专利名称：：氨基硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及一种磁性纳米颗粒，特别涉及一种氨基硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒，还涉及该超顺磁性纳米颗粒的制备方法。
背景技术：
：恶性肿瘤严重危害着人类健康。全世界每年有iooo万人患上癌症，大多数患者在被确诊时肿瘤细胞已发生浸润和转移，错过了手术机会，只能依赖于药物治疗。因此，恶性肿瘤的早期诊断以及高效、安全、经济的靶向抗肿瘤药物的研究成为目前临床急待解决的问题。近年来，纳米4支术的发展为恶性肿瘤的早期诊断及把向性治疗提供了新的机遇，超顺磁性纳米颗粒已被广泛应用于磁共振成像诊断、肿瘤细胞磁分离、肿瘤过热治疗和磁靼向给药等诸多方面，显示出巨大的应用潜力。用于生物医学领域的超顺磁性纳米颗粒要求满足下述基本要求(1)无毒性；(2)在生物环境中足够的化学稳定性；(3)在血液中合适的循环时间；(4)生物降解产物无害。但由于超顺磁性纳米颗粒具有表面疏水性和高比表面积，以及各向异性的磁偶极相互作用，在生物体内易于团聚和吸附血浆蛋白，容易被网状内皮系统(RES)清除，从而影响其到达诊断和治疗扭区，因此，需要对超顺磁性纳米颗粒进行表面改性，在其表面覆盖亲水涂层，以防止团聚、增加稳定性和生物相容性，减少RES吞噬量，延长血中循环时间。此外，为提高主动单巴向性，还可以将磁性耙向和生物耙向相结合，使超顺磁性纳米颗粒同时携带一种可以识别和结合到特定革巴位的分子如单克隆抗体等，以增强治疗效果、减少毒副作用。目前，可用于超顺》兹性纳米颗粒的表面改性剂主要有两类一类为有机小分子表面活性剂，如脂肪酸、氨基酸、多肽^f汙生物和叶酸等；另一类为高分子表面活性剂，如聚乙二醇、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、聚乳酸、葡聚糖、壳聚糖、白蛋白和明胶等。与有机小分子表面活性剂相比，高分子表面活性剂分子链较长，可在纳米颗粒表面形成一定厚度的吸附层，从而使纳米颗粒更加稳定。在众多表面改性剂中，葡聚糖(Dextran)由于具有优良的生物相容性和生物可溶解性，且含有的活性基团经过修饰后可以同时负栽多种功能分子(如酶、抗体、多肽、DNA或RNA等)，在超顺磁性纳米颗粒的表面改性领域得到广泛应用。但葡聚糖修饰的超顺磁性纳米颗粒与单克隆抗体的进一步结合，目前主要采用戊二醛交联法和过碘酸钠氧化法，操作较复杂，且使用的戊二醛和过硪酸钠等化学试剂可能对机体造成毒副作用。
发明内容有鉴于此，为克服现有技术的不足，本发明的目的之一在于提供一种氨基硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒，具有高亲水性，在水相中稳定分敎，可以减少RES吞噬量，延长血中循环时间，并且表面富含氨基，可以方便地与单克隆抗体结合以提高主动靶向性，同时对机体不造成毒副作用，生物相容性好。为达到此目的，在本发明的第一方面，提供了一种氨基硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒，该超顺磁性纳米颗粒具有核壳型结构，其内核为磁性四氧化三铁，内核表面为葡聚糖包覆层，葡聚糖包覆层外表面连接氨基硅烷偶联剂。进一步，所述氨基硅烷偶联剂为N-(2-氨基乙基)-3-氨基丙基三曱氧基硅烷(AEAPS)或3-氨基丙基三乙氧絲烷(APTES);进一步，所述氨基硅烷偶联剂为AEAPS。本发明的目的之二在于提供一种所述氨基硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒的制备方法，操作简便易行，所得纳米颗粒粒径小、分散均匀、具有超顺磁性。为达到此目的，在本发明的第二方面，提供了一种所述氨基硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒的制备方法，包括以下步骤a、制备葡聚糖包覆的超顺磁性四氧化三铁纳米颗粒按照二价铁盐、三价铁盐和葡聚糖的摩尔比为13:1.5~4:0.04~0.10，称取二价铁盐、三价铁盐和葡聚糖，加水使溶解，再在惰性气体保护、温度为55~65。C和搅拌速度为8001500r/min的条件下滴加碱溶液调节pH至7.09.0,滴加完毕后继续恒温搅拌反应12小时，冷却，离心弃沉淀，上清液用酸调节pH至7.09.0,微孔滤膜过滤，滤液即为葡聚糖包覆的超顺磁性四氧化三铁纳米颗粒悬浮液；b、用氨基硅烷偶联剂对葡聚糖包覆的超顺磁性四氧化三铁纳米颗粒进行表面修饰在步骤a制得的葡聚糖包覆的超顺磁性四氧化三铁纳米颗粒悬浮液中，按照葡聚糖包覆的超顺磁性四氧化三铁纳米颗粒与氨基硅烷化偶联剂的摩尔比为1~3:3~15，加入M硅烷化偶联剂，在惰性气体保护、温度为5565。C和搅拌速度为800~1500r/min的条件下恒温搅拌反应35小时，；微孔滤膜过滤，滤液即为氨基硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒悬浮液。进一步，所述二价铁盐为氯化亚铁或硫酸亚铁，三价铁盐为氯化铁或硫酸铁，葡聚糖的相对分子质量为10000;所述二价铁盐、三价铁盐和葡聚糖的摩尔比为l:1.7:0.08;进一步，所述碱溶液为质量百分浓度为25%的氨水溶液，酸为冰乙酸；进一步，所述步骤a是在氮气保护、温度为60。C和搅拌速度为1000r/min的条件下以1mL/min的速度滴加碱溶液，滴加完毕后继续恒温撹拌反应l小时；进一步，所述^KJ^烷偶联剂为AEAPS或APTES;进一步，所述氨基硅烷偶联剂为AEAPS;所述葡聚糖包覆的超顺磁性四氧化三铁纳米颗粒与氨基硅烷化偶联剂的摩尔比为l:7;进一步，所述步骤b是在氮气保护、温度为6(TC和搅拌速度为1000r/min的条件下恒温搅拌反应4小时。本发明的有益效果在于本发明提供了一种氨基硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒，具有高亲水性，在水相中稳定分散，可以减少RES吞噬量，延长血中循环时间，并且表面富含氨基，可以方便地与单克隆抗体结合以提高主动耙向性，同时对机体不造成毒副作用，生物相容性好；本发明还提供了该超顺磁性纳米颗粒的制备方法，操作简便易行，所得纳米颗粒粒径小、分散均匀、具有超顺》兹性；本发明的超顺磁性纳米颗粒在恶性肿瘤的早期诊断和靶向性治疗领域具有良好的应用前景。为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明作进一步的详细描述，其中图1为氨基硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒的透射电镜图；图2为氨基硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒的颗粒数与颗粒直径关系图3为M硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒的磁化曲线图。具体实施例方式本发明采用化学共沉淀法制备超顺磁性Fe304纳米颗粒，其化学反应式为Fe2++2Fe3++80IT=Fe304+4H20考虑到Fe"在反应中很容易被空气氧化成Fe3+,导致Fe304晶体中Fe"含量减少，晶体结构和纯度发生变化，适当提高Fe"比例可以保证Fe"反应完全，因此，本发明中Fe2+和Fe3+的投料摩尔比为13:1.5~4，优选1:1.7。用葡聚糖对超顺磁性Fe304纳米颗粒进行表面改性时，适当提高葡聚糖的比例可以使超顺磁性Fe304纳米颗粒与葡聚糖充分接触并反应，因此，本发明中Fe2+、Fe3+和葡聚糖的投料摩尔比为1~3:1.5~4:0.04~0.10,优选1:1.7:0.08。同样，用氨基硅烷偶联剂对葡聚糖包覆的超顺磁性Fe304纳米颗粒进行表面修饰时，适当提高氨基硅烷偶联剂的比例可以使葡聚糖包覆的超顺磁性Fe304纳米颗粒与氨基硅烷偶联剂充分接触并反应，因此，本发明中葡聚糖包覆的超顺磁性Fe304纳米颗粒与^iJ^硅烷化偶联剂的投料摩尔比为1~3:315，优选1:下面将参照附图，对本发明的优选实施例进行详细的描述。实施例1、氨基硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒的制备本实施例采用氨基硅烷偶联剂AEAPS，制备AEAPS与葡聚糖共修饰的超顺磁性Fe304纳米颗粒(AEAPS/Dextran-SPION)，包括以下步骤a、制备葡聚糖包覆的超顺磁性Fe304纳米颗粒(Dextran-SPION)称取氯化亚4失0.86g(4.33mmol)、氯化铁1.99g(7.36mmol)和DextranT-10(相对分子质量10000,BBI公司)3.5g(0.35mmol)(Fe2+、Fe"和葡聚糖的摩尔比为l:1.7:0.08)，加入三蒸水30mL,搅拌使溶解，再在氮气保护、温度为60。C和搅拌速度为1000r/min的条件下以lmL/min的速度滴加质量百分浓度为25。/。的氨水调节pH至8.0,滴加完毕后继续恒温搅拌反应l小时，得黑色胶状物，自然冷却至室温，8000r/min离心10分钟，弃沉淀，上清液用水乙酸调节pH至8.0，用孔径为0.22拜的微孔滤膜过滤，滤液即为Dextran-SPION悬浮液，用原子吸收分光光度计测得浓度为5mmol/L,置温度4"保存，备用；b、用AEAPS对Dextran-SPION进行表面修饰，制备AEAPS/Dextran-SPION取步骤a制得的浓度为5mmol/L的Dextran-SPION悬浮液50mL,加入浓度为0.35mol/L的AEAPS溶液[将AEAPS(AlfaAesar公司)用摩尔比为l:l的甲苯-甲醇混合液稀释制得]5mL(Dextran-SPION与AEAPS的摩尔比为l:7),在氮气保护、温度为60'C和搅拌速度为1000r/min的条件下恒温搅拌反应4小时，用孔径为0.22nm的微孔滤膜过滤，滤液即为AEAPS/Dextran-SPION悬浮液，置温度4'C保存。实施例2、tt硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性納米颗粒的制备本实施例采用tt硅烷偶联剂APTES,制备APTES与葡聚糖共修饰的超顺磁性Fe304纳米颗粒(APTES/Dextran-SPION),包括以下步骤a、制备Dextran-SPION称取硫酸亚铁1.20g(4.33mmol)、硫酸铁2.94g(7.36mmol)和DextranT-10(相对分子质量10000，BBP〉司)3.5g(0.35mmol)(Fe2+、Fe3+和Dextran的摩尔比为l:1.7:0.08),加入三蒸水30mL，搅拌使溶解，再在氮气保护、温度为60。C和搅拌速度为1000r/min的条件下以lmL/min的速度滴加质量百分浓度为25。/。的氨7jc调节pH至8.0,滴加完毕后继续搅拌反应l小时，得黑色胶状物，自然冷却至室温，8000r/min离心10分钟，弃沉淀，上清液用》h乙酸调节pH至8.0，用孔径为0.22|0111的微孔滤膜过滤，滤液即为Dextran-SPION悬浮液，用原子吸收分光光度计测得浓度为5mmoI/L，置温度4"C保存，备用；b、用APTES对Dextran-SPION进行表面修饰，制备APTES/Dextran-SPION取步骤a制得的浓度为5mmol/L的Dextran-SPION悬浮液50mL，加入浓度为0.35mol/L的APTES溶液[将APTES(AlfaAesar公司)用摩尔比为l:l的曱苯-甲醇混合液稀释制得]5mL(Dextran-SPION与APTES的摩尔比为l:7)，在氮气保护、温度为60X:和搅拌速度为1000r/min的条件下恒温搅拌反应4小时，用孔径为0.22Mm的微孔滤膜过滤，滤液即为APTES/Dextran-SPION悬浮液，置温度4"C保存。参照实施例1和实施例2，采用不同的Fe"、Fe"和Dextran投料摩尔比(Fe2+、Fe3+和Dextran的投料摩尔比为13:1.5~4:0.04~0.10)和/或不同的Dextran-SPION与氨M烷化偶联剂投料摩尔比(Dextran-SPION与氨基硅烷化偶联剂的投料摩尔比为13:3~15)，同样可以制得本发明的氨基硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性納米颗粒。此外，所述氨基硅烷化偶联剂采用除AEAPS、APTES以外的其它氨基硅烷化偶联剂；所述碱溶液采用质量百分浓度为20%~50%的氨水溶液、氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液；所述惰性气体采用氮气或氩气，反应温度在5565'C之间，搅拌速度在8001500r/min之间；都可以达到本发明目的。氨基硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒的性能检测1、形态和賴:径用透射电镜(Hitachi-600型，日本日立公司)观察AEAPS/Dextran-SPION的形态和粒径在铜网上制膜并滴加AEAPS/Dextran-SPION悬浮液，自然沉淀5分钟，用滤纸吸去边缘多余液体，置透射电镜下观察。结杲见图1和图2，由图1可知，AEAPS/Dextran-SPION呈球形，具有核壳型结构，其内核为高密处6304晶体，内核表面为Dextran与AEAPS共修饰涂层，内核粒径不超过20nm，整体粒径不超过25nm;由图2可知，AEAPS/Dextran-SPION的平均粒径约为15nm。2、铁离子和葡聚糖的含量分别采用二价铁-邻二氮菲法(参见文献鱼腥草等七种中草药中铁元素的测定分析.穆卫东等.广东孩史量元素科学，第12期，4749页，2006年)和蒽酮-硫酸法(参见文献葡聚糖T2(Ht为白芷多糖含量测定标准品可行性研究.匡扶等.重庆医科大学学报，第5期，570~575页，2008年)测定Dextran-SPION悬浮液和AEAPS/Dextran-SPION悬浮液中铁离子和葡聚糖的含量。结果以标准铁溶液浓度C为橫坐标、吸光y^4为纵坐标绘制标准曲线，得回归方^4=0.0012C+0.0405(r-0.9992)，由标准曲线算得Dextran-SPION悬浮液中铁离子浓度为0.71mg/mL,AEAPS/Dextran-SPION悬浮液中铁离子浓度为1.2mg/mL;以标准Dextran溶液浓度C为横坐标、吸光^(为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程4-0.0126C+0.0533(r-0.9994)，由标准曲线算得Dextran-SPION悬浮液中Dextran浓度为20,59mg/mL，AEAPS/Dextran-SPION悬浮液中Dextran浓度为19.37mg/mL。3、磁学性质用振动样品磁强计(HH-15型，南京大学仪器厂)检测AEAPS/Dextran-SPION的磁学性质将AEAPS/Dextran-SPION悬浮液真空干燥后，逐渐增大外加磁场强度至AEAPS/Dextran-SPION的磁化强度不再增大时停止，记录i兹化曲线并进行数据分析。结果见图3,由图3可知，AEAPS/Dextran-SPION的磁化强度随外加磁场强度的增大而增大，当外加磁场强度增大至3000Gs后，继续增大外加磁场强度，AEAPS/Dextran-SPION的磁化强度基本保持不变，即达到磁饱和；所得磁化曲线为一条过原点的单一曲线，表明当外加磁场撤消后，AEAPS/Dextran-SPION几乎没有剩磁，具有超顺磁性；通过外推法求得AEAPS/Dextran-SPION的饱和磁化强度为67.36488emu/gFe,比饱和磁化强度为69.82151emu/g,比剩余磁化强度为32.5472emu/g,剩磁为22.61721Gs。4、AEAPS/Dextran-SPION与单克隆抗体的结合用戊二醛(GA)替代AEAPS，按照前述AEAPS/Dextran-SPION的制备方法制得GA/Dextran-SPION。用水乙酸调节AEAPS/Dextran-SPION悬浮液或GA/Dextran-SPION悬浮液pH至6.0,加入终浓度为2.59(ig/mL的抗甲胎蛋白单克隆抗体(mAb-APF),温度4。0:静置24小时使旭好8/063^311-310>1或0^6乂红311-SPION与mAb-APF相结合，制得^1)-好？-^^3/06乂13"311-3101^或11^1>奵？-GA/Dextran隱SPION。在酶标板中，设3个复孔，每孔加入浓度为40ng/mL的甲胎蛋白(APF)100iaL,温度4X:包被过夜，PBS洗涤3次后，加入质量百分浓度为1%的牛血清白蛋白200pL，温度37。C封闭1.5小时，PBS洗涤3次后，加入终浓度为38mg/mL的mAb-APF-AEAPS/Dextran-SPION，温度37'C孵育1小时，PBS洗涤3次后，加入铁染液(将盐酸和质量百分浓度为20。/o的亚铁氰化钟溶液按体积比为l:5混合，即得)进行普鲁士蓝显色反应(铁离子遇到亚铁氰根离子生成蓝色的亚铁氰化铁即普鲁士蓝沉淀)，温度37。C反应0.5小时，用酶标仪(MultiskanSepectrun型，美国The皿o公司)在波长490nm处测定吸光值(OD柳)；同时，还设置AEAPS/Dextran-SPION组、mAb-APF國GA/Dextran誦SPION组、GA/Dextran-SP腿组、阳性对照组(Dextran-SPION悬浮液直接与铁染液进行普鲁士蓝显色反应)和空白对照组，每组设3个复孔；各组OD49o值以3个复孔的均值(f)和标准差(5*)表示，大于或等于空白对照组2.1倍者判为阳性。结果见表l，由表1可知，AEAPS/Dextran-SPION组、mAb-APF-GA/Dextran-SPION组和GA/Dextran-SPION组的OD将o值均小于空白对照組的2.1倍，判为阴性；而mAb-APF-AEAPS/Dextran-SPION组的OD柳值为空白对照组的2.4倍，判为阳性>说明AEAPS/Dextran-SPION可以与mAb-APF有效结合，并与AFP发生特异性反应，同时证实Dextran-SPION的表面成功修饰有AEAPS。表l、AEAPS/Dextran-SPION与单克隆抗体的结合检测结果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过参照本发明的优选实施例已经对本发明进行了描述，但本领域的普通技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离所附权利要求书所限定的本发明的精神和范围。权利要求1、氨基硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒，其特征在于该超顺磁性纳米颗粒具有核壳型结构，其内核为磁性四氧化三铁，内核表面为葡聚糖包覆层，葡聚糖包覆层外表面连接氨基硅烷偶联剂。2、根据权利要求1所述的M硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒，其特征在于所述tt硅烷偶联剂为N-(2-氨基乙基)-3-氨基丙基三甲氧基硅烷或3-氨基丙基三乙氧基硅烷。3、根据权利要求2所述的M硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒，其特征在于所述氨基硅烷偶联剂为N-(2-氨基乙基)-3-氨基丙基三曱氧絲烷。4、权利要求1所述的氨基硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒的制备方法，其特征在于包括以下步骤a、制备葡聚糖包覆的超顺磁性四氧化三铁纳米颗粒按照二价铁盐、三价铁盐和葡聚糖的摩尔比为l-3:1.5~4:0.040.10，称取二价铁盐、三价铁盐和葡聚糖，加水使溶解，再在惰性气体保护、温度为55~65。C和搅拌速度为8001500r/min的条件下滴加碱溶液调节pH至7.09.0，滴加完毕后继续恒温搅拌反应12小时，冷却，离心弃沉淀，上清液用酸调节pH至7.09.0，微孔滤膜过滤，滤液即为葡聚糖包覆的超顺磁性四氧化三铁纳米颗粒悬浮液；b、用氨基硅烷偶联剂对葡聚糖包覆的超顺磁性四氧化三铁纳米颗粒进行表面修饰在步骤a制得的葡聚糖包覆的超顺磁性四氧化三铁纳米颗粒悬浮液中，按照葡聚糖包覆的超顺磁性四氧化三铁纳米颗粒与氨基硅烷化偶联剂的摩尔比为1~3:3~15，加入氨基硅烷化偶联剂，在惰性气体保护、温度为5565。C和搅拌速度为800~1500r/min的条件下恒温搅拌反应35小时，孩t孔滤膜过滤，滤液即为氨基硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒悬浮液。5、根据权利要求4所述的M硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒的制备方法，其特征在于所述二价铁盐为氯化亚铁或硫酸亚铁，三价铁盐为氯化铁或硫酸铁，葡聚糖的相对分子质量为10000;所述二价铁盐、三价铁盐和葡聚糖的摩尔比为l:1.7:0.08。6、根据权利要求5所述的氨基硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒的制备方法，其特征在于所述碱溶液为质量百分浓度为25%的氨水溶液，酸为水乙酸。7、根据权利要求6所述的氨基硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒的制备方法，其特征在于所述步骤a是在氮气保护、温度为60'C和搅拌速度为1000r/min的条件下以1mL/min的速度滴加碱溶液，滴加完毕后继续恒温搅拌反应1小时。8、根据权利要求4所迷的氨基硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒的制备方法，其特征在于所述M硅烷偶联剂为N-(2-氨基乙基)-3-氨基丙基三甲氧基硅烷或3-氣基丙基三乙氧;i^f圭烷。9、根据权利要求8所述的氨基硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒的制备方法，其特征在于所述M硅烷偶联剂为N-(2-氨基乙基)-3-氨基丙基三甲氧基硅烷；所述葡聚糖包覆的超顺磁性四氧化三铁纳米颗粒与氨基硅烷化偶联剂的摩尔比为l:7。10、根据权利要求9所迷的M硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒的制备方法，其特征在于所述步骤b是在氮气保护、温度为60。C和搅拌速度为1000r/min的条件下恒温搅拌反应4小时。全文摘要本发明公开了一种氨基硅烷偶联剂与葡聚糖共修饰的超顺磁性纳米颗粒及其制备方法，该超顺磁性纳米颗粒具有核壳型结构，其内核为磁性四氧化三铁，内核表面为葡聚糖包覆层，葡聚糖包覆层外表面连接氨基硅烷偶联剂；其制备方法是先制备葡聚糖包覆的超顺磁性四氧化三铁纳米颗粒，再用氨基硅烷偶联剂对葡聚糖包覆的超顺磁性四氧化三铁纳米颗粒进行表面修饰；本发明的超顺磁性纳米颗粒具有高亲水性，在水相中稳定分散，可以减少网状内皮系统吞噬量，延长血中循环时间，并且表面富含氨基，可以方便地与单克隆抗体结合以提高主动靶向性，同时对机体不造成毒副作用，生物相容性好，制备方法简单，在恶性肿瘤早期诊断和靶向性治疗领域具有良好的应用前景。文档编号H01F1/032GK101554574SQ20091010365公开日2009年10月14日申请日期2009年4月21日优先权日2009年4月21日发明者娟贺,均邓,郑峻松申请人:中国人民解放军第三军医大学