超高效液相色谱测定绿原酸含量的方法
【专利摘要】本发明提供了一种测定银马解毒颗粒中绿原酸含量的方法，旨在提供一种测定准确、操作简单的超高效液相色谱测定绿原酸含量的方法；该方法是：1)样品2g置于20ml棕色容量瓶中，加体积比1：1的甲醇和乙腈混合液15ml超声处理10分钟使溶解，取出，蒸干，加乙腈至刻度,再精密量取续滤液2置10ml棕色容量瓶,加水至刻度，摇匀，吸取2ml样品液加入离心管进行净化，溶液过滤膜后注入超高效液相仪测定；属于化学检测技术领域。
【专利说明】
超高效液相色谱测定绿原酸含量的方法
技术领域
[0001] 本发明提供一种测定银马解毒颗粒中绿原酸和绿原酸含量的方法，具体地说，是 一种液相测定银马解毒颗粒中绿原酸和绿原酸含量的方法;属于化学检测技术领域。
【背景技术】
[0002] 银马解毒颗粒是由金银花、马齿宽、车前草、大黄、甘草等组成的纯中药制剂。具有 清热解毒，止咳桂疲的功效，用于热邪犯肺所致的肺热咳嗽等证，现代医学的急性支气管炎 或慢性支气管炎急性发作期出现上述症候者亦适用。该药用于临床已多年，疗效较好。
【发明内容】
[0003] 针对上述不足，本发明的目的是提供一种测定准确、操作简单的超高效液相色谱 测定绿原酸含量的方法。
[0004] 为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案如下：
[0005] -种超高效液相色谱测定绿原酸含量的方法，该方法依次包括下述步骤:取样品 2g置于20ml栋色容量瓶中，加体积比1:1的甲醇和乙腊混合液15ml超声处理10分钟使溶解， 取出，蒸干，加乙腊至刻度，再精密量取续滤液2置IOml栋色容量瓶，加水至刻度，摇匀，吸取 2ml样品液加入离屯、管进行净化，溶液过滤膜后注入超高效液相仪测定；
[0006] 所述的色谱条件如下：
[0007] 所述的色谱柱为ACQinTYlMXB邸C18 2. ImmX 50mm，1.7皿;色谱柱的柱溫:40°C， 流动相A:0.1%甲酸溶液；流动相B:甲醇，采用梯度洗脱，流速为0.3mL/min;检测波长： 297nm;分析时间：7min。
[000引进一步的，上述的高效液相色谱测定绿原酸含量的方法，所述的洗脱梯度为：0- lmin，99%A、l%B;l-1.5min，90%A、10%B;1.5-5min，60%A、40%B;5-7min，10%A、90%B; 7.0-7.lmin，l%A、99%B。
[0009] 进一步的，上述的高效液相色谱测定绿原酸含量的方法，所述的滤膜为0.22微米。
[0010] 与现有技术相比，本发明提供的技术方案萃取方法操作简单，检测结果准确，精度 重复性好，检测灵敏度高，有利于产品质量的控制。
【具体实施方式】
[0011] 下面结合【具体实施方式】，对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对 本发明的任何限制，任何在本发明权利要求保护范围所做的有限次的修改，仍在本发明的 权利要求保护范围之内。
[0012] 本发明所设及的到百分含量浓度，除特殊说明外，溶质为液体的均为体积浓度，溶 质为固体的均为质量浓度。
[001引实施例1
[0014] -种超高效液相色谱测定绿原酸含量的方法，该方法依次包括下述步骤:取样品 2g置于20ml栋色容量瓶中，加体积比1:1的甲醇和乙腊混合液15ml超声处理10分钟使溶解， 取出，蒸干，加乙腊至刻度，再精密量取续滤液2置IOml栋色容量瓶，加水至刻度，摇匀，吸取 2ml样品液加入离屯、管进行净化，溶液过0.22微米滤膜后注入超高效液相仪测定；
[0015] 所述的色谱条件如下：
[0016] 所述的色谱柱为ACQinTYlMXB邸C18 2.1mmX50mm，1.7皿;色谱柱的柱溫:40°C， 流动相A:0.1%甲酸溶液;流动相B:甲醇，采用梯度洗脱，所述的洗脱梯度为:0-lmin，99% A、l%B;l-1.5min，90%A、10%B;1.5-5min，60%A、40%B;5-7min，10%A、90%B;7.0- 7. Imin，I % A、99 % B;流速为0.3mL/min;检测波长:297nm;分析时间：7min;进样量为IOiil
[0017] 为了验证本法明提供的技术方案，取缺金银花样品，按供试品溶液制备方法制备 缺金银花的阴性对照溶液，在同样的色谱条件下进行检测，发现阴性对照试验无干扰。
[0018] 精密称取绿原酸16.64mg置100mL容量瓶中，加加体积比1:1的甲醇和乙腊混合液 至刻度，摇匀，即得对照品溶液。
[0019] 绿原酸浓度为166.4μg/ml、甘草酸锭浓度为50.5iig/ml的对照品溶液按拟订的色 谱条件分别进样分别吸取上述对照品溶液化1、扣l、l〇yl、2化1、30山，注入色谱仪，测定，W 峰面积积分值为纵坐标(Y)，对照品进样量(ng)为横坐标(X)绘制标准曲线，得绿原酸的回 归方程为:Y = 2665. lX+185.6(r = 0.9996);甘草酸锭的回归方程为:Y = 626.1X+0.6(r = 0.9999)。
[0020] 结果表明：绿原酸在499.2~4992ng范围内，进样量与峰面积积分值呈良好的线性 关系。
[0021 ]按照上述方法对5批样品中的绿原酸含量进行了检测，其结果如下表所示：
[0022]样品测定结果(n = 3) 「nrm1
'[0024]从上表中可W看出本发明提供的技术方案检测结果重复性好，为银马解毒颗粒中 绿原酸含量的提供新的方法。
【主权项】
1. 一种超高效液相色谱测定绿原酸含量的方法，其特征在于，该方法依次包括下述步 骤:取样品2g置于20ml棕色容量瓶中，加体积比1:1的甲醇和乙腈混合液15ml超声处理10分 钟使溶解，取出，蒸干，加乙腈至刻度，再精密量取续滤液2置IOml棕色容量瓶，加水至刻度， 摇匀，吸取2ml样品液加入离心管进行净化，溶液过滤膜后注入超高效液相仪测定； 所述的色谱条件如下： 所述的色谱柱为ACQUITYUPLCBEHC182. ImmX 50mm，1.7μπι;色谱柱的柱温:40°C，流动相 A: 0.1 %甲酸溶液;流动相B:甲醇，采用梯度洗脱，流速为0.3mL/min;检测波长:297nm;分析 时间：7min。2. 根据权利要求1所述的高效液相色谱测定绿原酸含量的方法，其特征在于，所述的洗 脱梯度为：O-Imin，99%A、1%B; 1-1.5min，90%A、10%B;1.5-5min，60%A、40%B;5-7min， 10%A、90%B;7.0-7.1min，l%A、99%B。3. 根据权利要求1所述的高效液相色谱测定绿原酸含量的方法，其特征在于，所述的滤 膜为0.22微米。
【文档编号】G01N30/02GK105954392SQ201610259512
【公开日】2016年9月21日
【申请日】2016年4月25日
【发明人】陈学松, 孙良广, 林冬杰, 廖强, 欧妮
【申请人】广西壮族自治区梧州食品药品检验所