。能满足美国、欧盟、日本等国家对相应产品安全检测的技术要求，为保障我国人民食品安全及对外出口贸易健康发展提供有力的技术支撑。
【IPC分类】G01N30/06, G01N30/02
【公开号】CN105628821
【申请号】CN201610067331
【发明人】郭庆龙
【申请人】郭庆龙
【公开日】2016年6月1日
【申请日】2016年1月30日