一种采用高效液相色谱检测面粉中荧光增白剂的方法
【专利说明】-种采用高效液相色谱检测面粉中黄光増白剂的方法
[技术领域]
[0001] 本发明设及一种采用高效液相色谱检测面粉中巧光增白剂的方法。
[【背景技术】]
[0002] 巧光增白剂是一种巧光染料，又称为白色染料，是一种能吸收不可见的紫外光(波 长300~400nm)，再激发出可见的蓝色或蓝紫色巧光(波长420~480nm)的复杂有机化合物。 其可用W补充所应用产品的蓝紫光不足，并增加照射到产品上的光的总反射量，从而使肉 眼看到的物质很白，达到增白增艳的效果。现今，世界上已生产的巧光增白剂约有15种类 型，近400余种化合物。商品剂型有粉状物、液状物、悬浮分散液等，按离子属性分为阴离子 性、阳离子性、非离子性。不同品种的巧光增白剂物化性能相异，使用条件、方法和对象也不 一，不同品种的巧光增白剂也有不同的产品质量标准。我国自改革开放W来巧光增白剂工 业有了大发展，先后开发出40余个品种的巧光增白剂，它们分属不同的化学结构类型，适用 于不同纤维及其混纺织物和不同增白工艺。目前巧光增白剂已广泛地应用于纸张、塑料、皮 革、洗涂剂等制造行业W及巧光探测、防伪印刷等高科技领域。
[0003] 现今面粉中巧光增白剂的来源主要有两方面:一方面为人为添加。不法商家为了 使面粉增白、护色，延长货架期，在销售前违法向面粉中喷洒、浸泡巧光增白剂或含有该成 分的保鲜剂。另一方面为包装材料污染。在包装、运输和销售过程中，面粉也可能和包装材 料接触污染而导致巧光增白剂检出。巧光增白剂中含有的一些特别活跃的分子，化学结构 与DNA的化学结构类似，较容易迁移到角质层、血液里，它不像一般化学成分那样容易被分 解，而是在人体内蓄积，产生许多有害的作用，大大削减人体免疫力，还会造成血液系统受 损，引起溶血现象。巧光增白剂被人体吸收后，能使人体细胞出现变异性倾向，其毒性累积 在肝脏或其他重要器官，成为潜在的致癌因素。国家卫生标准已明确规定：食品包装用原 纸、餐具洗涂剂、食品工具设备用洗涂剂与洗涂消毒剂中均不得检出巧光性物质，未见关于 面粉中巧光增白剂的测定的国家和行业标准，仅有2009年河北省地方标准DB13/T1114- 2009小麦粉中巧光增白剂的测定有相关报道，但是该标准采用紫外分光光度法进行检测， 该标准仅能对小麦粉中巧光增白剂进行定性分析，无法对巧光增白剂的种类和含量进行测 定，且人为误差大。
[0004] 本发明将分散液液微萃取技术运用于面粉中巧光增白剂的检测，为了提高萃取效 率，同时加入了超声萃取作为辅助，并通过关键影响因子的实验研究，确定了萃取过程最优 化条件。
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【发明内容】
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[0005] 本发明克服了上述技术的不足，提供了一种采用高效液相色谱检测面粉中巧光增 白剂的方法，其适用于大批量检测面粉样品。
[0006] 为实现上述目的，本发明采用了下列技术方案：
[0007] -种采用高效液相色谱检测面粉中巧光增白剂的方法，包括：
[000引 （1)、标准溶液配制：准确称取巧光增白剂C. 1.220、C. 1.162、C. 1.140、C. 1.199、 C. 1.393标准品约50.0 mg，于各自的50mL容量瓶中，用Ξ氯甲烧配制成质量浓度为Img/mL的 标准储备液，准确吸取储备液(C.I.220)7ml、（C. 1.162) 1ml、（C. 1.140)0.4ml、（C. 1.199) 0.2ml、（C. 1.393) 1ml于100ml容量瓶中，并用乙腊定容至刻度，配制成5种巧光增白剂的混 合溶液，然后进行高效液相色谱检测，绘制标准的高效液相色谱图；
[0009] (2)、超声辅助提取：称取1. Og面粉样品，用超纯水定容至5.0ml，50°C超声提取 lOmin，在10°C条件下HOOOr/min离屯、lOmin，上清液移入10ml锥形离屯、管中并加入 0.2gNaCl，满旋溶解2min，用KO田容液调抑至8.5;
[0010] (3)、分散液液微萃取:将分散剂25化L甲醇和萃取剂50化CHC13混合，用ImL的玻 璃注射器迅速注入（2)溶液中，轻晃离屯、管，混合形成水、甲醇、Ξ氯甲烧的乳浊液，W 450化/min离屯、5min，离屯、后的下层溶液用50化微型注射器取20化，进行高效液相色谱检 测；
[0011] (4)、高效液相色谱检测的条件为色谱柱：Ineパsil曲-3,4.6mmX250mm，5μm;柱 溫:35°C ;进样量：1化1;巧光检测器检测波长:发射波长λθχ: 365nm，激发波长Aem: 430nm;流 动相：A为20mmol乙酸锭溶液，B为甲醇，C为乙腊；流速为0.5mL/min;梯度洗脱：0~7min 75%A 相降至 65%，13.8%B 相升至 19.3%;保持2min;9~25min65%A相降至40%，19.3%B 相升至33% ;25min~35. Imin 40%A相降至20%，33%B相升至44% ;35. Imin~40min 20% A相降至0,44%B相升至55% ;40min~43min A相升至75%，55%B相降至13.8% ;保持5min。
[0012] 与现有技术相比，本发明的有益效果是：
[0013] 1、本方法对面粉样品进行了超声辅助提取和分散液液微萃取，然后过行高效液相 色谱检测，其只需少量分散剂、萃取剂，能够减少对检测人员的毒害作用，保护环境。
[0014] 2、本方法对面粉样品的前处理时间短，比传统的检测方法，节省了分析时间，因此 适用于大批量检测面粉样品。
[0015] 3、本方法超声辅助提取中采用了冷冻离屯、步骤，便于分离面粉溶液中杂质，W得 到小杂质的上清液，便于提高后序检测的准备性。
[0016] 4、采用本方法测定面粉中巧光增白剂，灵敏度高，检测限为0.05mg/kg~3.5mg/ kg。
[【附图说明】]
[0017] 图1是5种巧光增白剂标准图谱，其中图中标号1是巧光增白剂C. 1.220,标号2是巧 光增白剂C. 1.162，标号3是巧光增白剂C. 1.140，标号4是巧光增白剂C. 1.199,标号5是巧光 增白剂C. 1.393。
[001引图2是阴性空白样品色谱图。
[0019] 图3是阴性样品加标色谱图
[【具体实施方式】]
[0020] W下结合附图通过实施例对本发明特征及其它相关特征作进一步详细说明，W便 于同行业技术人员的理解：
[0021] 如图1所示，本发明首先确定最优条件的控制参数。影响超声辅助萃取和分散液液 微萃取效率的主要因素包括:萃取剂的选择、分散剂的选择、超声时间、抑值和盐浓度的影 响。
[0022] 萃取剂的选择:分散液相微萃取中萃取剂要求密度大于水，本发明考察了不同萃 取剂有氯苯、四氯化碳、二氯甲烧、环己烧和Ξ氯甲烧对回收率的影响，每组实验平行测定 Ξ次，结果表明，Ξ氯甲烧作为萃取剂对目标物的回收率达到最大，二氯甲烧和环己烧与分 散剂无法形成稳定的两相体系；相同体积下不同的萃取剂所形成的沉积相的体积液不同， 沉积相体积四氯化碳为25化，氯苯为50化，Ξ氯甲烧为25化，实验表明，Ξ氯甲烧有较高的 回收率，萃取效果最好，因此选用Ξ氯甲烧作为萃取剂。
[0023] 分散剂的选择:分散相一般采用能与水互溶的溶剂，本发明比较了甲醇、乙醇、乙 腊、异丙醇和海藻酸钢作为分散剂时的萃取性能，结果表明，甲醇作为分散剂时，其萃取效 率远远高于其他溶剂。萃取剂和分散剂的体积比也是影响萃取效率的重要因素之一，本发 明考