一种棘孢木霉孢子可湿性粉剂组合物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物农药领域，具体涉及一种棘孢木霉孢子可湿性粉剂组合物及其制 备方法。
【背景技术】
[0002] 土传病害的化学农药防治用药量大，超剂量使用导致残留严重超标，对环境的负 面影响较为严重，随着人们对环境保护的重视和农业的可持续发展，对环境较为友好的生 物防治类农药（以下简称生防农药）越来越受到关注，生防农药的开发越来越受国家政策 支持。然而，目前市场上的生防农药，保质期一般只有3个月左右，从而导致田间防效稳定 性得不到保证，在植物病害防治中尚不能完全发挥作用。可见，生防农药制剂的货架期短， 是目前生物农药生产和应用的瓶颈。
[0003] 可湿性粉剂是一种基本的农药剂型，可制成悬浮液，进行喷雾、土壤处理等，在运 输、贮藏、使用等方面具有诸多优点。对可湿性粉剂的热储稳定性的一般规定，FAO要求 在（54±2) °C储存14天或以上，但当制剂既不适宜也不打算在炎热气候条件下使用，以 及高温对制剂有负面影响时，可以变更试验条件，变更条件（45±2) °C储存6周或以上， (40±2)°C储存8周或以上，（35±2)°C储存12周或以上，（30±2)°C储存18周或以上。有 效成分为活体的真菌袍子类可湿性粉剂，在要求温度的贮藏中容易失去活力，因此在制剂 加工中，不仅要提高其使用的便利性，更重要的是如何通过制剂保持孢子的活力，延长货架 寿命。
[0004] 棘孢木霉：属于半知菌门，丝孢目，木霉属。是一类分布广、繁殖快、具有较高生防 价值且对一些广谱性杀菌剂不敏感的生防有益真菌，具有适应性强、抗菌谱广的特点，还能 促进植物生长，具有：重寄生作用、竞争作用、产生裂解酶、产生拮抗化合物，抑制或杀死病 原菌、诱导寄主植物对病原菌的防卫反应等作用方式，具有重要的经济意义。
【发明内容】
[0005] 本发明为解决上述中的技术问题，提供一种生物活性较高、贮存稳定性好、持效长 的棘孢木霉孢子可湿性粉剂组合物及其制备方法。
[0006] 本发明所采用的技术方案为：
[0007] -种棘孢木霉孢子可湿性粉剂组合物，其特征在于，所述粉剂由以下成分组成：
[0008] 棘孢木霉孢子粉：10-55 %，润湿剂：2-15%，分散剂：2-8 %，稳定剂：6-10 %，载体 补余；
[0009] 所述棘孢木霉孢子粉经热贮培养筛选并培养至少三代后，繁殖获得。
[0010] 所述分散剂为木质素磺酸盐、萘磺酸盐、聚羧酸盐、聚萘甲醛磺酸盐、阴-非离子 复合剂中的一种或几种。
[0011] 所述润湿剂为烷基苯磺酸钠盐、烷基硫酸钠盐、茶皂素中的一种或几种。
[0012] 所述载体为硫铵、轻钙、膨润土、高岭土、白炭黑中一种或几种的混合。
[0013] 所述稳定剂为环糊精、玉米淀粉中的一种或几种。
[0014] 所述热贮培养的温度为40°C -55°C。
[0015] 所述棘孢木霉孢子可湿性粉剂组合物的制备方法为，
[0016] 1)将木霉菌株转接到PDA培养基上，25-28°C恒温培养，得初代棘孢木霉孢子粉；
[0017] 2)将初代棘孢木霉孢子粉分别在45°C和54°C的温度下热贮14-40天，并筛选出仍 存活的初代棘孢木霉孢子粉；
[0018] 3)将上述中存活的初代棘孢木霉孢子粉进行繁殖获得下一代孢子粉F1，并批量 培育；
[0019] 4)再次分别以45°C和54°C的温度下对所得的棘孢木霉孢子粉Fl热贮，获得孢子 粉F2 ;
[0020] 5)重复2) -4)两次后，将所得的孢子粉过筛，最后得到所述棘孢木霉孢子粉；
[0021] 6)按所述棘孢木霉孢子可湿性粉剂组合物的组份及其重量配比，称量棘孢木霉孢 子粉、润湿剂、分散剂、稳定剂和载体并混合，进行超微气流粉碎，得所述棘孢木霉孢子可湿 性粉剂。
[0022] 所述步骤5)中过筛采用200目的筛网。
[0023] 所述棘孢木霉孢子粉可湿性粉剂组合物应用于防治农作物的土传病害。
[0024] 与现有技术相比，本发明的棘孢木霉孢子可湿性粉剂如下优点：
[0025] 1、在润湿剂、分散剂等助剂的选择上，注重与棘孢木霉孢子粉的相容性，选择的助 剂对棘孢木霉孢子粉的没有影响或活性影响较小；
[0026] 2、产品中的棘孢木霉孢子粉在高温及热贮下仍具有较高的存活率，使产品具有较 长的货架寿命，在规定的温度下可贮存较长的时间，以及高温条件下施药有较长的持效期。
【具体实施方式】
[0027] 下面结合实施例对本发明作进一步地阐述。
[0028] 实施例1耐高温棘孢木霉菌孢子粉的培育与筛选
[0029] 1)将木霉菌株转接到PDA培养基上，25-28°C恒温培养，得初代棘孢木霉孢子粉 F；
[0030] 2)将初代棘孢木霉孢子粉在45°C和54°C的温度下热贮30天，并筛选出仍存活的 初代棘孢木霉孢子粉；
[0031] 3)将上述中存活的初代棘孢木霉孢子粉进行繁殖获得下一代孢子粉F1，并批量 培育；
[0032] 4)再次分别以45°C和54°C的温度下对所得的棘孢木霉孢子粉Fl热贮，获得孢子 粉F2 ;
[0033] 5)重复2) -4)两次后，将所得的孢子粉过筛（200目），最后得到所述棘孢木霉孢 子粉；
[0034] 6)按相应棘孢木霉孢子可湿性粉剂组合物的组份及其重量配比，称量棘孢木霉孢 子粉、润湿剂、分散剂、稳定剂和载体并混合，进行超微气流粉碎，得所述棘孢木霉孢子可湿 性粉剂。
[0035] 由上述步骤1)、3)、4)步骤中获得的棘孢木霉孢子粉萌发为棘孢木霉菌株，再于 40°C热贮30天，测定活孢率如下：
[0036] 表1高温培育棘孢木霉活孢率
[0038] 结果表明，通过高温热贮筛选出的孢于通过培育后较原孢于具有耐高温的特性。
[0039] 实施例3助剂的筛选
[0040] 筛选出对棘孢木霉孢子粉活性影响较小的助剂。首先将气粉后的助剂与棘孢木 霉按一定比例混合均匀，于常温储存，7天、30天、60天、半年后测定各处理棘孢木霉的活孢 率，设置不加助剂的棘孢木霉孢子粉为对照。
[0041] 表2润湿剂的筛选
[0043] 结果表明，润湿剂中，烷基苯磺酸钠盐、烷基硫酸钠盐、茶皂素类，对木霉孢子粉活 性影响最小。
[0044] 表3分散剂的筛选
[0045]
[0046] 结果表明，分散剂中，木质素磺酸盐、萘磺酸盐、聚羧酸盐、聚萘甲醛磺酸盐、 阴-非离子复合剂，对木霉孢子粉活性影响最小。
[0047] 表4稳定剂的筛选
[0049] 结果表明，稳定剂中，环糊精、玉米淀粉对木霉孢子粉活性影响最小。
[0050] 实施例4棘孢木霉孢子可湿性粉剂组合物的实施配方
[0051] (1)可湿性粉剂配方
[0052] 配方1 :3. 5 %棘孢木霉孢子粉
[0053] 棘孢木霉孢子粉3. 5 %，阴-非离子复合剂（GY-D04) 3 %，烷基苯磺酸盐 (8906) 3 %，阴-非离子复合剂（YP) 5 %，萘磺酸盐类（NNO) 5 %，玉米淀粉10 %，白炭黑5 %， 滑石粉15%，轻钙15%，水洗高岭土补足。先将原药、分散剂、润湿剂、稳定剂和载体充分混 匀，进行超微气流粉碎，形成成品。
[0054] 配方2 :10 %棘孢木霉孢子粉
[0055] 棘孢木霉孢子粉10%，阴-非离子复合剂（GY-DlO) 4%，聚羧酸盐（T36) 3%，木质 素磺酸盐（CA-SA) 5%，烷基苯磺酸盐（EFW