超高效液相色谱检测冻干血栓通的方法
【技术领域】
[0001]本发明提供一种测定血栓通的方法，具体地说，是超高效液相色谱检测冻干血栓通的方法;属于化学检测技术领域。
【背景技术】
[0002]注射用血栓通(冻干)是用三七总皂苷，加注射用水，灌装，冷冻干燥，制成的制剂，收载于国家药品监督管理局标准(试行)WS-10460(ZD-0460)-2002。因为世界卫生组织(WH0)、美国食品与药物管理局(FDA)以及中国食品药品监督管理局(SFDA)等机构已经把HPLC指纹图谱作为一种可靠的质量控制方法。
【发明内容】
[0003]针对上述不足，本发明的目的是提供一种避免其他杂质干扰，高效省时，鉴定结果客观准确的检测血栓通的方法。
[0004]—种超高效液相色谱检测冻干血栓通的方法，依次包括下述步骤:
[0005]精密称取注射用血栓通0.5g，置1mL量瓶中，加水稀释至刻度，0.22μπι微孔滤膜滤过，取Ιμ?注入超高效液相色谱仪，所述的色谱条件如下:
[0006]色谱柱采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以含0.5%甲酸的水为流动相Α，乙腈为流动相B，按照的Α:Β的不同比例进行梯度洗脱;洗脱时间20分钟，紫外检测的检测波长287nm，
[0007]进一步的，上述的一种超高效液相色谱检测冻干血栓通的方法，所述的十八烷基娃烧键合娃胶的规格2.1mm X 50mm，1.7μηι。
[0008]进一步的，上述的一种超高效液相色谱检测冻干血栓通的方法，所述的高效液相色谱仪为岛津超高效液相色谱仪Nexera UHPLC LC-30A。
[0009]进一步的，上述的一种超高效液相色谱检测冻干血栓通的方法，所述的洗脱梯度#^:^nT:0-lmin，l%A、99%B;l-5min，20%-80%A、80%-20%B;5-7min，30%-70%A、70%-30%B；7-15min,40%-60%A^60%-40%B；15-20min,30%-70%A^70%-30%B；20-20.1min，80%A、20%Bo
[0010]与现有技术相比，本发明提供的技术方案通过该方法可得到准确的检测结果，避免其他杂质干扰，高效省时，鉴定结果客观准确，可用于注射用冻干型血栓通的质量控制。
【具体实施方式】
[0011]下面结合【具体实施方式】，对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对本发明的任何限制，任何在本发明权利要求保护范围所做的有限次的修改，仍在本发明的权利要求保护范围之内。
[0012]本发明所涉及的到百分含量浓度，除特殊说明外，溶质为液体的均为体积浓度，溶质为固体的均为质量浓度。
[0013]实施例1
[0014]—种超高效液相色谱检测冻干血栓通的方法，依次包括下述步骤:
[0015]精密称取注射用血栓通0.5g，置1mL量瓶中，加水稀释至刻度，0.22μπι微孔滤膜滤过，取Ιμ?注入岛津超高效液相色谱仪Nexera UHPLC LC-30A，所述的色谱条件如下:
[0016]色谱柱采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(2.1mm X 50mm，1.7μπι)，柱温35 V，以含0.5%甲酸的水为流动相Α，乙腈为流动相B，按照的Α:Β的不同比例进行梯度洗脱;洗脱时间20分钟，紫外检测的检测波长287nm，
[0017]所述的洗脱梯度参数如下:0-lmin，l%A、99%B;l-5min，20%-80%A、80%-20%B；5-7min,30%-70%A^70%-30%B；7-15min,40%-60%A^60%-40%B；15-20min,30%-70%A、70%-30%B;20-20.1min，80%A、20%B。
[0018]在上述色谱条件下测定三七皂苷Rl、人参皂苷Rgl和人参皂苷Rbl对照品，并与样品图谱中相应色谱峰进行比较，发现样品图谱中保留时间及紫外光谱分别与三七皂苷R1、人参皂苷Re和人参皂苷Rbl吻合，故样品指纹图谱中鉴定为三七皂苷R1、人参皂苷Rgl、人参皂苷Re、人参皂苷Rbl。
[0019]为了验证本法明提供的技术方案，取同一样品供试液，连续进样6次，进行精密度实验，图谱中共有峰的相对保留时间的相对标准差(RSD)分别为0.43 %、0.27 %、0.61 %、
0.21%、0.54%、0.20%、0.23%、0.28%、0.25%、0.19%、0.25%、0.19%。表明方法精密度较好。
[0020]取同一样品供试液，于2、4、8、12h进样，测定3次，指纹图谱中共有峰的相对峰面积的相对标准差(1^0)分别为1.02%、1.07%、1.35%、1.34%、1.14%、1.57%、1.51%、1.12%、1.43%、1.28%、1.21%、1.30%，表明供试液在2411内稳定。
【主权项】
1.一种超高效液相色谱检测冻干血栓通的方法，其特征在于，依次包括下述步骤: 精密称取注射用血栓通0.5g，置1mL量瓶中，加水稀释至刻度，0.22μπι微孔滤膜滤过，取Ιμ?注入超高效液相色谱仪，所述的色谱条件如下: 色谱柱采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以含0.5%甲酸的水为流动相Α，乙腈为流动相B，按照的Α:Β的不同比例进行梯度洗脱;洗脱时间20分钟，紫外检测的检测波长287nm02.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱检测冻干血栓通的方法，其特征在于，所述的十八烷基硅烷键合硅胶的规格2.1mm X 50mm，1.7μπι。3.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱检测冻干血栓通的方法，其特征在于，所述的高效液相色谱仪为岛津超高效液相色谱仪Nexera UHPLC LC-30A。4.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱检测冻干血栓通的方法，其特征在于，所述的洗脱梯度参数如下:0-lmin，l%A、99%B;l-5min，20%-80%A、80%-20%B;5-7min，30%-70%A^70%-30%B；7-15min,40%-60%A^60%-40%B；15-20min,30%-70%A^70%-30%B;20-20.1min，80%A、20%B。
【专利摘要】本发明提供了一种超高效液相色谱检测冻干血栓通的方法，旨在提供一种避免其他杂质干扰，高效省时，鉴定结果客观准确的检测血栓通的方法；该方法依次包括下述步骤：精密称取注射用血栓通0.5g，置l0mL量瓶中，加水稀释至刻度，0.22μm微孔滤膜滤过，取1μl注入超高效液相色谱仪，所述的色谱条件如下：色谱柱采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以含0.5％甲酸的水为流动相A，乙腈为流动相B，按照的A∶B的不同比例进行梯度洗脱；洗脱时间20分钟，紫外检测的检测波长287nm；属于化学检测技术领域。
【IPC分类】G01N30/02
【公开号】CN105675769
【申请号】CN201610259518
【发明人】陈学松, 林冬杰, 李亚, 梁慧敏, 李澄
【申请人】广西壮族自治区梧州食品药品检验所
【公开日】2016年6月15日
【申请日】2016年4月25日