一种高粱种植土壤中倍硫磷含量的检测方法
【专利摘要】本发明涉及土壤检测领域，公开了一种高粱种植土壤中倍硫磷含量的检测方法，步骤包括：样品的处理；绘制标准曲线；待测样品含量测定。本发明采用高效液相色谱技术检测高粱种植土壤中倍硫磷的含量，若高粱种植土壤中倍硫磷含量过高，则农民可以进行相应的处理，避免倍硫磷含量未知的情况下种植高粱所带来的经济损失，且本发明简便快速，精确度高。
【专利说明】
一种高粱种植土壤中倍硫磷含量的检测方法
技术领域
[0001]本发明涉及土壤检测领域，具体是一种高粱种植土壤中倍硫磷含量的检测方法。
【背景技术】
[0002]高粱性喜温暖，抗旱、耐涝。按性状及用途可分为食用高粱、糖用高粱、帚用高粱等类。中国栽培较广，以东北各地为最多。食用高粱谷粒供食用、酿酒。糖用高粱的杆可制糖浆或生食;帚用高粱的穗可制笤帚或炊帚;嫩叶阴干青贮，或晒干后可作饲料;颖果能入药，能燥湿祛痰，宁心安神。属于经济作物。随着人们对杂粮食品的追求，高粱越来越受到市场的欢迎，种植面积越来越高。
[0003]在农作物种植过程中，为了防治病虫害，一般需要喷洒杀虫剂。杀虫剂使用历史长远、用量大、品种多。在二十世纪，农业的迅速发展，杀虫剂令农业产量大升。倍硫磷是一种常用的杀虫剂，对于水稻的二化螟、三化螟、飞虱、稻叶蝉，棉花的棉铃虫、红铃虫，蔬菜的菜青虫、菜蚜虫，果树的食心虫，大豆的卷叶螟均有防治效果，因此使用广泛。但倍硫磷容易对高粱产生药害，若种植土壤中的倍硫磷含量超标，则极易造成高粱的减产，给农民带来经济损失。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于提供一种高粱种植土壤中倍硫磷含量的检测方法，以解决上述【背景技术】中提出的问题。
[0005]为实现上述目的，本发明提供如下技术方案:
[0006]—种高粱种植土壤中倍硫磷含量的检测方法，步骤如下:
[0007]I)样品的处理:
[0008]1.1)称取适量土壤样品于锥形瓶中，加入lmol/L盐酸5ml和甲醇5ml，摇匀，浸泡5-6h后，机械振荡40_50min，并在5000-6000rmp下离心处理10_15min，过滤，将滤液装入分液漏斗中，残渣部分再加10-15ml甲醇振荡30-40min，过滤，合并滤液到分液漏斗中；
[0009]1.2)向滤液中加入8%NaCl水溶液120ml、石油醚80ml，振摇后静置分层；
[0010]1.3)将分液漏斗的下层水相放入另一分液漏斗，有机相用8%NaCl水溶液80ml反萃取一次，弃去石油醚液，合并水溶液，加入二氯甲烷分三次萃取，获得二氯甲烷液；
[0011]1.4)将二氯甲烷液用无水硫酸钠脱水，过滤于圆底烧瓶中，滤液在真空旋转蒸发器上减压浓缩至干；
[0012]1.5)取SPE-C18柱，用15ml甲醇预淋脱活，顶干，再用30ml去离子水淋洗，顶干，样品用20ml体积比为8:2的石油醚和乙酸乙酯混合液分三次转入柱内，淋洗液弃去，再用20ml体积比为2:8的石油醚和乙酸乙酯混合液淋洗，收集淋洗液，浓缩至干，用甲醇定容至lml，过0.45μπι滤膜后，得到土壤的样品溶液；
[0013]2)绘制标准曲线:
[0014]2.1)准确称量倍硫磷标准品1mg，放入1ml的容量瓶中，用甲醇稀释并定容，摇匀得lOOOmg/L的标准储备液；
[0015]2.2)选用空白土壤试样按步骤I)提取后，得到空白土壤样品提取液；
[0016]2.3)用空白土壤样品提取液将倍硫磷标准储备液稀释成20、10、5、2.5、1.0、0.5、
0.25、0.10、0.01、0.05mg/mL 的标准工作液；
[0017]2.4)将步骤2.3)所获得的各个标准工作液分别进行色谱分析，采用外标法定量，即用倍硫磷标样所对应的峰面积为Y轴对其相应浓度为X轴进行线性回归分析，绘制标准曲线，色谱条件为:检测器:DAD ；色谱柱:InertsiI 0DS-3，4.6mmX 250mm, 5μηι；流动相:乙腈与水体积比50:50，其中水用磷酸调pH值到4左右;流速:1.0mL/min；检测波长:220nm;进样量:10yL；
[0018]3)待测样品含量测定:
[0019]3.1)称取适量土壤样品，按照步骤I)进行处理，获得待测土壤样品提取液；
[0020]3.2)将待测土壤样品提取液进行色谱分析，根据分析结果，并结合步骤2)获得的标准曲线，获得样品中的倍硫磷含量，色谱条件与步骤2.4)中的色谱条件相同。
[0021 ]作为本发明进一步的方案:所述土壤样品采自高粱种植田O-1Ocm的表层土壤，且经过风干、研磨、过100目筛后，保存备用。
[0022]与现有技术相比，本发明的有益效果是:本发明采用高效液相色谱技术检测高粱种植土壤中倍硫磷的含量，若高粱种植土壤中倍硫磷含量过高，则农民可以进行相应的处理，避免倍硫磷含量未知的情况下种植高粱所带来的经济损失。本发明简便快速，精确度尚O
【具体实施方式】
[0023]下面结合【具体实施方式】对本发明的技术方案作进一步详细地说明。
[0024]实施例1
[0025]一种高粱种植土壤中倍硫磷含量的检测方法，步骤如下:
[0026]I)样品的处理:
[0027]1.1)称取适量土壤样品于锥形瓶中，加入lmol/L盐酸5ml和甲醇5ml，摇匀，浸泡5h后，机械振荡40min，并在5000rmp下离心处理1min，过滤，将滤液装入分液漏斗中，残渣部分再加1ml甲醇振荡30min，过滤，合并滤液到分液漏斗中；
[0028]1.2)向滤液中加入8 % NaCl水溶液120ml、石油醚80ml，振摇后静置分层；
[0029]1.3)将分液漏斗的下层水相放入另一分液漏斗，有机相用8%NaCl水溶液80ml反萃取一次，弃去石油醚液，合并水溶液，加入二氯甲烷分三次萃取，获得二氯甲烷液；
[0030]1.4)将二氯甲烷液用无水硫酸钠脱水，过滤于圆底烧瓶中，滤液在真空旋转蒸发器上减压浓缩至干；
[0031 ] 1.5)取SPE-C18柱，用15ml甲醇预淋脱活，顶干，再用30ml去离子水淋洗，顶干，样品用20ml体积比为8:2的石油醚和乙酸乙酯混合液分三次转入柱内，淋洗液弃去，再用20ml体积比为2:8的石油醚和乙酸乙酯混合液淋洗，收集淋洗液，浓缩至干，用甲醇定容至lml，过0.45μπι滤膜后，得到土壤的样品溶液；
[0032]2)绘制标准曲线:
[0033]2.1)准确称量倍硫磷标准品10mg，放入1ml的容量瓶中，用甲醇稀释并定容，摇匀得lOOOmg/L的标准储备液；
[0034]2.2)选用空白土壤试样按步骤I)提取后，得到空白土壤样品提取液；
[0035]2.3)用空白土壤样品提取液将倍硫磷标准储备液稀释成20、10、5、2.5、1.0、0.5、0.25、0.10、0.01、0.05mg/mL 的标准工作液；
[0036]2.4)将步骤2.3)所获得的各个标准工作液分别进行色谱分析，采用外标法定量，即用倍硫磷标样所对应的峰面积为Y轴对其相应浓度为X轴进行线性回归分析，绘制标准曲线，色谱条件为:检测器:DAD ；色谱柱:InertsiI 0DS-3，4.6mmX 250mm, 5μηι；流动相:乙腈与水体积比50:50，其中水用磷酸调pH值到4左右;流速:1.0mL/min；检测波长:220nm;进样量:10yL；
[0037]3)待测样品含量测定:
[0038]3.1)称取适量土壤样品，按照步骤I)进行处理，获得待测土壤样品提取液；
[0039]3.2)将待测土壤样品提取液进行色谱分析，根据分析结果，并结合步骤2)获得的标准曲线，获得样品中的倍硫磷含量，色谱条件与步骤2.4)中的色谱条件相同。
[0040]所述土壤样品采自高粱种植田0-4cm的表层土壤，且经过风干、研磨、过100目筛后，保存备用。
[0041 ] 实施例2
[0042]一种高粱种植土壤中倍硫磷含量的检测方法，步骤如下:
[0043]I)样品的处理:
[0044]1.1)称取适量土壤样品于锥形瓶中，加入lmol/L盐酸5ml和甲醇5ml，摇匀，浸泡6h后，机械振荡50min，并在OOOrmp下离心处理15min，过滤，将滤液装入分液漏斗中，残渣部分再加15ml甲醇振荡40min，过滤，合并滤液到分液漏斗中；
[0045]1.2)向滤液中加入8 % NaCl水溶液120ml、石油醚80ml，振摇后静置分层；
[0046]1.3)将分液漏斗的下层水相放入另一分液漏斗，有机相用8%NaCl水溶液80ml反萃取一次，弃去石油醚液，合并水溶液，加入二氯甲烷分三次萃取，获得二氯甲烷液；
[0047]1.4)将二氯甲烷液用无水硫酸钠脱水，过滤于圆底烧瓶中，滤液在真空旋转蒸发器上减压浓缩至干；
[0048]1.5)取SPE-C18柱，用15ml甲醇预淋脱活，顶干，再用30ml去离子水淋洗，顶干，样品用20ml体积比为8:2的石油醚和乙酸乙酯混合液分三次转入柱内，淋洗液弃去，再用20ml体积比为2:8的石油醚和乙酸乙酯混合液淋洗，收集淋洗液，浓缩至干，用甲醇定容至lml，过0.45μπι滤膜后，得到土壤的样品溶液；
[0049]2)绘制标准曲线:
[0050]2.1)准确称量倍硫磷标准品10mg，放入1ml的容量瓶中，用甲醇稀释并定容，摇匀得1000mg/L的标准储备液；
[0051]2.2)选用空白土壤试样按步骤I)提取后，得到空白土壤样品提取液；
[0052]2.3)用空白土壤样品提取液将倍硫磷标准储备液稀释成20、10、5、2.5、1.0、0.5、
0.25、0.10、0.01、0.05mg/mL 的标准工作液；
[0053]2.4)将步骤2.3)所获得的各个标准工作液分别进行色谱分析，采用外标法定量，即用倍硫磷标样所对应的峰面积为Y轴对其相应浓度为X轴进行线性回归分析，绘制标准曲线，色谱条件为:检测器:DAD ；色谱柱:InertsiI 0DS-3，4.6mmX 250mm, 5μηι；流动相:乙腈与水体积比50:50，其中水用磷酸调pH值到4左右;流速:1.0mL/min；检测波长:220nm;进样量:1yL;
[0054]3)待测样品含量测定:
[0055]3.1)称取适量土壤样品，按照步骤I)进行处理，获得待测土壤样品提取液；
[0056]3.2)将待测土壤样品提取液进行色谱分析，根据分析结果，并结合步骤2)获得的标准曲线，获得样品中的倍硫磷含量，色谱条件与步骤2.4)中的色谱条件相同。
[0057]所述土壤样品采自高粱种植田5-lOcm的表层土壤，且经过风干、研磨、过100目筛后，保存备用。
[0058]实施例3
[0059]一种高粱种植土壤中倍硫磷含量的检测方法，步骤如下:
[0060]I)样品的处理:
[0061 ] 1.1)称取适量土壤样品于锥形瓶中，加入lmol/L盐酸5ml和甲醇5ml，摇匀，浸泡
5.5h后，机械振荡45min，并在5500rmp下离心处理12min，过滤，将滤液装入分液漏斗中，残渣部分再加12ml甲醇振荡35min，过滤，合并滤液到分液漏斗中；
[0062]1.2)向滤液中加入8%NaCl水溶液120ml、石油醚80ml，振摇后静置分层；
[0063]1.3)将分液漏斗的下层水相放入另一分液漏斗，有机相用8%NaCl水溶液80ml反萃取一次，弃去石油醚液，合并水溶液，加入二氯甲烷分三次萃取，获得二氯甲烷液；
[0064]1.4)将二氯甲烷液用无水硫酸钠脱水，过滤于圆底烧瓶中，滤液在真空旋转蒸发器上减压浓缩至干；
[0065]1.5)取SPE-C18柱，用15ml甲醇预淋脱活，顶干，再用30ml去离子水淋洗，顶干，样品用20ml体积比为8:2的石油醚和乙酸乙酯混合液分三次转入柱内，淋洗液弃去，再用20ml体积比为2:8的石油醚和乙酸乙酯混合液淋洗，收集淋洗液，浓缩至干，用甲醇定容至lml，过0.45μπι滤膜后，得到土壤的样品溶液；
[0066]2)绘制标准曲线:
[0067]2.1)准确称量倍硫磷标准品10mg，放入1ml的容量瓶中，用甲醇稀释并定容，摇匀得1000mg/L的标准储备液；
[0068]2.2)选用空白土壤试样按步骤I)提取后，得到空白土壤样品提取液；
[0069]2.3)用空白土壤样品提取液将倍硫磷标准储备液稀释成20、10、5、2.5、1.0、0.5、
0.25、0.10、0.01、0.05mg/mL 的标准工作液；
[0070]2.4)将步骤2.3)所获得的各个标准工作液分别进行色谱分析，采用外标法定量，即用倍硫磷标样所对应的峰面积为Y轴对其相应浓度为X轴进行线性回归分析，绘制标准曲线，色谱条件为:检测器:DAD ；色谱柱:InertsiI 0DS-3，4.6mmX 250mm, 5μηι；流动相:乙腈与水体积比50:50，其中水用磷酸调pH值到4左右;流速:1.0mL/min；检测波长:220nm;进样量:10yL；
[0071]3)待测样品含量测定:
[0072]3.1)称取适量土壤样品，按照步骤I)进行处理，获得待测土壤样品提取液；
[0073]3.2)将待测土壤样品提取液进行色谱分析，根据分析结果，并结合步骤2)获得的标准曲线，获得样品中的倍硫磷含量，色谱条件与步骤2.4)中的色谱条件相同。
[0074]所述土壤样品采自高粱种植田O-1Ocm的表层土壤，且经过风干、研磨、过100目筛后，保存备用。
[0075]上面对本发明的较佳实施方式作了详细说明，但是本发明并不限于上述实施方式，在本领域的普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。
【主权项】
1.一种高粱种植土壤中倍硫磷含量的检测方法，其特征在于，步骤如下: 1)样品的处理: 1.1)称取适量土壤样品于锥形瓶中，加入lmol/L盐酸5ml和甲醇5ml，摇勾，浸泡5_6h后，机械振荡40_50min，并在5000-6000rmp下离心处理10_15min，过滤，将滤液装入分液漏斗中，残渣部分再加10-15ml甲醇振荡30-40min，过滤，合并滤液到分液漏斗中； 1.2)向滤液中加入8%NaCl水溶液120ml、石油醚80ml，振摇后静置分层； 1.3)将分液漏斗的下层水相放入另一分液漏斗，有机相用8%NaCl水溶液80ml反萃取一次，弃去石油醚液，合并水溶液，加入二氯甲烷分三次萃取，获得二氯甲烷液； 1.4)将二氯甲烷液用无水硫酸钠脱水，过滤于圆底烧瓶中，滤液在真空旋转蒸发器上减压浓缩至干； 1.5)取SPE-Cl8柱，用15ml甲醇预淋脱活，顶干，再用30ml去离子水淋洗，顶干，样品用20ml体积比为8:2的石油醚和乙酸乙酯混合液分三次转入柱内，淋洗液弃去，再用20ml体积比为2: 8的石油醚和乙酸乙酯混合液淋洗，收集淋洗液，浓缩至干，用甲醇定容至lml，过0.45μπι滤膜后，得到土壤的样品溶液； 2)绘制标准曲线: 2.1)准确称量倍硫磷标准品1mg，放入1ml的容量瓶中，用甲醇稀释并定容，摇勾得1000mg/L的标准储备液； 2.2)选用空白土壤试样按步骤I)提取后，得到空白土壤样品提取液； 2.3)用空白土壤样品提取液将倍硫磷标准储备液稀释成20、10、5、2.5、1.0、0.5、0.25、0.10、0.01、0.05mg/mL 的标准工作液； 2.4)将步骤2.3)所获得的各个标准工作液分别进行色谱分析，采用外标法定量，即用倍硫磷标样所对应的峰面积为Y轴对其相应浓度为X轴进行线性回归分析，绘制标准曲线，色谱条件为:检测器:DAD ；色谱柱:Inertsi I 0DS-3，4.6謹X 250mm, 5μηι ；流动相:乙腈与水体积比50:50，其中水用磷酸调pH值到4左右;流速:1.0mL/min ；检测波长:220nm;进样量:10yL； 3)待测样品含量测定: 3.1)称取适量土壤样品，按照步骤I)进行处理，获得待测土壤样品提取液； 3.2)将待测土壤样品提取液进行色谱分析，根据分析结果，并结合步骤2)获得的标准曲线，获得样品中的倍硫磷含量，色谱条件与步骤2.4)中的色谱条件相同。2.根据权利要求1所述的高粱种植土壤中倍硫磷含量的检测方法，其特征在于，所述土壤样品采自高粱种植田O-1Ocm的表层土壤，且经过风干、研磨、过100目筛后，保存备用。
【文档编号】G01N30/02GK105891354SQ201610194643
【公开日】2016年8月24日
【申请日】2016年3月31日
【发明人】宋美娟, 张宝同
【申请人】山东五洲检测有限公司