血液检测设备和血液检测方法
【专利摘要】本发明涉及血液检测设备和血液检测方法。本发明提供血液检测设备，其被配置为测量血液样品中的血球计数和电解质。所述血液检测设备包含：样品放置区，其中放置含有抗凝剂的血液样品，所述抗凝剂含有不是乙二胺四乙酸(EDTA)的钠盐、钾盐或钙盐的EDTA盐；和测量区，通过其进行放置在所述样品放置区的血液样品的血球计数和电解质的测量。
【专利说明】
血液检测设备和血液检测方法
[0001] 与相关申请的交叉引用
[0002] 根据35USC 119,本申请要求日本专利申请No. 2015-045074和No.2015-230005的 优先权，所述专利申请的公开内容通过引用并入本文中。
[0003] 本说明书中提到的所有出版物、专利申请和技术标准均通过引用并入本文中，如 同每个单独的出版物、专利申请或技术标准被特别地且单独地指示为通过引用并入的那样 的程度。
[0004] 背景
技术领域
[0005] 本发明涉及血液检测设备和血液检测方法，其被配置为测量血液样品中的血球计 数和电解质。
【背景技术】
[0006] 进行血液检测时，使用抗凝剂来抑制待被用作样本的血液样品的凝结。抗凝剂的 实例包括柠檬酸、柠檬酸钠、乙二胺四乙酸(EDTA)和肝素。通常，在这些抗凝剂中，不同抗凝 剂被用于不同目的(参见，例如，专利文件1和非专利文件1)。
[0007] 例如，有报告显示:肝素具有容易使白血细胞聚集且白血细胞聚集随时间增加的 性质。还有报告显示:在一些样本中，收集血液之后立即发现血小板聚集(参见，例如，非专 利文件2和3)。因此，人们认为:在使用肝素的血球计数检测中，不能准确测量白血细胞和血 小板。
[0008] 当随血液检测进行电解质测量时，在抗凝剂含有Na或K的情况下不能测量。因此， 使用不含Na和K的抗凝剂，例如肝素。
[0009] 专利文件1:日本国家阶段公开(JP-A)No.2008-510578
[0010] 非专利文件 1:EDTA …Selection of Anticoagulant in Blood Test.来自 Coulter No.18Sept,1992
[0011] 非专利文件 2 : Shiro Miwa 等人：Influence of Various Anticoagulants on Blood Count.Rinsho Byori 15(5)376-380,1967
[0012] 非专利文件3:Akemi Shimasaki等人：Platelet Aggregation Due to Mixing in Blood Collection Using Heparin.The Japanese Journal of Clinical Hematology 38 (4)323-330,1997
【发明内容】
[0013] 本发明要解决的问题
[0014] 在不同抗凝剂被用于不同目的的情况下，例如，肝素可被用于电解质测量，而 EDTA-2Na、2K和3K可被用于血球计数测量。在这些情况下，测量血球计数和电解质需要多个 含不同抗凝剂的血液收集管。因此，血液收集变得费力，导致检测花费提高和被收集血液的 患者的负担增加。
[0015] 因此，被配置为在单个血液收集管中测量血球计数和电解质二者的血液检测设备 和血液检测方法是优选的。
[0016] 本发明的一个实施方式旨在提供被配置为测量血液样品中的血球计数和电解质 的血液检测设备和血液检测方法。
[0017]解决问题的方法
[0018] 用于实现上述目标的具体方式如下。
[0019] 〈1>本发明的一个实施方式是血液检测设备，所述血液检测设备包含:样品放置 区，其中放置含有抗凝剂的血液样品，所述抗凝剂含有不是乙二胺四乙酸(EDTA)的钠盐、钾 盐或钙盐的EDTA盐;和测量区，通过其进行放置在所述样品放置区的血液样品的血球计数 和电解质的测量。
[0020] 〈2>根据〈1>的血液检测设备，其中所述测量区具有被配置为测量血液样品中的血 球计数的血球计数器和被配置为测量血液样品中的电解质的电解质测量仪器。
[0021] 〈3>根据〈1>或〈2>的血液检测设备，其中所述测量区测量血液样品中的血球计数 和电解质，此外，还测量血液样品中选自以下的至少一项:C_反应蛋白（CRP)、血清淀粉样蛋 白A(SAA)、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-I(IL-I)、al-抗胰蛋白酶、α?-抗胰凝乳蛋白 酶、α?-酸性糖蛋白、触珠蛋白（haptoglobin)、血衆铜蓝蛋白（ceruloplasmin)、肌f丐蛋白I (troponin I)、CK-MB、肌红蛋白（myoglobin)和心脏型脂肪酸结合蛋白（heart-type fatty acid-binding protein，H-FABP)〇
[0022] 〈4>根据〈1>至〈3>中任一项的血液检测设备，其中所述测量区测量血液样品中的 血球计数和电解质，此外，还测量血液样品中的C-反应蛋白（CRP)。
[0023] 〈5>本发明的一个实施方式是血液检测方法，其包括:提供含有抗凝剂的血液样品 的提供步骤，所述抗凝剂含有不是乙二胺四乙酸(EDTA)的钠盐、钾盐或钙盐的EDTA盐；以及 测量血液样品中的血球计数和电解质的测量步骤。
[0024] 〈6>根据〈5>的血液检测方法，其中所述测量步骤测量血液样品中的血球计数和电 解质，此外，还测量血液样品中选自以下的至少一项:C-反应蛋白（CRP)、血清淀粉样蛋白A (SAA)、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素 -I (IL-I)、a 1 -抗胰蛋白酶、a 1 -抗胰凝乳蛋白酶、α 1-酸性糖蛋白、触珠蛋白、血浆铜蓝蛋白、肌钙蛋白I、CK_MB、肌红蛋白和心脏型脂肪酸结合 蛋白（H-FABP)。
[0025] 〈7>根据〈5>或〈6>的血液检测方法，其中所述测量步骤测量血液样品中的血球计 数和电解质，此外，还测量血液样品中的C-反应蛋白（CRP)。
[0026] 〈8>本发明的一个实施方式是根据〈5>至〈7>中任一项的血液检测方法，其中EDTA 盐是至少一种选自以下的盐:m)TA的锂盐、钡盐、钴盐、镍盐和铵盐。
[0027] 〈9>本发明的一个实施方式是根据〈5>至〈8>中任一项的血液检测方法，其中EDTA 盐是EDTA的锂盐。
[0028] 〈10>本发明的一个实施方式是根据〈5>至〈9>中任一项的血液检测方法，其中EDTA 盐是通过将EDTA与金属氢氧化物(不包括氢氧化钠、氢氧化钾或氢氧化妈）以1:0.1-1:0.6 的EDTA:金属氢氧化物质量比混合而得到的。
[0029] 〈11>本发明的一个实施方式是根据〈5>至〈10>中任一项的血液检测方法，其中血 液样品中的EDTA盐浓度为0.5mg/mL_3. Omg/mL。
[0030] 〈12>本发明的一个实施方式是根据〈5>至〈11>中任一项的血液检测方法，其中血 液样品中的EDTA盐浓度为0.75mg/mL_l. 5mg/mL。
[0031] 发明的效果
[0032] 根据本发明的一个实施方式，能够提供被配置为测量血液样品中的血球计数和电 解质的血液检测设备和血液检测方法。
【附图说明】
[0033] 图l(a)-(c)是血液收集管l-3(EDTA-4H+Li0H)和血液收集管4(EDTA-2K)之间的白 血细胞计数结果比较图。图1(d)是血液收集管5(肝素 Li)和血液收集管4(EDTA-2K)之间的 白血细胞计数结果比较图。
[0034] 图2(a)-(c)是血液收集管l-3(EDTA-4H+Li0H)和血液收集管4(EDTA-2K)之间的红 血细胞计数结果比较图。图2(d)是血液收集管5(肝素 Li)和血液收集管4(EDTA-2K)之间的 红血细胞计数结果比较图。
[0035] 图3(a)-(c)是血液收集管l-3(EDTA-4H+Li0H)和血液收集管4(EDTA-2K)之间的血 小板计数结果比较图。图3(d)是血液收集管5(肝素 Li)和血液收集管4(EDTA-2K)之间的血 小板计数结果比较图。
[0036]图4(a)-(c)是血液收集管l-3(EDTA-4H+Li0H)和血液收集管5(肝素 Li)之间的CRP 测量结果比较图。图4(d)是血液收集管4(EDTA-2K)和血液收集管5(肝素 Li)之间的CRP测量 结果比较图。
[0037]图5(a)-(c)是血液收集管l-3(EDTA-4H+LiOH)和血液收集管5(肝素 Li)之间的Na 浓度测量结果比较图。图5(d)是血液收集管4(EDTA-2K)和血液收集管5(肝素 Li)之间的Na 浓度测量结果比较图。
[0038]图6(a)-(c)是血液收集管l-3(EDTA-4H+LiOH)和血液收集管5(肝素 Li)之间的K浓 度测量结果比较图。图6(d)是血液收集管4(EDTA-2K)和血液收集管5(肝素 Li)之间的K浓度 测量结果比较图。
[0039]图7(a)-(c)是血液收集管l-3(EDTA-4H+LiOH)和血液收集管5(肝素 Li)之间的Cl 浓度测量结果比较图。图7(d)是血液收集管4(EDTA-2K)和血液收集管5(肝素 Li)之间的Cl 浓度测量结果比较图。
【具体实施方式】
[0040] 发明详述
[0041] 以下描述了本发明的血液检测设备和血液检测方法的一个实施方式。
[0042] 在本说明书中，每个使用"……至……（……-……)"表示的数值范围均表示所述 范围包括分别在"至(_)"之前和之后描述的值作为下限和上限。
[0043][血液检测设备]
[0044]本发明的血液检测设备的一个实施方式包含样品放置区，其中放置含有抗凝剂的 血液样品，所述抗凝剂含有不是乙二胺四乙酸(EDTA)的钠盐、钾盐或钙盐的EDTA盐;和测量 区，通过其进行放置在样品放置区的血液样品的血球计数和电解质的测量。
[0045] 传统上，不同抗凝剂已被用于不同目的。肝素已被用于电解质测量，EDTA_2Na、2K 和3K已被用于血球计数测量。因此，在要测量血球计数和电解质的情况下，多个含有不同抗 凝剂的血液收集管(血液样品容器)是必需的。因此，血液收集变得费力，导致检测花费提高 和被收集血液的患者的负担增加。
[0046] 在本实施方式的血液检测设备中，将含有抗凝剂的血液样品放置在样品放置区， 所述抗凝剂含有不是EDTA的钠盐、钾盐或钙盐的EDTA盐;通过测量区测量放置在样品放置 区的血液样品的血球计数和电解质。因此，不需要使用用于不同目的的不同抗凝剂，可使用 一种抗凝剂或单个血液收集管来进行血液样品中的血球计数和电解质的测量。
[0047] 待使用本实施方式的血液检测设备进行测量的血液样品与之后描述的本实施方 式的血液检测方法中要使用的血液样品相同。
[0048]本实施方式的血液检测设备包含样品放置区，其中放置含有抗凝剂的血液样品， 所述抗凝剂含有不是EDTA的钠盐、钾盐或钙盐的EDTA盐。样品放置区不受限制，只要样品放 置区具有其中可以放置包含含Η)ΤΑ盐的抗凝剂的血液样品的构造，且血液样品中的血球计 数和电解质可通过之后描述的测量区来测量即可。样品放置区的实例包括可以放置含有血 液样品的血液收集管(血液样品容器）的地方，所述血液样品包含含EDTA盐的抗凝剂；以及 可以注入血液样品的容器。
[0049] 本实施方式的血液检测设备包含测量区，通过其进行放置在样品放置区的血液样 品的血球计数和电解质的测量。测量区可包含例如用于吸取血液样品的管嘴(nozzle)，以 及测量仪器，通过管嘴吸取的血液样品被提供给所述测量仪器以测量项目。
[0050] 在测量仪器中，能够测量血球计数的设备(血球计数器)和能够测量电解质的设备 (电解质测量设备)可独立地存在，这些设备的组合可构成系统。或者，测量仪器可以是能够 测量血球计数和电解质二者的单个测量设备。
[0051] 在要测量血液样品中的血球计数和电解质的情况下，这些项目可被同时测量，或 者可被依次测量。
[0052] 除了血球计数和电解质之外，本实施方式的血液检测设备可被配置为测量之后描 述的生化检测项目。例如，在测量仪器中，能够测量血球计数的设备(血球计数器）、能够测 量电解质的设备（电解质测量设备）和能够测量C-反应蛋白（CRP)的设备(CRP测量设备）可 独立地存在，这些设备的组合可构成系统。或者，测量仪器可以是能够测量血球计数、电解 质和CRP的单个测量设备。
[0053][血液检测方法]
[0054] 本发明的血液检测方法的一个实施方式包括:提供含有抗凝剂的血液样品的提供 步骤，所述抗凝剂含有不是乙二胺四乙酸(EDTA)的钠盐、钾盐或钙盐的EDTA盐;和测量血液 样品中的血球计数和电解质的测量步骤。
[0055] 也可以使用上述的血液检测设备来进行本实施方式的血液检测方法。
[0056] 通过本实施方式的血液检测方法，可使用单个血液收集管来测量血球计数和电解 质。因此，相对于使用多个含不同抗凝剂的血液收集管测量血球计数和电解质的情况，可降 低血液收集劳动和检验花费。此外，可减轻被收集血液的患者的负担。
[0057]本发明的血液检测设备和血液检测方法的一个实施方式使用含有不是乙二胺四 乙酸(EDTA)的钠盐、钾盐或钙盐的EDTA盐的抗凝剂。
[0058] EDTA通过螯合钙离子而形成可溶性络合物从而抑制血液凝结。因为EDTA盐容易溶 解在溶剂例如水中，所以血液检测方法中要使用的抗凝剂可以是这样的溶液，其中EDTA盐 溶解在溶剂例如水中。血液检测方法中要使用的抗凝剂也可以是通过如下得到的固体:将 Η)ΤΑ盐溶解在溶剂例如水中以制备溶液，然后干燥制得的溶液。
[0059] 抗凝剂中所含的EDTA盐不受限制，只要EDTA盐是不同于EDTA的钠盐、钾盐或钙盐 的EDTA盐即可。例如，EDTA盐优选地是至少一种选自以下的盐:EDTA的锂盐、钡盐、钴盐、镍 盐和铵盐。特别地，抗凝剂中所含的Η)ΤΑ盐优选地是EDTA的锂盐。
[0060]抗凝剂中所含的EDTA盐优选地是通过将EDTA与金属氢氧化物（不包括氢氧化钠、 氢氧化钾或氢氧化钙)混合而得到的金属盐。EDTA盐更优选地是通过将EDTA与至少一种选 自氢氧化锂、氢氧化钡、氢氧化钴和氢氧化镍的金属氢氧化物(更优选地，氢氧化锂)混合而 得到的金属盐。
[0061 ]抗凝剂中所含的EDTA盐优选地是通过将EDTA与金属氢氧化物（不包括氢氧化钠、 氢氧化钾或氢氧化钙）以1: 〇. 1-1: 〇. 6的EDTA:金属氢氧化物的质量比混合得到的。EDTA:金 属氢氧化物的质量比更优选地为1:〇. 2-1:0.6，仍然更优选地1:0.3-1:0.5。
[0062]在本发明的血液检测方法的一个实施方式中，提供含抗凝剂的血液样品，且所提 供的抗凝剂被用来测量血球计数和电解质。
[0063]在将被用于测量血球计数和电解质的血液样品中，EDTA盐的浓度优选地为0.5mg/ mL_3 · Omg/mL，更优选地0 · 75mg/mL_l · 5mg/mL，仍然更优选地0 · 75mg/mL_l · 25mg/mL。
[0064]在EDTA盐的浓度不低于0.5mg/mL的情况下，可有利地抑制血液凝结。在EDTA盐的 浓度不高于3. Omg/mL的情况下，可有利地抑制溶血。
[0065] 在EDTA盐的浓度不低于0.75mg/mL的情况下，可更有利地抑制血液凝结。在EDTA盐 的浓度不高于1.5mg/mL(优选地不高于1.25mg/mL)的情况下，可更有利地抑制溶血，且可减 少EDTA盐对电解质（例如，Na、K和Cl)测量的影响，使得能够更准确地测量。特别地，在EDTA 盐是锂盐的情况下，可更有利地减少Η)ΤΑ盐对电解质（例如，Na、K和Cl)测量的影响。
[0066] 从防止凝结的角度，国际血液学标准化委员会（International Committee for Standardization in Hematology(ICSH))推荐每ImL血液样品包含I · 5mg_2 · 2mgEDTA盐（这 对应于1.5mg/mL-2.2mg/mL的EDTA盐浓度）。JP-A No. 2008-510578的第[0018]段也描述:对 应于每ImL血液约1.5mg EDTA的EDTA浓度有效防止凝结。
[0067] 在本发明的一个实施方式中，EDTA盐(优选EDTA的锂盐）的浓度可以为0.75mg/mL- 1.5mg/mL，在这种情况下，可使用相对于惯常情况更小量的EDTA来抑制血液凝结。此外，可 减少EDTA盐对电解质（例如，Na、K和Cl)测量的影响，使得能够更准确地测量。
[0068]将通过本发明的血液检测设备和血液检测方法的一个实施方式测量的血球计数 提供关于血液的细胞组分的信息。例如，通过测量血球计数测量白血细胞(WBC )、红血细胞 (RBC)、红细胞比容(hematocrit value，HCT)、血红蛋白水平(HGB)、血小板(PLT)、平均血细 胞体积(mean corpuscular volume，MCV)、平均血细胞血红蛋白（MCH)、平均血细胞血红蛋 白浓度(MCHC)、红细胞分布宽度(RDW)、血小板分布宽度(PDW)、平均血小板体积(MPV)、中性 白细胞计数(NEUT)、淋巴细胞计数(LYMPH)、单核细胞计数(MONO)、嗜酸性粒细胞计数(EO)、 嗜碱性粒细胞计数(BASO)、网织红细胞计数(RET)和网织红细胞比率(RET % )。
[0069] 通过测量血球计数，优选地测量白血细胞(WBC )、红血细胞(RBC)或血小板(PLT)中 的至少一种。更优选地，测量白血细胞(WBC)、红血细胞(RBC)和血小板(PLT)。
[0070] 除了上述血球计数之外，可通过本发明的血液检测设备和血液检测方法的一个实 施方式测量的项目的实例包括电解质，例如钠(Na)、钾(K)和氯(Cl)。
[0071] 可通过本发明的血液检测设备和血液检测方法的一个实施方式测量(检测）除血 球计数和电解质外的生化检测项目。例如，除了血球计数和电解质之外，所谓的血液组分可 通过生化方法来定性或定量检测。生化方法的实例包括氮含量检测、金属检测、血浆蛋白相 关检测、胶体反应(colloid reaction)、生物色素检测、酶相关检测、脂质检测和糖代谢检 测。
[0072] 在本发明的血液检测设备和血液检测方法的一个实施方式中，可额外测量血液样 品中选自以下的至少一个项目：例如，C-反应蛋白（CRP)、血清淀粉样蛋白A(SAA)、肿瘤坏死 因子(TNF)、白细胞介素-l(IL-l)、al-抗胰蛋白酶、α?-抗胰凝乳蛋白酶、α?-酸性糖蛋白、触 珠蛋白、血浆铜蓝蛋白、肌钙蛋白I、CK-MB、肌红蛋白和心脏型脂肪酸结合蛋白（H-FABP)。
[0073] 在本发明的血液检测设备和血液检测方法的一个实施方式中，除了血液样品中的 血球计数和电解质之外，优选地测量血液样品中的C-反应蛋白（CRP)。通过这种测量，可使 用一种抗凝剂或单个血液收集管来测量血液样品中的血球计数、CRP和电解质的全部。
[0074] 检测中可测量的其它项目的实例包括一般生化检测项目，例如肌酸磷酸激酶 (CPK)、血尿素氮(BUN)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(ALP)、G0T(谷草转氨酶）、GPT(谷丙 转氨酶）、甘油三酯(TG)、尿素(UA)、总胆固醇(TCHO)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、总蛋白 (TP)、白蛋白（ALB)、淀粉酶(AMYL)、γ -谷氨酰胺转肽酶(GGT)、肌酸酐（CREA)和总胆红素 (TBIL)。这些项目中的一种或更多种可被测量。
[0075] 实施例
[0076] 以下通过实施例来描述本发明的一个实施方式。但本发明不限于实施例。
[0077]〈实验1-抗凝性质的观察〉
[0078]如下观察本发明的血液检测方法的一个实施方式中将使用的抗凝剂的抗凝性质。 [0079][制备水性溶液1-3]
[0080]如下制备3种含EDTA-4H(由Dojindo Laboratories制造）和LiOH(由Wako Pure Chemi caI Industr i es，Ltd ·制造）的水性溶液(抗凝剂）。
[0081 ]〈水性溶液1>将30mg EDTA-4H和11.9mg LiOH溶解在ImL蒸馏水中以制备水性溶液 1〇
[0082] 〈水性溶液2>将20mg EDTA-4H和7.9mg LiOH溶解在ImL蒸馏水中以制备水性溶液 2〇
[0083] 〈水性溶液3>将IOmg EDTA-4H和4.Omg LiOH溶解在ImL蒸馏水中以制备水性溶液 3〇
[0084] [样品]
[0085] 使用从受试者收集的全血作为样本(样品）。
[0086]样本数为43,样本包括31个来自男性(男）的样本和12个来自女性(女)的样本。 [0087][实验方法]
[0088]在塑料容器中，放置50yL每种如此制备的水性溶液1-3,然后干燥。随后，向每个塑 料容器中加入ImL全血以提供全血中的EDTA浓度（Conc)分别为1.5mg/mL、1.0mg/mL和 0.51^/1^的样品。向每个容器中加入全血之后，使每种样品在室温下静止1.5、3.0或4.5小 时(90、180或270分钟），随后观察是否发生凝结和溶血。更具体地，在第1.5、3.0和4.5小时 时，视觉观察凝结状态。此外，在第1.5、3.0和4.5小时时，离心样本，并在离心后视觉观察溶 血状态。
[0089] 结果显示于表1中。
[0090][表1]
[0092] 如表1中所不，在全血中的EDTA浓度为0.5mg/mL或1.5mg/mL的情况下，大多数样本 不显示凝结或不显示溶血。在全血中的EDTA浓度为1.0mg/mL的情况下，没有样本显示出凝 结或溶血。
[0093]〈实验2-对Na、K和Cl的测量值的影响〉
[0094]研究本发明的血液检测方法的一个实施方式中将使用的抗凝剂对Na、K和Cl的测 量值的影响。
[0095] [制备水性溶液4-11]
[0096] 如下制备2种含EDTA-4H(由Dojindo Laboratories制造）和LiOH(由Wako Pure Chemi caI Industr i es，Ltd ·制造）的水性溶液(抗凝剂）。
[0097] 〈水性溶液4-7>将60mg EDTA-4H和23.7mg LiOH溶解在ImL蒸馏水中以制备水性溶 液4。以2/3、1/2或1/3的比例稀释水性溶液4以制备水性溶液。从而提供了 4种具有不同浓度 的水性溶液4-7。
[0098]〈水性溶液8-11>将48mg EDTA-2NH4溶解在ImL蒸馏水中以制备水性溶液8。以2/3、 1/2或1/3的比例稀释水性溶液8以制备水性溶液。从而提供了 4种具有不同浓度的水性溶液 8-11〇
[0099] [样本]
[0100] 使用商购可得的对照血清作为样本。
[0101] 向0.57mL商购可得的对照血清中加入0.03mL每种水性溶液4-11以制备测量样品。 此外，向商购可得的对照血清中加入蒸馏水以制备比照性测量样品。
[0102] [实验方法]
[0103] 使用如此制备的测量样品，Na、K和Cl每种的浓度被测量5次，并进行显著性检测 (显著性水平，5%;显著性被设定为t>2.2622)。将测量值与利用比照性测量样品（其中加入 蒸馏水)获得的值进行比较。
[0104] 结果显示于表2-4中。表2对应于Na的浓度;表3对应于K的浓度;表4对应于Cl的浓 度。
[0105] [表 2]
[0113] 从表2-4,可以推知:Na、K和Cl的测量值受水性溶液7的使用的影响最小，水性溶液 7含有LiOH和 1.0mg/mL EDTA-4H。
[0114] 〈实验3-测量血球计数、CRP和电解质〉
[0115] 通过本发明的血液检测方法的一个实施方式来测量血液样品（全血）中的血球计 数（白血细胞计数、红血细胞计数和血小板计数）、CRP和电解质。
[0116] [提供血液收集管1-3]
[0117] 如下提供血液收集管1-3,其包含EDTA-4H(由Dojindo Laboratories制造)和LiOH (由Wako Pure Chemical Industries ,Ltd.制造）。
[0118] 〈血液收集管1>将300mg EDTA-4H和118.5mg LiOH溶解在蒸馏水中以制备5mL水性 溶液。在血液收集管中放入10.4yL制备的水性溶液，然后干燥。
[0119] 〈血液收集管2>将300mg EDTA-4H和118.5mg LiOH溶解在蒸馏水中以制备5mL水性 溶液。在血液收集管中放入8.3yL制备的水性溶液，然后干燥。
[0120] 〈血液收集管3>将300mg EDTA-4H和118.5mg LiOH溶解在蒸馏水中以制备5mL水性 溶液。在血液收集管中放入6.3yL制备的水性溶液，然后干燥。
[0121] [实验方法]
[0122] 向每种上述血液收集管1 -3中加入0.5mL全血(作为样本）以提供全血中的EDTA浓 度分别为1.25mg/mL、1.0 mg/mL和0.75mg/mL的样品。然后，使用加入全血的血液收集管1-3 测量血球计数、CRP和电解质。使用由Arkray，Inc .制造的SB-1420和由Arkray制造的D-Concept D-Ol和D-02来测量血球计数、CRP和电解质。
[0123] [用于比照的样品]
[0124] 为了比较，提供含EDTA-2K (产品名，NIHON)的血液收集管4和含肝素 Li的血液收集 管5(通过将300mg肝素 Li溶解在蒸馏水中以制备5mL水性溶液，在血液收集管中放入8.3yL 制备的水性溶液，然后干燥溶液来制备）。通过血液收集管4来测量血球计数，使用血液收集 管5来测量CRP和电解质。
[0125] (血球计数）
[0126] 图1-3显示了血球计数（白血细胞计数、红血细胞计数和血小板计数）的测量结果。 在每个图1-3中，（a)-(c)显示了血液收集管l-3(EDTA-4H+Li0H)和血液收集管4(EDTA-2K) 之间的血球计数结果的比较，（d)显示了血液收集管5(肝素 Li)和血液收集管4(EDTA-2K)之 间的血球计数结果的比较。
[0127] 图1显示了白血细胞(WBC)计数的测量结果的比较；图2显示了红血细胞(RBC)计数 的测量结果的比较;图3显示了血小板(PLT)计数的测量结果的比较。
[0128] 如图l(a)_(c)中所示，其中每个血液收集管1-3中的白血细胞(WBC)计数沿着纵坐 标，血液收集管4中的白血细胞(WBC)计数沿着横坐标，回归方程的斜率为约1(满足0.9-1.1 的范围），且相关系数(R 2)不小于0.9。
[0129] 如图2(a)_(c)中所示，其中每个血液收集管1-3中的红血细胞(RBC)计数沿着纵坐 标，血液收集管4中的红血细胞(RBC)计数沿着横坐标，回归方程的斜率在0.9-1.0的范围 内，且相关系数(R 2)不小于0.9。
[0130] 如图3(a)_(c)中所示，其中每个血液收集管1-3中的血小板(PLT)计数沿着纵坐 标，血液收集管4中的血小板(PLT)计数沿着横坐标，回归方程的斜率在0.9-1.0的范围内， 且相关系数(R 2)不小于0.9。
[0131] 因此，通过使用含EDTA-4H+LiOH的血液收集管，能够保证血球计数（白血细胞计 数、红血细胞计数和血小板计数)测量的表现。
[0132] 如图1-3中所示，通过使用含EDTA-4H+LiOH的血液收集管，能够比所使用含肝素 Li 的血液收集管的情况更准确地测量血球计数（白血细胞计数、红血细胞计数和血小板计数） (图 l(d)-3(d))。
[0133] (CRP)
[0134] 图4显示了CRP(C_反应蛋白）的测量结果。图4(a)_(c)显示了血液收集管1-3 (EDTA-4H+LiOH)和血液收集管5(肝素 Li)之间的CRP测量结果的比较，图4(d)显示了血液收 集管4 (EDTA-2K)和血液收集管5 (肝素 Li)之间的CRP测量结果的比较。
[0135] 如图4(a)_(c)中所示，其中每个血液收集管1-3中的CRP测量值沿着纵坐标，血液 收集管5中的CRP测量值沿着横坐标，回归方程的斜率为0.9-1.0，相关系数(R 2)不小于0.9。
[0136] 因此，通过使用含EDTA-4H+LiOH的血液收集管，能够保证CRP测量的表现。
[0137] (电解质）
[0138] 图5-7显示了电解质(Na、K和Cl)的测量结果。在每个图5-7中，（a)-(c)显示了血液 收集管l-3(EDTA-4H+Li0H)和血液收集管5(肝素 Li)之间的电解质测量结果的比较，（d)显 示了血液收集管4(EDTA-2K)和血液收集管5(肝素 Li)之间的电解质测量结果的比较。
[0139] 如图6(d)中所示，其中使用血液收集管4(EDTA-2K)，不能测量钾(K)(归因于超过 范围）。
[0140] 在图7中，使用血液收集管5(肝素 Li)得到的氯(Cl)的测量值被提供为对照，基于 与对照的差异(偏差％ )进行判断。
[0141] 如图5(a)_(c)中所示，其中每个血液收集管1-3中的钠(Na)的测量浓度沿着纵坐 标，血液收集管5中的钠(Na)的测量浓度沿着横坐标，回归方程的斜率不小于0.8，相关系数 (R2)不小于0.9。
[0142] 另一方面，如图5(d)中所示，其中血液收集管4中的钠(Na)的测量浓度沿着纵坐 标，血液收集管5中的钠(Na)的测量浓度沿着横坐标，回归方程的斜率为约0.58,相关系数 (R 2)小于 0.9。
[0143] 因此，如图5中所示，通过使用含EDTA-4H+LiOH的血液收集管，能够比使用含EDTA-2K的血液收集管的情况更准确地测量钠(Na)浓度（图5(d))。
[0144] 如图6中所示，在使用含EDTA-2K的血液收集管的情况下，不能测量钾(K)浓度（图6 (d))。但在使用含EDTA-4H+LiOH的血液收集管的情况下，能够测量钾(K)浓度。
[0145] 如图7中所示，使用含EDTA-4H+LiOH的血液收集管的情况和使用含肝素 Li的血液 收集管的情况之间的数值差异大部分在-10至+10%的范围内。然而，使用含EDTA-2K的血液 收集管的情况（图7(d))和使用含肝素 Li的血液收集管的情况之间的数值差异大且某些数 据超过了+15%。
[0146] 因此，如图7中所示，通过使用含EDTA-4H+LiOH的血液收集管，能够比使用含EDTA-2K的血液收集管的情况更准确地测量氯(Cl)浓度(图7(d))。
[0147] 因此，通过本发明的血液检测方法的一个实施方式，能够测量血液样品（全血）中 的血球计数和电解质，还能够测量血液样品中的CRP。因此，通过所述血液检测方法，能够在 单个血液收集管中测量血球计数（白血细胞计数、红血细胞计数和血小板计数）、CRP和电解 质，从而能够减少血液收集管的数目。因此，能够降低血液收集的劳动和花费，并能够减轻 患者的负担。
【主权项】
1. 一种血液检测设备，所述血液检测设备包含： 样品放置区，其中放置含有抗凝剂的血液样品，所述抗凝剂含有不是乙二胺四乙酸 (EDTA)的钠盐、钾盐或钙盐的EDTA盐;和 测量区，通过其进行放置在所述样品放置区的血液样品的血球计数和电解质的测量。2. 根据权利要求1所述的血液检测设备，其中所述测量区包含被配置为测量所述血液 样品中的血球计数的血球计数器，以及被配置为测量所述血液样品中的电解质的电解质测 量仪器。3. 根据权利要求1或权利要求2所述的血液检测设备，其中所述测量区测量所述血液样 品中的血球计数和电解质，并且测量所述血液样品中选自以下的至少一个项目：C-反应蛋 白（CRP)、血清淀粉样蛋白A(SAA)、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-l(IL-l)、al-抗胰蛋白 酶、α?-抗胰凝乳蛋白酶、α?-酸性糖蛋白、触珠蛋白、血浆铜蓝蛋白、肌钙蛋白I、CK_MB、肌红 蛋白和心脏型脂肪酸结合蛋白（H-FABP)。4. 根据权利要求1 -权利要求3中任一项所述的血液检测设备，其中所述测量区测量所 述血液样品中的血球计数和电解质，并且此外，还测量所述血液样品中的C-反应蛋白 (CRP)〇5. -种血液检测方法，其包括： 提供含有抗凝剂的血液样品，所述抗凝剂含有不是乙二胺四乙酸(EDTA)的钠盐、钾盐 或钙盐的Η)ΤΑ盐；和 测量所述血液样品中的血球计数和电解质。6. 根据权利要求5所述的血液检测方法，其还包括:测量所述血液样品中选自以下的至 少一个项目：C-反应蛋白（CRP)、血清淀粉样蛋白A(SAA)、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-l(IL-l)、al-抗胰蛋白酶、α?-抗胰凝乳蛋白酶、α?-酸性糖蛋白、触珠蛋白、血浆铜蓝蛋白、 肌钙蛋白I、CK-MB、肌红蛋白和心脏型脂肪酸结合蛋白（H-FABP)。7. 根据权利要求5或权利要求6所述的血液检测方法，其中测量所述血液样品中的C-反 应蛋白（CRP)。8. 根据权利要求5-权利要求7中任一项所述的血液检测方法，其中所述EDTA盐是至少 一种选自以下的盐:EDTA的锂盐、钡盐、钴盐、镍盐和铵盐。9. 根据权利要求5-权利要求8中任一项所述的血液检测方法，其中所述EDTA盐是EDTA 的锂盐。10. 根据权利要求5-权利要求9中任一项所述的血液检测方法，其中所述EDTA盐是通过 将E：DTA与金属氢氧化物(不包括氢氧化钠、氢氧化钾或氢氧化|丐）以1:0.1-1:0.6的EDTA:金 属氢氧化物的质量比混合而得到的。11. 根据权利要求5-权利要求10中任一项所述的血液检测方法，其中血液样品中的 EDTA 盐浓度为 0.5mg/mL_3. Omg/mL。12. 根据权利要求5-权利要求11中任一项所述的血液检测方法，其中血液样品中的 EDTA盐浓度为0.75mg/mL_l. 5mg/mL。
【文档编号】G01N33/48GK105938142SQ201610121252
【公开日】2016年9月14日
【申请日】2016年3月3日
【发明人】中村勤
【申请人】爱科来株式会社