一种猪圆环病毒2型elisa抗体检测试剂盒的制作方法
【专利摘要】本实用新型公开了一种猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒,该技术方案为:该试剂盒包含有盒体和盖体,盒体内安装有PCV2?Cap抗原包被板,HRP?SPA酶标记蛋白试剂瓶,酶底物试剂瓶,阴性对照品瓶,阳性对照品瓶,抗体标准品瓶,结合物稀释液试剂瓶,标本稀释液试剂瓶,0.05%Tween20磷酸缓冲盐水试剂瓶,酶反应终止液试剂瓶,所述盒体内设有瓶体容置腔和板体容置腔,所述的瓶体容置腔根据瓶体的数量设置多个,所述的板体容置腔设置在弹性装置内,所述的瓶体容置腔设置在瓶体紧固装置上,采用的弹性装置和瓶体紧固装置,防止了瓶体从放置腔内脱离,从而避免了瓶内的试剂漏出,避免污染其他的试剂。
【专利说明】
一种猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒
技术领域
[0001]本实用新型涉及一种检测试剂盒,具体涉及一种猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒。
【背景技术】
[0002]猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)是导致断奶仔多系统衰竭综合征(Postweaning multisystemic wasting syndrome,PMffS)的主要病原,并与仔猪先天性震颤、猪皮炎肾炎综合征、猪呼吸道综合征、母猪繁殖障碍等疾病相关1991年PMffS首次在加拿大被发现,目前已证实呈世界性流行。PCV2感染引起的相关疾病在我国的流行情况也十分严重,给养猪业造成巨大的经济损失,随着我国养猪业受到PCV2感染的危害日益严峻,研制PCV2血清抗体检测试剂盒的临床需求迫切,同时这也能为疫苗的研制提供必要的技术手段。PCV2基因组由一条共价闭合环状单股DNA构成,包含两个大的开放阅读框架ORFl和0RF2,分别编码病毒蛋白复制酶(Rep)和病毒衣壳蛋白(Cap) Xap蛋白是病毒的主要结构蛋白含有4个抗原表位,具有较好的免疫原性和抗原性,是检测该病毒特异性抗体的理想靶抗原。由于该病毒在体外培养不产生细胞病变,病毒繁殖能力低,难于获得高产量的病毒抗原用于诊断目的。而昆虫杆状病毒表达系统以其表达外源蛋白产量高、免疫活性好、产物易纯化、反应背景低等优点,在多种动物疫病诊断中得到应用。采用杆状病毒系统表达PCV2-Cap蛋白与PCV2病毒抗血清具有良好的免疫活性反应,在构建重组杆状病毒转移载体时,重组蛋白C末端设计了His-Tag标签序列,可利用商品化的Ni2+亲和层析纯化,获得的重组蛋白作为ELISA包被抗原用于血清抗体的检测。
[0003]现有的诊断试剂盒盒体设计过于简单,未考虑到对试剂瓶的安全防震,提取便利化,特别是在颠簸的路面长途运输,容易造成瓶体晃荡,对瓶体内试剂化学稳定性造成破坏,一旦从瓶体从放置腔内脱离,使瓶内的试剂漏出,污染了其他的试剂,对试剂盒的诊断效果的准确性有明显的影响,此时的试剂盒将不能使用,造成不必要的损失。
【发明内容】
[0004]本实用新型提供一种具有防震功能的猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒,该技术方案为:一种猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒,该试剂盒包含有盒体和盖体,盒体内安装有PCV2-Cap抗原包被板,HRP-SPA酶标记蛋白试剂瓶,酶底物试剂瓶,阴性对照品瓶,阳性对照品瓶,抗体标准品瓶,结合物稀释液试剂瓶,标本稀释液试剂瓶,0.05% Tween20磷酸缓冲盐水试剂瓶,酶反应终止液试剂瓶,
[0005]其特征在于,所述盒体内设有瓶体容置腔和板体容置腔,所述的瓶体容置腔根据瓶体的数量设置多个,所述的HRP-SPA酶标记蛋白试剂瓶,酶底物试剂瓶,阴性对照品瓶,阳性对照品瓶,抗体标准品瓶,结合物稀释液试剂瓶,标本稀释液试剂瓶,0.05%Tween20磷酸缓冲盐水试剂瓶,酶反应终止液试剂瓶放置在瓶体容置腔内,所述的PCV2-Cap抗原包被板放置在板体容置腔内,
[0006]所述的板体容置腔设置在弹性装置内,弹性装置包含有侧壁、托盘、弹簧、托盘与弹簧相连,侧壁上设置有推入位置、限位孔,相应的抗原包被板上设置有弹性突起,抗原包被板可插入板体容置腔内,从推入位置触动托盘进一步压缩弹簧,使弹性突起插入限位孔内,按压弹性突起使抗原包被板从限位孔内脱离,恢复到推入位置。
[0007]所述的瓶体容置腔设置在瓶体紧固装置上,所述的瓶体紧固装置包括有弹性环形壁、弹性环形壁上设置有缺口,缺口一侧并排设有数个倒钩,另一侧设有环形锁扣,根据瓶体直径的大小,自由选择合适的倒钩,所述的环形锁扣用于瓶体紧固装置需要锁紧时与所述倒钩进行卡合。
[0008]进一步的所述的盒体内设置有有温度传感器,并实时显示在盖体上设置的液晶吸纳视屏上,
[0009]进一步的所述的盒体上设置有提手或背带,方便携带,
[0010]进一步的所述的盒体上设置有滚轮方便推移,
[0011 ]进一步的所述的终止液试剂瓶存放的终止液为lmol/li^H2S04溶液,
[0012]进一步的所述的PCV2_Cap抗原包被板的规格为96孔。
[0013]本实用新型的有益效果为:
[0014]1、板体容置腔采用的弹性装置的结构,是试剂盒内的重要部件,抗原包被板得到固定,且插入容置腔内,形成密封的环境,防止其他试剂对其的污染。
[0015]2、瓶体容置腔采用的紧固装置的结构,防止瓶体从放置腔内脱离,从而避免了瓶内的试剂漏出,避免污染其他的试剂。
【附图说明】
[0016]参考所附附图,以更加充分的描述本实用新型的实施例,一些非要素结构不再表示,所附附图仅用于说明和阐述,并不构成对本实用新型范围的限制。
[0017]图1为:本实用新型实施例中一种猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒的结构示意图。
[0018]其中数字表示为:1、盒体,2、盖体,3、瓶体紧固装置,4、板体紧固装置,5、瓶体容置腔,6、板体容置腔。
【具体实施方式】
[0019]一种猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒,该试剂盒包含有盒体I和盖体2,盒体内安装有PCV2-Cap抗原包被板,HRP-SPA酶标记蛋白试剂瓶,酶底物试剂瓶,阴性对照品瓶,阳性对照品瓶,抗体标准品瓶,结合物稀释液试剂瓶,标本稀释液试剂瓶,0.05%TWeen20磷酸缓冲盐水试剂瓶,酶反应终止液试剂瓶,
[0020]其特征在于,所述盒体内设有瓶体容置腔5和板体容置腔6,所述的瓶体容置腔5根据瓶体的数量设置多个,所述的HRP-SPA酶标记蛋白试剂瓶,酶底物试剂瓶,阴性对照品瓶,阳性对照品瓶,抗体标准品瓶,结合物稀释液试剂瓶,标本稀释液试剂瓶,0.05%TWeen20磷酸缓冲盐水试剂瓶,酶反应终止液试剂瓶放置在瓶体容置腔内,所述的PCV2-Cap抗原包被板放置在板体容置腔内,
[0021]所述的板体容置腔6设置在弹性装置4内,弹性装置4包含有侧壁、托盘、弹簧、托盘与弹簧相连,侧壁上设置有推入位置、限位孔,相应的抗原包被板上设置有弹性突起,抗原包被板可插入板体容置腔内,从推入位置触动托盘进一步压缩弹簧,使弹性突起插入限位孔内,按压弹性突起使抗原包被板从限位孔内脱离,恢复到推入位置。
[0022]所述的瓶体容置腔5设置在瓶体紧固装置3上,所述的瓶体紧固装置3包括有弹性环形壁、弹性环形壁上设置有缺口,缺口一侧并排设有数个倒钩,另一侧设有环形锁扣,根据瓶体直径的大小,自由选择合适的倒钩,所述的环形锁扣用于瓶体紧固装置需要锁紧时与所述倒钩进行卡合。
[0023]所述的盒体内设置有有温度传感器,并实时显示在盖体上设置的液晶吸纳视屏上,所述的盒体上设置有提手或背带,方便携带,所述的盒体上设置有滚轮方便推移,所述的PCV2-Cap抗原包被板的规格为96,孔所述的终止液试剂瓶存放的终止液为ImolAJ^H2SO4溶液。
[0024]本检测试剂盒使用方法为:用0.01mol/L碳酸盐缓冲液(pH9.5)稀释纯化的重组蛋白抗原包被96孔ELISA反应板,置4°C过夜,排干孔内包被液,用含0.05% Tween20的0.01mol/L PBS (ρΗ7.2) (PBS-T)洗板4次,拍干后滴加封闭液(200yL/孔),置37°C封闭lh,加入经稀释液稀释的待检血清(10(^17孔),37°(:孵育1.5 h,重复洗板,滴加稀释的辣根过氧化物酶标记的葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA,Zymed产品),每孔10yL,37°C孵育Ih;重复洗板,滴加底物显色液(10yL/孔),显色30 min后终止(终止液50yL/孔),自动酶标仪读取OD Wl,经酶标仪检测所得结果超过设定的临界值结果判为阳性,反之则为阴性。
[0025]通过说明和附图,给出了【具体实施方式】的特定结构的典型实施例,基于本实用新型精神,还可作其他的转换,尽管上述实用新型提出了现有的较佳实施例,然而,这些内容并不作为局限。
【主权项】
1.一种猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒,该试剂盒包含有盒体和盖体,盒体内安装有PCV2-Cap抗原包被板,HRP-SPA酶标记蛋白试剂瓶,酶底物试剂瓶,阴性对照品瓶,阳性对照品瓶,抗体标准品瓶,结合物稀释液试剂瓶,标本稀释液试剂瓶,0.05%TWeen20磷酸缓冲盐水试剂瓶,酶反应终止液试剂瓶,其特征在于:所述盒体内设置有瓶体容置腔和板体容置腔,所述的瓶体容置腔根据瓶体的数量设置多个,所述的HRP-SPA酶标记蛋白试剂瓶,酶底物试剂瓶,阴性对照品瓶,阳性对照品瓶,抗体标准品瓶,结合物稀释液试剂瓶,标本稀释液试剂瓶,0.05%Tween20磷酸缓冲盐水试剂瓶,酶反应终止液试剂瓶放置在瓶体容置腔内,所述的PCV2-Cap抗原包被板放置在板体容置腔内,所述的板体容置腔设置在弹性装置内,弹性装置包含有侧壁、托盘、弹簧、托盘与弹簧相连,侧壁上设置有推入位置、限位孔,相应的抗原包被板上设置有弹性突起,抗原包被板可插入板体容置腔内,从推入位置触动托盘进一步压缩弹簧,使弹性突起插入限位孔内,按压弹性突起使抗原包被板从限位孔内脱离,恢复到推入位置,所述的瓶体容置腔设置在瓶体紧固装置上,所述的瓶体紧固装置包括有弹性环形壁、弹性环形壁上设置有缺口,缺口 一侧并排设有数个倒钩,另一侧设有环形锁扣,所述的环形锁扣用于瓶体紧固装置需要锁紧时与所述倒钩进行卡合。2.根据权利要求1所述的一种猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒,其特征在于:所述的盒体上设置有提手或背带。3.根据权利要求1所述的一种猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒,其特征在于:所述的盒体上设置有滚轮。4.根据权利要求1所述的一种猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒,其特征在于:所述的终止液试剂瓶存放的终止液为ImolAJ^H2SO4溶液。5.根据权利要求1所述的一种猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒,其特征在于:所述的PCV2-Cap抗原包被板的规格为96孔。
【文档编号】G01N33/569GK205506836SQ201620131778
【公开日】2016年8月24日
【申请日】2016年2月22日
【发明人】李兴新, 赵军丽, 徐云德
【申请人】李兴新