联合应用量子点与稀土荧光材料的试纸卡的制作方法
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及一种用于免疫检测的试纸卡，具体涉及一种联合应用量子点与稀土荧光材料的试纸卡。
【背景技术】
[0002]在临床诊断领域，目前常用的检测目的标志物的方法包括:酶联免疫法、化学发光法、胶乳增强免疫比浊法、胶体金免疫层析法、荧光免疫层析法等。酶联免疫法及化学发光法检测灵敏度高，可实现准确定量，但其耗时过长，而且无法进行单份样本的即时测定。胶乳增强免疫比浊法虽可实现高通量筛选，但由于方法学本身的限制，其检测灵敏度较低，无法对低值样品进行精确测定。胶体金免疫层析法操作简单，无需特殊的仪器设备，但只能实现半定量。在荧光免疫层析法中，传统应用的有机荧光化合物如异硫氰基荧光素、罗丹明类荧光染料等虽在水溶液中具有很高的灵敏度，但其标记抗体或抗原后用于复杂的血清、体液、细胞等生物样品免疫分析测定时，一旦样品中的待检物浓度在低浓度水平时，共存杂质的浓度将大大高于待检物浓度。此时，高浓度的共存杂质产生的背景荧光就会对免疫产物的荧光测定造成严重的干扰，进而显著降低荧光免疫测定的灵敏度，这极大地限制了其在临床诊断领域的应用。
[0003]相比较而言，量子点则具有传统的有机荧光染料所不具备的一些独特的光学性质。量子点尺寸介于几个nm至几十nm之间。量子点的发光原理在于，当量子点的尺寸小到一定值时，由于受到量子尺寸效应的影响，原来连续的能级结构变成类似原子的不连续结构。当光照射到量子点上时，量子点吸收光子，价带上的电子吸收能量后受到激发，跃迀至导带，而在价带上则会产生与被激发电子对应的空穴，跃迀到导带上的电子可以再以辐射跃迀的方式重新回到价带，与价带上的空穴复合并发射出光子。
[0004]量子点独特的光学性质主要体现在以下几个方面:1、通过改变量子点的尺寸和组成可以实现对量子点发射光谱的调控，从而得到多种不同发光颜色的量子点，并可以使量子点的荧光发射光谱覆盖整个可见光区；2、宽的激发光谱:同一个激发波长的光可以激发不同大小的量子点，不同尺寸的量子点发射出的荧光不同，有利于在同步检测中的应用；3、大的Stokes位移(可达几百nm)以及窄且对称的发射光谱，这一特性使在使用量子点时可以有效地避免光谱重叠；和4、量子点具有良好的光稳定性，其荧光可以保持很长时间而不会发生褪色。
[0005]基于量子点独特光学性质使得其适用于低浓度水平，如pg/ml-ng/ml待检物含量的准确测定，但是其检测的线性范围不够宽，在相同的一套检测体系范围内，无法实现高值样品的准确定量。因此，单独使用量子点时，无法兼顾到低端的检测灵敏度以及宽线性范围。而通过联合应用其他与量子点具有相似的激发波长和发射波长的荧光元素或者荧光材料，将有望获得更宽的线性范围，并且可以实现在同一套荧光检测系统中进行荧光信号结果的读取，也更有利于在临床的推广及应用。【实用新型内容】
[0006]抟术问题
[0007]基于目前缺少适用于临床样品快速、精确、定量检测的方法，特别是目前存在的无法兼顾低端检测灵敏度以及宽线性范围的问题，本实用新型提供了一种联合应用量子点与稀土荧光材料的试纸卡。
[0008]技术方案
[0009]一方面，本实用新型提供了一种联合应用量子点与稀土荧光材料的试纸卡，其特征在于，所述试纸卡包括:
[0010]i)试纸条，其中所述试纸条包括:
[0011]1-Ι)加样区，
[0012]1-2)同时包被有由量子点和稀土荧光材料分别单独标记的第一抗体以及由生物素标记的第二抗体的抗体结合区，
[0013]1-3)具有包被有相间隔的检测带和质控带的检测区，其中所述检测带固定有亲和素，所述质控带固定有抗鼠IgG的抗体，
[0014]1-4)吸水区，和
[0015]1-5)底板，其中所述加样区、抗体结合区、检测区和吸水区在所述底板上顺序排列并顺次搭接；以及
[0016]ii)包覆所述试纸条的外壳，其中所述外壳包括:
[0017]i1-Ι)设置有加样孔和检测孔的卡盖，其中所述加样孔开口于所述加样区的上侧，以暴露出所述加样区的部分区域，所述检测孔开口于所述检测区的上侧，以暴露出所述检测带和所述质控带的全部区域，和
[0018]i1-2)与所述卡盖彼此连接的底座。
[0019]在一个实施方式中，所述量子点为微球形式且具有2nm-30nm的粒径范围，且所述量子点选自以下组中:CdTe、CdSe, PbSe, InP和GaN。
[0020]在一个实施方式中，所述抗体结合区上进一步包被有微球，其中所述微球负载有所述稀土荧光材料和所述第一抗体。
[0021]在一个实施方式中，所述微球的粒径大小为50nm-400nm。
[0022]在一个实施方式中，所述微球的粒径大小为100nm-300nm。
[0023]在一个实施方式中，所述微球的粒径大小为10nm或300nm。
[0024]在一个实施方式中，所述第一抗体和第二抗体识别同种待测蛋白的不同表位，所述蛋白选自以下组中:心肌肌钙蛋白1、N末端脑钠肽前体、心型脂肪酸结合蛋白、降钙素原、C反应蛋白和D- 二聚体。
[0025]在一个实施方式中，所述检测带和所述质控带之间的间隔在0.1-0.6cm之间。
[0026]在一个实施方式中，所述试纸条的宽度在0.2 cm-1 cm之间。
[0027]在一个实施方式中，所述卡盖和所述底座由塑料制成。
[0028]有益效果
[0029]本实用新型的试纸卡的主要优点包括:联合应用量子点与稀土荧光材料，极好的克服了单独应用量子点或者稀土荧光材料存在的低值灵敏度和检测线性范围无法兼顾的问题；通过引入生物素亲和素级联放大系统，进一步提高了检测灵敏度；和试纸卡易于携带和保存，易于实现在相应的荧光检测仪中对试纸条检测结果的分析。
【附图说明】
[0030]图1本实用新型的试纸卡的俯视图。
[0031]图2本实用新型的试纸条的侧视图。
[0032]图3本实用新型的试纸条的俯视图。
[0033]附图标记:
[0034]I底座；2卡盖；3加样孔；4检测孔；5检测带暴露位置；6质控带暴露位置；7加样区；8抗体结合区；9检测区；10检测带；11质控带；12吸水区；和13底板。
【具体实施方式】
[0035]下文中将参照附图来更详细地描述示例性实施方式。所述附图用于图示说明本实用新型，而非对其进行限制。在附图中，为了清楚的说明，放大了试纸条部分区域的尺寸及其相对比例。
[0036]如图1所示，本实用新型的试纸卡包括底座I和卡盖2，卡盖2上设置有加样孔3和检测孔4，其中检测孔4对应有检测带暴露位置5和质控带暴露位置6。试纸条(未示出)被底座I和卡盖2彼此相互紧扣于试纸卡内部。底座I和卡盖2均可由诸如塑料等材料制成。加样孔3和检测孔4可以为正方形、长方形、椭圆形、圆形等形状。加样孔的长度可为0.1cm至0.5cm，宽度可为0.2cm至0.4cm。检测孔4的长度可为1.0cm至2.3cm，宽度可为0.2cm至0.4cm。本实用新型的试纸卡可通过自动生化仪实现快速大批量的临床样品检测。
[0037]图2为本实用新型的试纸卡中试剂条的侧视图。
[0038]如图2所示，本实用新型的试纸条包括加样区7、抗体结合区8、检测区9、吸水区12和底板13，其中所述加样区7、抗体结合区8、检测区9和吸水区12在底板13上顺序排列并顺次搭接。
[0039]加样区7用于接收样品，其可由选自玻璃纤维素膜或者聚酯膜、棉纤的材料制成，优选由玻璃纤维素膜制成。加样区7可以起到样品过滤的作用。例如，当待检测样品为血浆、血清时，加样区7可以过滤样品中的颗粒性不溶物。加样区7在试剂条的结构中与抗体结合区8搭接。加样区7与抗体结合区8搭接的方式并不受图1所示方式的限制。在一个实施方式中，加样区7搭接在抗体结合区8之上。在一个实施方式中，抗体结合区8搭接在加样区7之上。
[0040]抗体结合区8位于加样区7和检测区9之间，并与两者彼此搭接。抗体结合区8与加样区7和检测区9搭接的方式并不受图1所示方式的限制。抗体结合区8用于布置与待测样品中特定蛋白反应的抗体。在一个实施方式中，所述待测样品中的特定蛋白选自以下蛋白组成的组中:心肌肌钙蛋白1、心型脂肪酸结合蛋白、降钙素原、N末端脑钠肽前体、C反应蛋白和D-二聚体。在一个优选实施方式中，所述特定蛋白为心肌肌钙蛋白I。
[0041]在本实用新型的试剂条的一个实施方式中，抗体结合区8上同时包被有由量子点和稀土荧光材料分别单独标记的第一抗体和以及由生物素标记的第二抗体。在本实用新型