11-脱氢-血栓素b2测定试剂盒及其用图
【专利摘要】本发明公开了一种11?脱氢?血栓素B2测定试剂盒：其特征在于，所述试剂盒包括：试剂R1，其包含0.01％?2％的以w/v计的11dhTxB2抗体和缓冲液；试剂R2，其包含0.1％?2％的以w/v计的包被了11dhTxB2蛋白的纳米胶乳微粒的缓冲液；校准品，其为11dhTxB2蛋白和缓冲液；以及质控品，其为溶于人工尿液中的11dhTxB2蛋白。本发明的11?脱氢?血栓素B2测定试剂盒提高了检测尿液中11?脱氢?血栓素B2含量的灵敏度和线性范围，检测灵敏度可以达到775pg/ml，线性范围可以达到0?6300pg/ml。是一种灵敏度高、特异性好、准确性高、精密度好、稳定性好的11?脱氢?血栓素B2测定试剂盒。
【专利说明】
11 -脱氢-血栓素 B2测定试剂盒及其用途
技术领域
[0001 ]本发明涉及一种测定试剂盒，具体地涉及一种11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒，本 发明也涉及该试剂盒的用途。
【背景技术】
[0002] 由于阿司匹林的抗血小板聚集作用，高风险患者可以减少约25%的动脉血栓形成 性事件的发生率。但在接受阿司匹林治疗的有动脉血栓形成性事件的患者，在长期随访中， 有10%-25%出现病情的复发，这一现象被称为阿司匹林抵抗或者耐药。这个观点的出现使 得人们开始质疑阿司匹林的有效性，因为服用阿司匹林后，相当一部分患者的血小板功能 还是正常的。
[0003] 匈牙利学者Pusch等对2008年以前的有关阿司匹林抵抗发生率及其临床联系的相 关资料进行了系统回顾。他们发现，尽管目前"阿司匹林抵抗(AR)"还没有被广泛接受的标 准定义，但不同的实验室方法已经证明，阿司匹林抵抗与不良预后相关，但这些实验室方法 无法相互比较。因此，阿司匹林治疗期间，仍具有高血小板活性或血小板抑制率很低的患 者，应采用何种治疗才能有效，目前尚未确定。
[0004] 根据Gum等的研究发现，测定服用阿司匹林患者的血小板功能反应性与死亡、心肌 梗死及脑血管事件的预后具有良好的相关性。
[0005] 目前临床上对阿司匹林抵抗主要的检测方法是检测血小板(PLT)功能，需要使用 专用的血小板聚集仪。操作步骤如下:血小板聚集实验用光比浊法，以l〇〇〇rmp/min(离心半 径6mm)，离心10min，提取富含血小板的血衆(PRP);再以3000rmp/min(离心半径6mm)离心 20min，提取缺乏血小板的血浆（PPP)，PLT = 10~20 X 109/L。再以PPP做空白对照，用PPP调 整PRP至200-300 X 109/L，用血小板聚集检测仪光比浊法进行不同诱导剂的血小板聚集试 验，同时检测血常规和生化指标。
[0006] 众所周知，血小板离开人体后，聚集功能就已经启动，所以体外检测血小板功能需 要严格的控制程序，且易受干扰，实验的重复性很差。
[0007] 最近的研究显示，与无症状的患者相比，冠心病患者服用阿司匹林后尿液中 lldhTxB2水平显著升高。原因是阿司匹林可以在血小板环氧合酶-l(COX-l)上不可逆转的 添加乙酰基，这样可以抑制它的活性从而延长血小板的寿命。低剂量阿司匹林可抑制95% 的血小板C0X-1活性，从而抑制血栓素 A2 (TxA2)生成。血栓素 A2 (TxA2)经裂解，形成稳定的 1 ldhTxB2、1 ldh2和3DinorTxB2，经尿液排出。尿液中含有丰富的血栓素 A2(TxA2)的代谢物， 其中1 ldhTxB2是最稳定的代谢物之一，具有相对较长的循环时间，约为45分钟。
[0008] 目前用于检测lldhTxB2含量的方法有酶联免疫法，具体操作如下：标准物和样本 添加至包被了羊抗鼠 IgG抗体的孔内，再添加 lldhTxB2指示剂和lldhTxB2单克隆抗体，2小 时孵育后，清洗孔并添加底物，30分钟添加终止液，使用微板读数器读数。光密度与样本或 标准物内的1 ldhTxB2数量成反比。
[0009] 检测开始时向孔内放入标准物和样本，添加 lldhTxB2指示剂。指示剂是lldhTxB2 与碱性磷酸酶共辄物，然后添加鼠单克隆lldhTxB2抗体开始反应。在两小时孵育期间， lldhTxB2和lldhTxB2指示剂会竞争结合到鼠抗lldhTxB2抗体上，抗体被包被的羊抗鼠 IgG 抗体捕捉至孔上，清洗微量滴定板孔除去未结合的酶。接下来检测人员添加 p-硝基苯磷酸 (PNPP)底物，孵育30分钟，再添加0.1M的终止液乙二胺四乙酸(EDTA)结束颜色反应，然后此 板在标准微量滴定板读数器405nm下进行读数。
[0010]对于含有较高水平的lldhTxB2样本，会有较少的lldhTxB2指示剂结合至单克隆抗 体，结果产生较低的光密度(0D)。样本中的lldhTxB2较少时，会有较多的指示剂结合至抗 体，产生较高的0D读数。lldhTxB2的真正浓度是通过对比临床样本0D值和包装随带的定标 液建立的参考曲线获得的。该检测方法用时在4小时左右，且精密度低。
[0011]以上两种方法检测阿司匹林抵抗都需要耗费大量的人力、物力和时间，且成本高， 很难实现批量自动化检测。
【发明内容】
[0012] 因此，需要提供一种11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒，这样就可用生化分析仪实现 大批量自动化检测，大大缩短了检测时间。
[0013] 为此，本发明提供了一种一种11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒，所述试剂盒包括： [0014] 试剂R1，其包含0.01 % -2 %的以w/v计的1 ldhTxB2抗体和缓冲液；
[0015]试剂R2,其包含〇.1%-2%的以w/v计的包被了 lldhTxB2蛋白的纳米胶乳微粒的缓 冲液；
[0016]校准品，其为lldhTxB2蛋白和缓冲液；以及 [0017]质控品，其为溶于人工尿液中的1 ldhTxB2蛋白。
[0018] 本发明11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒的检测原理为通过lldhTxB2抗体与抗原结 合，生成具有特异性的大分子蛋白产物，使尿液样本中的1 ldhTxB2先与试剂R1中1 ldhTxB2 抗体反应，反应完成后，剩余的1 ldhTxB2抗体与试剂2中包被了 1 ldhTxB2的纳米胶乳微粒进 行特异性反应结合，其反应量的多少与尿液中UdhTxB2蛋白成反比。反应产生的浊度带入 11 -脱氢-血栓素 B2校准品测定的校准曲线，计算尿液样本中11 dhTxB2的含量。
[0019]本发明所述的11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒，其中，所述试剂R1和试剂R2还包含 10mmol-50mmol/L缓冲液、以w/v计的0.2 %_2 %稳定剂。进一步，所述试剂R1还包含以w/v计 的0.1 %-5%增乳剂。进一步，所述试剂R1、试剂R2和校准品还包含防腐剂。其中，所述的缓 冲液为三羟甲基氨基甲烷缓冲液、碳酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、甘氨酸缓 冲液和羟乙基哌嗪乙硫磺酸缓冲液其中的一种或多种;其PH在5.0-10.0之间；所述稳定剂 为：乙二胺四乙酸二钠、牛血清白蛋白、聚乙二醇4000和聚乙二醇6000中一种或多种;所述 增乳剂为：聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、聚乙二醇10000、吐温80、十六烷基 三甲基溴化铵、或IPTG中一种或多种;所述防腐剂为:叠氮钠、硫柳萊、苯酸和procline300 中一种或多种。
[0020]本发明所述的11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒，其中，所述lldhTxB2蛋白为重组 11 dhTxB2蛋白，所述11 dhTxB2抗体为单克隆抗体或多克隆抗体。
[0021]本发明所述的11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒，其中，所述包被了 lldhTxB2蛋白的 纳米胶乳微粒为30nm-400nm纳米胶乳微粒偶联物，进一步所述的纳米胶乳微粒为聚苯乙 烯、二乙烯基苯、丙烯酸酯、甲基丙烯酸甲酯和乙烯基甲苯中一种材质或多种材质且其化学 基团被修饰过的胶乳微粒，被修饰的化学基团与lldhTxB2蛋白的氨基缩合形成偶联物。 [0022]本发明所述的11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒，其中，所述校准品的各校准点浓度 在0-7000pg/ml之间优选地至少6个校准点。
[0023]本发明也提供了上述11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒在确定服用小剂量阿司匹林 患者对阿司匹林耐药性中用途。进一步地，该11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒与患者尿液中 测定的尿肌酐的量联合使用，以计算lldhTxB2的生产率。
[0024]本发明的11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒提高了检测尿液中11-脱氢-血栓素 B2含 量的灵敏度和线性范围，检测灵敏度可以达到775pg/ml，线性范围可以达到0-6300pg/ml。 是一种灵敏度高、特异性好、准确性高、精密度好、稳定性好的11-脱氢-血栓素 B2测定试剂 盒(免疫比浊法）。
[0025]本发明的11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒可以快速、准确的测定尿液中11-脱氢-血 栓素 B2含量，通过结合肌酐的量，如lldhTxB2结果（pg/mL)除以患者样本的肌酐结果(mg/ dL)，然后再乘以100,换算成lldhTxB2的生产率，即血栓素 A2(TxA2)的代谢率。
[0026] 血栓素 A2 (TxA2)的代谢率越高说明血液中血栓素 A2 (TxA2)含量越多，则血小板的 聚集功能越强，进而确定患者对阿司匹林是否抵抗。通过检测服用阿司匹林患者的尿液中 lldhTxB2的生产率，反映血小板的聚集功能的强弱，从而判断服用阿司匹林患者是否存在 阿司匹林抵抗。
[0027] 下面通过参考附图和【具体实施方式】对本发明进行详细说明。所述实施例仅仅是示 意目的，不意指对本发明的任何限制。所述的实验材料和试剂若无特别说明，均是可以通过 商购得到，所述实验方法若无特别说明，均为本领域常规的实验方法。
【附图说明】
[0028]图1是标准尿液样本线性实验。
[0029]图2是本发明试剂盒与对照酶联免疫法试剂盒的正常样本的相关性实验。
[0030]图3是本发明试剂盒与对照酶联免疫法试剂盒的异常样本的相关性实验。
[0031]图4是本发明试剂盒的测定的尿液中11-脱氢-血栓素 B2量与测定的尿肌酐的量联 合使用，计算的1 ldhTxB2生产率的标准检测结果。
【具体实施方式】
[0032] 11-脱氢-血栓素 B2单克隆和多克隆抗体，购自艾美捷科技有限公司（为美国 Cayman Chemical生产）。纳米胶乳微粒，购自西安凯新生物科技有限公司。人工尿液，购自 东莞科鸿化工有限公司。lldhTxB2蛋白是委托专业生产公司按《重组lldhTxB2蛋白技术要 求》用常规方法制备的重组lldhTxB2蛋白。
[0033]实施例1:11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒的制备 [0034] 1.试剂R1的制备：
[0035] 称取该lldhTxB2单克隆抗体0.015mg溶于100ml 10mmol/L Tris缓冲液中，使得其 溶解完全，经0.22μπι的滤膜过滤后，制成0.015 % (W/V)的试剂R1。
[0036] 2.试剂R2的制备：
[0037] 使用30nm的羟基化聚苯乙烯纳米胶乳微粒，在PH=6.0的MES缓冲液中加入EADC: Sulfo-NHS:纳米胶乳微粒，其质量比为1:0.5:0.1，超声2-3秒，混匀，经室温在旋转摇床上 活化2小时，17000rpm离心30分钟，用PH = 6.0的MES缓冲液洗涤3次，然后将微球悬于PH = 8.0HEPES缓冲液中，制成微粒悬液，测粒径及CV值。
[0038]在30nm的微粒悬液中，加入质量为纳米胶乳微粒1/3重的lldhTxB2蛋白，超声2-3 秒，立即混匀，使HEPES缓冲液的最终浓度为25mg/ml，室温旋转摇床孵育4小时。再分别加入 0.2 %的乙醇胺，0.1 %的牛血清白蛋白，0.1 %的叠氮钠，0.02 %甘氨酸的封闭液，室温旋转 摇床孵育1小时。在2_8°C的条件下17000rpm离心30分钟，弃上清液，沉淀物分别用终浓度的 HEPES缓冲液(PH = 8.0)，0.1 %的叠氮钠，0.02%甘氨酸的洗涤液重悬，再离心，如此洗涤3 次，制成30nm微粒交联的1 ldhTxB2蛋白偶联物。用20mmol/L的HEPES缓冲液(PH = 8 · 0)重悬 偶联物，使其终浓度为〇. 1 % (W/V)，制成试剂R2。
[0039] 3.校准品的制备方法：
[0040] 使用重组lldhTxB2蛋白分别溶于0.02mol/L的PBS缓冲液（PH = 7.4)中，制成 779pg/ml、1561pg/ml、2410pg/ml、3147pg/ml、6301pg/ml 的5个浓度，使用0.02mol/L的 PBS 缓冲液(PH=7.4)为0点空白校准。
[00411 4.质控品的制备方法：
[0042] 精密称取lldhTxB2蛋白，溶于含人工尿液的0.02mol/L PBS缓冲液(含1.8%尿素， 0 · 05 %尿酸，1 · 1 %的无机盐）中。使其终浓度分别约为791pg/ml、1588pg/ml和2385pg/ml的 低、中、高三个浓度的质控品。
[0043]实施例2:11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒的制备
[0044] 与实施例1不同之处在于制成2%(W/V)的试剂R1以及2%(W/V)的试剂R2,其中试 剂R2制备中使用了 400nm的羟基化丙烯酸酯纳米胶乳微粒。
[0045] 实施例3:11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒的制备
[0046] 与实施例1不同之处在于制成1%(W/V)的试剂R1以及1%(W/V)的试剂R2,其中试 剂R2制备中使用了 200nm的羟基化二乙烯基苯纳米胶乳微粒。
[0047]实施例4-6:11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒的制备
[0048] 实施例4与实施例1不同之处在于试剂R1和试剂R2分别地添加了0.2% (W/V)乙二 胺四乙酸二钠以及0.1 % (W/V)的叠氮钠;试剂R1添加了0.1 % (W/V)聚乙二醇2000;校准品 添加了0.1% (W/V)的苯酚。以及其中试剂R1中所使用抗体为11-脱氢-血栓素 B2多克隆抗 体。
[0049] 实施例5与实施例2不同之处在于试剂R1和试剂R2分别地添加了2% (W/V)牛血清 白蛋白以及〇. 1 % (W/V)的硫柳汞;试剂R1添加了5% (W/V)聚乙二醇6000、吐温80和IPTG混 合物;校准品添加了 〇 . 1 % (W/V)的proc 1 ine 300。以及其中试剂R1中所使用抗体为11 -脱 氢-血栓素 B2多克隆抗体。
[0050] 实施例6与实施例3不同之处在于试剂R1和试剂R2分别地添加了 1 % (W/V)聚乙二 醇4000以及0.1 % (W/V)的硫柳汞。试剂R1添加了 2 % (W/V)十六烷基三甲基溴化铵;校准品 添加了 0.1%(W/V)的叠氮钠。以及其中试剂R1中所使用抗体为11-脱氢-血栓素 B2多克隆抗 体。
[0051 ]实施例7:11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒的制备
[0052]另外对实施例1-6中的缓冲剂进行了替换，分别用pH5、pH7和pHIO三个PH值的下列 一种缓冲液:碳酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、甘氨酸缓冲液和羟乙基哌嗪乙 硫磺酸缓冲液，替换实施例1-6的相应缓冲液，进行试剂盒的制备。
[0053]实施例8:11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒(免疫比浊法)的性能 [0054] 试验分析方法:两点终点法。取实施例1的试剂R1:120μ1，加入24μ1质控品，于37°C 孵育5分钟后，加入实施例1的试剂R2:40μ1，37°C保温45秒读第一点，反应5分钟后，再次读 点，得到吸光度差值A A。
[0055] 分析仪器:迪瑞CS-1300型全自动分析仪。
[0056][基本参数]:
[0057]检测方法： 终点法
[0058] 主波长： 700nm
[0059] 反应温度： 37 Γ
[0060] 操作步骤： 单位:ul
[0061]
[0062][结果计算]
[0063]计算校准吸光度差值(A2-A1)，并建立校准液吸光度-浓度工作曲线。
[0064] 1.灵敏度试验
[0065]检测20次水，记录吸光度差值（Δ A水），计算平均值(X水)和标准偏差（SD水）；检测浓 度为791pg/ml的质控品20次，记录吸光度差值（ΔΑ#)，计算平均值(X#)和标准偏差(SD#)， 用如下公式计算灵敏度。
[0066] 灵敏度= 791X(X|^3XSD#)/%jc
[0067]
[0068]本发明试剂灵敏度= 791 X (0 · 189665+3 X 0 · 007505)/0 · 2163 = 775pg/ml。
[0069] 2.标准尿液样本线性实验
[0070]用高浓度 1 ldhTxB2蛋白标准液，制成浓度为0 · Opg/ml，393 · 81pg/ml，787 · 625pg/ ml，1575.25pg/ml，3150.5pg/ml和6301pg/ml的6个标准样本，每个浓度的样本用本发明实 施例1的阿司匹林测定试剂盒测定3次，取其平均值。对测定值进行相关分析，如图1所示，图 中X轴表示理论值(pg/ml)，Y轴表示实测值(pg/ml)，R 2 = 0.99963。
[0071] 3.精密度实验
[0072]用本发明实施例1所制备的试剂盒检测质控品lldhTxB2的高浓度、低浓度样本各 20次，计算批内精密度；用3个批次的试剂盒检测同一浓度lldhTxB2质控品20次，计算批间 精密度。实验结果如下表所示：
[0073]
[0074] 本发明试剂盒的批内精密度分别为:9.1 %，3.1 %。批间精密度为：11.3 %。说明本 发明具有良好的精密度。
[0075] 4.干扰试验：
[0076]取未服用阿司匹林的健康人标本，制成混合尿液。精密称取胆红素、抗坏血酸、肌 酐、葡萄糖、水杨酸，制成5组高浓度干扰物溶液。分别精密量取高浓度干扰物溶液与尿液混 合，制成不同干扰物浓度的尿液，将配制好的尿液样本用本发明实施例1所制得的测定试剂 盒分别进行测定，每个样本重复测定3次，取其平均值，以未加干扰物的样本测定均值为 100%，计算干扰度。
[0077]干扰度=加干扰物样本均值/未加干扰物样本均值X 100%
[0078]干扰度在90 % -110 %之间的示为可接受结果。
[0079]
[0081 ] 结果显示：当胆红素浓度小于30mg/dl、抗坏血酸浓度小于200mg/dl、肌酐浓度小 于1000mg/dl、葡萄糖浓度小于2000mg/dl、水杨酸浓度小于200mg/dl时，各干扰物对本发明 试剂盒测定影响无明显影响。
[0082] 本试剂盒使用方法:两点终点法。取试剂R1:120ul，加入24ul样本，于37°C孵育5分 钟后，加入试剂R2:40ul，37°C保温45秒读第一点，反应5分钟后，再次读点，得到吸光度差值 A A。所测得吸光度差值△ A代入由测得的标准品△知示所绘制的标准曲线方程，计算样本的 浓度值。（用标准品A A?所绘制的标准曲线方程，计算质控品AAiis，质控品浓度必须在规定 的范围内。）
[0083] 5.相关性实验
[0084] 分别使用本发明实施例1所制得的测定试剂盒和对照酶联免疫法试剂盒(市售某 公司同类产品）对50份正常样本(未使用阿司匹林药物人的尿液)和50份异常样本(使用阿 司匹林药物人的尿液)进行相关性实验和相关性分析。其中50份正常样本中男性23人，女性 27人，最小年龄21岁，最大年龄67岁，平均年龄43.12; 50分异常样本中男性26人，女性24人， 最小年龄44岁，最大年龄85岁，平均年龄65.74。试验结果如图2和图3所示，图中X轴为对照 试剂盒测定值，Y轴为本发明试剂盒测定值，其中正常样本中两试剂盒的相关系数R 2 = 0.98255,异常样本中两试剂盒的相关系数为R2 = 0.99535。结果表明，本发明试剂盒与对照 酶联免疫法试剂盒的检测数据图呈直线关系，两试剂盒具有显著的相关性。
[0085] 实施例9
[0086]阿司匹林抵抗的临界值实验
[0087] lldhTxB2检测试剂盒的临界值评估研究涉及到201份样本来自服用阿司匹林的个 体;204份样本来自未服用阿司匹林个体。其中包括166名服用ASA控制剂量前和/或后明显 健康的成人。测量了 11-脱氢-血栓素 B2的浓度，并将浓度除以肌酐浓度得到标准检测结果。 下图4所示为405份样本的频率分布图。根据这些频率，确定临界值是1500pg lldhTxB2/mg 尿肌酐。
[0088]另外，也如实施例8所述实验了本发明实施例2-7所制备的试剂盒，结果与实施例8 相似，在此不再赘述。
【主权项】
1. 一种11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒:其特征在于，所述试剂盒包括： 试剂R1，其包含〇. 〇 1 %-2 %的以w/v计的1 ldhTxB2抗体和缓冲液； 试剂R2，其包含0.1 % -2 %的以w/v计的包被了 1 ldhTxB2蛋白的纳米胶乳微粒的缓冲 液； 校准品，其为1 ldhTxB2蛋白和缓冲液；以及 质控品，其为溶于人工尿液中的1 ldhTxB2蛋白。2. 根据权利要求1所述的11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒，其特征在于，所述试剂R1和试 剂R2还包含1 Ommo l-50mmo 1/L缓冲液，以及以w/v计的0.2 % -2 %稳定剂。3. 根据权利要求1所述的11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒，其特征在于，所述试剂R1还包 含以w/v计的0.1%-5%增乳剂。4. 根据权利要求1所述的11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒，其特征在于，所述试剂R1、试 剂R2和校准品还包含防腐剂。5. 根据权利要求1所述的11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒，其特征在于，所述1 ldhTxB2蛋 白为重组lldhTxB2蛋白，所述lldhTxB2抗体为单克隆抗体或多克隆抗体。6. 根据权利要求1所述的11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒，其特征在于，所述的缓冲液为 三羟甲基氨基甲烷缓冲液、碳酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、甘氨酸缓冲液和 羟乙基哌嗪乙硫磺酸缓冲液其中的一种或多种;其PH在5.0-10.0之间。7. 根据权利要求2所述的11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒，其特征在于，所述稳定剂为： 乙二胺四乙酸二钠、牛血清白蛋白、聚乙二醇4000和聚乙二醇6000中一种或多种。8. 根据权利要求3所述的11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒，其特征在于，所述增乳剂为： 聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、聚乙二醇10000、吐温80、十六烷基三甲基溴 化铵、或IPTG中一种或多种。9. 根据权利要求4所述的11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒，其特征在于，所述防腐剂为： 叠氮钠、硫柳萊、苯酸和procline300中一种或多种。10. 根据权利要求1所述的11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒，其特征在于，所述包被了 lldhTxB2蛋白的纳米胶乳微粒为30nm-400nm纳米胶乳微粒偶联物。11. 根据权利要求1所述的11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒，其特征在于，所述校准品的 各校准点浓度在0-7000pg/ml之间，所述校准点为至少6个。12. 权利要求1至11中任一权利要求所述的11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒在确定服用 小剂量阿司匹林患者对阿司匹林耐药性中的用途。13. 根据权利要求12所述的用途，其特征在于:该11-脱氢-血栓素 B2测定试剂盒与患者 尿液中测定的尿肌酐的量联合使用，以计算lldhTxB2的生产率。
【文档编号】G01N33/539GK105974106SQ201610286284
【公开日】2016年9月28日
【申请日】2016年5月4日
【发明人】张立民, 王琳, 王元略, 李丰骥
【申请人】山东盛百灵医药科技有限公司