一种甲胎蛋白双向免疫电泳检测试剂盒的制作方法
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及医学检验领域，具体涉及一种甲胎蛋白双向免疫电泳检测试剂合
ΙΤΓΤ.0
【背景技术】
[0002]肝细胞癌是一种发病率不断上升的癌症，正常人体肝细胞不产生甲胎蛋白，但肝癌发生时，由于癌变肝细胞无限制增殖，就又恢复了合成甲胎蛋白的能力。获得更有效治疗的关键在于能够更早和更准确的诊断。
[0003]血清甲胎蛋白(AFP)的测定广泛应用于肝细胞癌的诊断。肝癌患者体内，AFP的水平呈现显著上升。甲胎蛋白是分子量为70KD的糖蛋白。正常情况下，在胎儿发育早期由肝脏和卵黄囊合成，小量由胎儿卵黄素细胞及胎儿胃肠道合成。AFP是最主要的胎儿血清蛋白，出生后在血清中的含量急速下降，第二年末降至最低值直至成年。临床上发现肝癌细胞和生殖系肿瘤细胞可以合成AFP，使血清AFP浓度升高，因此血清AFP含量是早期诊断这类肿瘤的重要指标。非恶性疾病的成人血清AFP升高的情况，主要出现在妊娠女性的第6-9个月，以及一些肝病患者尤其是出现肝细胞病变者，如肝硬化、急慢性肝炎和肝坏死。妊娠女性AFP值的异常预示发生唐氏症(Down syndrome)的可能。目前临床上检测AFP的方法主要有ELISA法，化学发光法等。
【实用新型内容】
[0004]本实用新型需要解决的现有技术的问题是:现有的用于检测甲胎蛋白的试剂盒，其检测灵敏度和特异性低。
[0005]为了解决上述问题，本实用新型提出了如下技术方案。
[0006]具体而言，本实用新型提供了一种甲胎蛋白双向免疫电泳检测试剂盒，包括盒体1，还包括电泳板2和试剂瓶，所述试剂瓶包括甲胎蛋白瓶3和抗甲胎蛋白抗体瓶4，所述电泳板2包括底板5和琼脂容纳腔6。
[0007]优选的，所述琼脂容纳腔6的高度为3?5mm。
[0008]优选的，所述甲胎蛋白瓶3装有甲胎蛋白，其容积为10ml-30ml。
[0009]优选的，所述抗甲胎蛋白抗体瓶4为装有抗甲胎蛋白的抗体，其容积为10ml-30mlo
[0010]优选的，所述电泳板2还包括固定挡板7。
[0011]优选的，所述固定挡板7的高度为3?5_。
[0012]优选的，所述电泳板2分别设有输入接口和输出接口。
[0013]本试剂盒的检测原理为:凝胶环境在pH值为8.6时，抗AFP抗体只携带微弱的负电荷，而且它分子又较大，所以泳动慢，受电渗作用的影响也大，往往不能抵抗电渗作用，故在电泳时，由于电渗作用，反而向负极倒退。故而将抗AFP抗体置于阳极时其受电渗作用向负极移动，AFP携带较强负电荷故而将其置于阴极，受电泳影响向阳极移动，因此，AFP和抗AFP抗体在电流作用下会汇合形成沉淀线，同时，由于AFP电泳泳动比抗AFP抗体电渗移动快的原因，因此在靠近抗AFP抗体一侧形成沉淀线。
[0014]本实用新型的有益效果是:应用本实用新型的检测试剂盒，通过帮助抗AFP抗体定向移动，加速了反应的出现，同时限制了琼脂扩散时，抗原抗体向四周自由扩散的倾向，因而也提高了敏感性，提高了对甲胎蛋白的检测灵敏度和特异性，缩短了反应时间。
[0015]下面结合附图和各个【具体实施方式】，对本实用新型及其有益技术效果进行详细说明。
【附图说明】
[0016]图1为实施例一所述试剂盒的结构示意图。
[0017]图2为实施例一所述试剂盒的电泳板的结构示意图。
[0018]其中，I为盒体，2为电泳板，3为甲胎蛋白瓶，4为抗甲胎蛋白抗体瓶，5为底板，6为琼脂容纳腔，7为固定挡板。
【具体实施方式】
[0019]如上所述，本实用新型的目的在于:提供一种检测甲胎蛋白双向免疫电泳的检测试剂盒，提高甲胎蛋白的检测灵敏性和特异性，极大的方便肝癌患者的早期诊断。
[0020]下面结合附图和具体实施例对本实用新型作进一步详细的说明。
[0021]实施例中所用各试剂的生产厂商如下:
[0022]巴比妥，购自上海研一生物科技有限公司；
[0023]巴比妥钠，购自上海紫一试剂厂；
[0024]甲胎蛋白，购自上海科敏生物科技有限公司；
[0025]抗甲胎蛋白抗体，购自上海科敏生物科技有限公司。
[0026]实施例一
[0027](一 )检测试剂盒
[0028]实施例一提供了一种甲胎蛋白双向对流免疫电泳检测试剂盒，包括盒体1，还包括电泳板2和试剂瓶，所述试剂瓶为甲胎蛋白瓶3和抗甲胎蛋白抗体瓶4，所述电泳板2包括底板5和琼脂容纳腔6。
[0029]所述甲胎蛋白瓶装有甲胎蛋白，其容积为10ml。
[0030]所述抗甲胎蛋白抗体瓶4为装有抗甲胎蛋白的抗体，其容积为10ml。
[0031]所述电泳板还包括固定挡板7，固定于所述底板的四周，固定挡板的高度为3_。由固定挡板沿底板围成一圈，形成琼脂容纳腔，相应的琼脂容纳腔的高度为3mm，用于承装由琼脂形成的琼脂板。该琼脂容纳腔在加入琼脂形成带有加样孔的琼脂板之后，依照样品的加入分成了两部分，其中一部分用作甲胎蛋白的加入，另一部分用作抗甲胎蛋白抗体的加入。
[0032]所述电泳板分别设有输入接口和输出接口，所述输入接口靠近抗甲胎蛋白抗体加样孔，所述输出接口靠近甲胎蛋白加样孔，所述输入接口和输出接口通过外接电线与电源进行连接。
[0033]( 二 )试剂盒的使用方法
[0034](I)取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g，加水定容至2000ml，制备得到ρΗ8.6的巴比妥缓冲液，用ΡΗ8.6的巴比妥缓冲液配成质量分数为1.2%的琼脂板，60°C微波加热融化，并倒在琼脂容纳腔中，使琼脂的厚度为2.6mm。待琼脂冷却下来，取一根孔径为0.5cm的硬质空心管分别在琼脂容纳腔的两侧打孔，所述小孔与小孔之间的孔距为0.5cm,琼脂容纳腔的两侧分别打有相同数目的排形小孔，相应小孔的中心连线与电流走向一致。
[0035](2)加样:在琼脂容纳腔的一侧小孔内(靠近输出接口 )分别加入含有抗甲胎蛋白抗体0.01mg/ml 50ul，在琼脂容纳腔的另一侧小孔内(靠近输入接口)分别加入血清样本 50ulo
[0036](3)电泳:调节电压为4.5V/cm，电泳时间60min，若血清样本中含有甲胎蛋白，贝Ij甲胎蛋白和抗甲胎蛋白抗体在外界电压的作用下相向泳动，一定时间后AFP和Ant1-AFP抗体将在两孔间相遇，并在比例适当的地方形成肉眼可见的沉淀线。
[0037]实施例二
[0038]实施例二与实施例一的不同之处在于:
[0039]实施例二中固定挡板的高度为5_，琼脂容纳腔的高度为5_。所述甲胎蛋白瓶装有甲胎蛋白，其容积为30ml。所述抗甲胎蛋白抗体瓶为装有抗甲胎蛋白的抗体，其容积为30ml ο
[0040]实施例三
[0041]实施例三与实施例一的不同之处在于:
[0042]实施例二中固定挡板的高度为4mm，琼脂容纳腔的高度为4mm。所述甲胎蛋白瓶装有甲胎蛋白，其容积为20ml。所述抗甲胎蛋白抗体瓶4为装有抗甲胎蛋白的抗体，其容积为20ml ο
[0043]以上所述仅为本实用新型较佳实施例，并不用于局限本实用新型，凡在本实用新型的精神和原则之内所做的修改、等同替换和改进等，均需要包含在实用新型的保护范围之内。
【主权项】
1.一种甲胎蛋白双向免疫电泳检测试剂盒，包括盒体(I)，其特征在于:还包括电泳板(2)和试剂瓶，所述试剂瓶包括甲胎蛋白瓶(3)和抗甲胎蛋白抗体瓶(4)，所述电泳板(2)包括底板(5)和琼脂容纳腔(6)。2.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述琼脂容纳腔(6)的高度为3?5mm ο3.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述甲胎蛋白瓶(3)装有甲胎蛋白，其容积为10ml-30ml。4.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述抗甲胎蛋白抗体瓶(4)为装有抗甲胎蛋白的抗体，其容积为10ml-30ml。5.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述电泳板(2)还包括固定挡板(7)。6.根据权利要求5所述的检测试剂盒，其特征在于，所述固定挡板(7)的高度为3?5mm ο7.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述电泳板(2)分别设有输入接口和输出接口。
【专利摘要】本实用新型涉及医学检验领域，具体涉及一种甲胎蛋白双向免疫电泳检测试剂盒。该检测试剂盒包括盒体(1)，还包括电泳板(2)和试剂瓶，所述试剂瓶包括甲胎蛋白瓶(3)、抗甲胎蛋白抗体瓶(4)，所述电泳板(2)包括底板(5)和琼脂容纳腔(6)。应用本实用新型的检测试剂盒，提高甲胎蛋白的检测灵敏性和特异性，极大的方便肝癌患者的早期诊断。
【IPC分类】G01N33/68
【公开号】CN204882576
【申请号】CN201520651589
【发明人】刘鹏飞, 陈威潼, 韩雪, 姬晓兵
【申请人】天津脉络生物科技有限公司
【公开日】2015年12月16日
【申请日】2015年8月26日