一种测定生发丸中有效成分含量的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种中药制剂的质量控制方法，具体涉及一种测定生发丸中有效成分 含量的方法。
【背景技术】
[0002] 目前，在生活中脱发给人们带来很多困扰，尤其增加了精神压力和思想包袱，而这 些又反作用影响了人们的病情;包括溢脂性脱发、感染性脱发、贫血性脱发、遗传性脱发、神 经过敏性脱发以及斑秃在内的脱发的大多病因在于气血虚热、肝肾不足等，针对脱发，市场 上已有很多生发药，现有市售的生发丸由制何首乌、盐补骨脂、牛膝、当归、茯苓、枸杞子、盐 菟丝子、女贞子、墨旱莲、桑椹、黑芝麻、熟地黄、桑寄生、核桃仁、沙苑子、蛇床子、紫河车、骨 碎补、黄芪、制黄精、五味子、灵芝、地黄、侧柏叶、苦参和山楂二十六味药制备而成，在临床 应用多年，其疗效不容置疑，但对于生发丸的质量控制，现行标准检查手段过于简单，相对 于目前中药质量控制的要求有较大的差距。故现有质量控制方法不能有效控制生发丸的质 量，从而影响产品的生产和质量。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于克服现有技术的缺点，提供一种测定生发丸中有效成分含量的 方法，该方法精密度和灵敏度高、稳定性好，操作简单、回收率高，确保了生发丸制剂质量的 安全、均一、稳定、有效、可控。
[0004] 本发明的目的通过以下技术方案来实现：一种测定生发丸中有效成分含量的方 法，包括制何首乌的含量的测定和盐补骨脂含量的测定，所述制何首乌含量的测定包括以 下步骤：
[0005] S1.色谱条件与系统适用性实验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水 为流动相，检测波长为320nm，理论板数按2，3，5，4 ' -四羟基二苯乙烯-2-0-?Η)_葡萄糖苷峰 计算应不低于3000;
[0006] S2.对照品溶液的制备:取2，3，5，4' -四羟基二苯乙烯-2-(H3-D-葡萄糖苷对照品 适量，精密称定，加稀乙醇制成每lml含0. lmg的溶液，即为对照品溶液；
[0007] S3.供试品溶液的制备：取生发丸蜜丸剪碎，取10g或生发丸水蜜丸6g，研细，精密 称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，称定重量，加热回流后用稀乙醇补足减失的 重量，摇匀后用微孔滤膜过滤，取滤液，即为供试品溶液；
[0008] S4.测定:分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μ1，注入高效液相色谱仪中 测定，本品含制何首乌以2,3,5,4'_四羟基二苯乙烯-2-〇-i3-D-葡萄糖苷计，水蜜丸每lg不 得少于〇. 23mg;大蜜丸每丸不得少于1.5mg;
[0009] 所述盐补骨脂含量的测定包括以下步骤：
[0010] (1)色谱条件与系统适用性实验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-水 为流动相，检测波长为246nm，理论板数按补骨脂素峰计算应不低于3000;
[0011] (2)对照品溶液的制备:取补骨脂素、异补骨脂素对照品适量，精密称定，加甲醇制 成每lml含10yg的混合溶液，即为对照品溶液；
[0012] (3)供试品溶液的制备:取生发丸蜜丸剪碎，取5g或生发丸水蜜丸3g，研细，精密称 定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理30min，用甲醇补足减失的重 量，摇匀后用微孔滤膜过滤，取滤液，即为供试品溶液；
[0013] (4)测定:分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μ1，注入高效液相色谱仪中 测定，本品含盐补骨脂以补骨脂素和异补骨脂素的总量计，水蜜丸每lg不得少于〇.12mg，大 蜜丸每丸不得少于0.76mg。
[0014] 进一步地，所述乙腈和水的体积比为1:5~7。
[0015] 进一步地，所述加热回流的温度为85~95°C，时间为25~35min。
[0016] 进一步地，所述甲醇和水的体积比为1:1.2~1.7。
[0017] 进一步地，所述超声处理的条件为:功率400~600W，频率为50~60KHz。
[0018] 本发明具有以下优点：本发明提供的一种测定生发丸中有效成分含量的方法，对 生发丸中药制剂的质量标准进行了提高、完善，采用高效液相色谱法对成分中的制何首乌 和盐补骨脂含量进行了测定，该方法精密度和灵敏度高、稳定性好，操作简便快捷、回收率 高，为其安全合理用药提供实验依据，确保了生发丸中药制剂质量的安全、均一、稳定、有 效、可控。
【具体实施方式】
[0019] 下面结合实施例对本发明做进一步的描述，本发明的保护范围不局限于以下所 述。
[0020] 实施例1:生发丸的制备 配方：制何首乌30g 盐补骨脂_1.5g 牛膝 _15g 当归 10g
[0021] 茯苓 l〇g 枸杞子 30:g 盐菟丝子20g 女贞子30g 墨旱莲30g 桑椹 30g 黑芝麻 30g 熟地黄15g 桑寄生30g 核桃仁 30g 沙苑子15g 蛇床子15g 紫河车3g 骨碎补 15g 黄芪 30g 制黄精30g
[0022] 五味子l_5g 灵芝 15g 地黄 1.5? 侧柏叶30g 苦参 10g 山楂 3€:g。
[0023]制备方法：以上二十六味，粉碎成细粉，过筛，混匀。每100g粉末加炼蜜35~50g与 适量的水，泛丸或制丸，干燥，制成水蜜丸;或加炼蜜1 〇〇~120g制成大蜜丸，即得。
[0024]实施例2:测定生发丸中有效成分含量，包括制何首乌的含量的测定和盐补骨脂含 量的测定，所述制何首乌含量的测定包括以下步骤：
[0025] S1.色谱条件与系统适用性实验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水 为流动相，乙腈和水的体积比为1:5，检测波长为320nm，理论板数按2，3，5，4' -四羟基二苯 乙稀-2-0-β-?-葡萄糖苷峰计算应不低于3000;
[0026] S2.对照品溶液的制备:取2，3，5，4' -四羟基二苯乙烯-2_(H3-D-葡萄糖苷对照品 适量，精密称定，加稀乙醇制成每lml含Ο. lmg的溶液，即为对照品溶液；
[0027] S3.供试品溶液的制备:取生发丸蜜丸取10g剪碎，研细，精密称定，置具塞锥形瓶 中，精密加入稀乙醇50ml，称定重量，加热回流后用稀乙醇补足减失的重量，加热回流的温 度为85°C，时间为25min，摇匀后用孔径为0.45μπι的微孔滤膜过滤，取滤液，即为供试品溶 液；
[0028] S4.测定:分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μ1，注入高效液相色谱仪中 测定，本品含制何首乌以2，3，5，4 ' -四羟基二苯乙烯-2-〇-i3-D-葡萄糖苷计，大蜜丸每丸不 得少于1.5mg;
[0029] 所述盐补骨脂含量的测定包括以下步骤：
[0030] (1)色谱条件与系统适用性实验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-水 为流动相，甲醇和水的体积比为1:1.2,检测波长为246nm，理论板数按补骨脂素峰计算应不 低于3000;
[0031] (2)对照品溶液的制备:取补骨脂素、异补骨脂素对照品适量，精密称定，加甲醇制 成每lml含10yg的混合溶液，即为对照品溶液；
[0032] (3)供试品溶液的制备:取生发丸蜜丸5g剪碎，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中， 精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理30min，超声处理的功率400W，频率为50KHz，用甲醇 补足减失的重量，摇匀后用孔径为〇.45μπι的微孔滤膜过滤，取滤液，即为供试品溶液；
[0033] (4)测定:分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μ1，注入高效液相色谱仪中 测定，本品含盐补骨脂以补骨脂素和异补骨脂素的总量计，大蜜丸每丸不得少于〇.76mg。
[0034] 实施例3:测定生发丸中有效成分含量，包括制何首乌的含量的测定和盐补骨脂含 量的测定，所述制何首乌含量的测定包括以下步骤：
[0035] S1.色谱条件与系统适用性实验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水 为流动相，乙腈和水的体积比为1:7，检测波长为320nm，理论板数按2，3，5，4' -四羟基二苯 乙稀-2-0-β-?-葡萄糖苷峰计算应不低于3000;
[0036] S2.对照品溶液的制备:取2，3，5，4' -四羟基二苯乙烯-2_(H3-D-葡萄糖苷对照品 适量，精密称定，加稀乙醇制成每lml含0. lmg的溶液，即为对照品溶液；
[0037] S3.供试品溶液的制备:取生发丸水蜜丸6g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精 密加入稀乙醇50ml，称定重量，加热回流后用稀乙醇补足减失的重量，加热回流的温度为95 °C，时间为35min，摇匀后用孔径为0.45μπι的微孔滤膜过滤，取滤液，即为供试品溶液；
[0038] S4.测定:分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μ1，注入高效液相色谱仪中 测定，本品含制何首乌以2,3,5,4'_四羟基二苯乙烯-2-〇-i3-D-葡萄糖苷计，水蜜丸每lg不 得少于〇.23mg;
[0039] 所述盐补骨脂含量的测定包括