一种肝素酶法检测依诺肝素钠1.6-酐含量试剂盒的制作方法
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及一种肝素酶法检测依诺肝素钠1.6-酐含量试剂盒。
【背景技术】
[0002]现行欧洲/美国药典，依诺肝素钠中1.6-酐含量是评价依诺肝素钠(低分子肝素)质量的重要指标。该方法包括肝素酶Ι、Π、ΙΙΙ组合降解以及硼氢化钠还原等过程，操作步骤繁琐，所需试剂、耗材种类较多，需要耗费实验人员大量的时间和精力，且易由于人为操作原因造成数据误差大、实验重复性差，目前还没有成套的肝素酶检测试剂盒。
【实用新型内容】
[0003]本实用新型的主要目的在于简化依诺肝素钠1.6-酐含量检测操作方法，而提供一种肝素酶法检测依诺肝素钠1.6-酐含量试剂盒。
[0004]为达到上述目的，本实用新型的技术方案提供一种肝素酶法检测依诺肝素钠1.6-酐含量试剂盒，包括试剂盒A和B各一个，A盒为实验耗材和溶液Α、溶液B，室温长期保存，B盒为液体肝素酶溶液，需_20°C或-80°C保存。
[0005]进一步，所述试剂盒A，分为上下两层，上层为试剂管，下层为溶液A、溶液B和实验耗材。
[0006]进一步，上层，所述试剂管，每组分别为:0?2ml离心管、O?1.5ml螺口锥底管。
[0007]进一步，下层，所述溶液A、溶液B，包括O?10ml超纯水、O?50ml已过滤乙酸钙溶液。
[0008]进一步，下层，所述实验耗材，包括2ml注射器、小型号滤头、浮漂。
[0009 ] 进一步，所述试剂盒B为肝素酶1、I1、III的混合溶液。
[0010]与现有技术相比，本实用新型的优点在于:结构设计简单，节省实验人员大量的实验准备时间，测试快速方便、高效可靠，测试结果稳定。
【附图说明】
[0011]图1是本实用新型一种肝素酶法检测依诺肝素钠1.6-酐含量试剂盒A盒上层的结构示意图。
[0012]图2是本实用新型一种肝素酶法检测依诺肝素钠1.6-酐含量试剂盒A盒下层的结构示意图。
[0013]图3是本实用新型一种肝素酶法检测依诺肝素钠1.6-酐含量试剂盒B盒的结构示意图。
[0014]其中图1:1O组试剂管，3为O?2ml离心管，4为O?1.5ml螺口锥底管；其中图2:包I注射器，包2小型号滤头，I为浮漂，A为超纯水，B为已过滤乙酸钙溶液;其中图3:2为20支肝素酶1、I1、III的混合溶液。
【具体实施方式】
[0015]下面结合附图和实施例，对本实用新型的【具体实施方式】作进一步详细描述。以下实施例用于说明本实用新型，但不用来限制本实用新型的范围。
[0016]本实施例的一种肝素酶法检测依诺肝素钠1.6-酐含量试剂盒的结构如图1所示，包括试剂盒A和B各一个，A盒为实验耗材和溶液A、溶液B，室温长期保存，B盒为液体肝素酶溶液，需-20 °C或-80 0C保存。
[0017]所述试剂盒A，分为上下两层，上层为试剂管，下层为溶液A、溶液B和实验耗材。
[0018]试剂盒A上层，所述试剂管，每组分别为:O?2ml离心管、O?1.5ml螺口锥底管。
[0019]试剂盒A下层，所述溶液A、溶液B，包括O?10ml超纯水、O?50ml已过滤乙酸钙溶液。
[0020]试剂盒A下层，所述实验耗材，包括2ml注射器、小型号滤头、浮漂。
[0021 ]所述试剂盒B为肝素酶1、I1、III的混合溶液。
[0022]操作方法:
[0023]步骤I二糖标准溶液:使用A盒上层10组试剂管中0_2ml离心管，精密称量标准品，用A盒下层的溶液A溶解;HPLC分析并记录图谱。
[0024]步骤2还原二糖标准溶液:使用A盒上层10组试剂管中0-2ml离心管，用A盒下层的溶液A溶解，再移取1ul至步骤I的60ul二糖标准溶液中；混匀，室温反应24小时以上;HPLC分析并记录图谱。
[0025]步骤3空白溶液:使用A盒上层10组试剂管中0-2ml离心管，加入20ul A盒下层的溶液A;再加入70ulA盒下层的溶液B;将B盒肝素酶I管全部加入该0-2ml离心管中；25°C反应48小时以上;移取60ul反应液与1ul步骤2的硼氢化钠溶液至微量螺口管中；混匀，室温反应24小时以上;HPLC分析并记录图谱。
[0026]步骤4供试溶液I/标准溶液1:使用A盒上层10组试剂管中0-2ml离心管，称量肝素钠/肝素钠标准品至该离心管中；使用A盒下层的溶液A溶解;过滤后为供试溶液I/标准溶液I，做平行样。
[0027]步骤5供试溶液2/标准溶液2:移取20ul步骤4的供试溶液I/标准溶液I至A盒上层O?1.5ml螺口锥底管中，做平行样;加入70ul A盒下层的溶液B，做平行样;将B盒肝素酶I管全部加入该0-1.5ml螺口锥底管中，做平行样;25°C反应48小时以上，作为供试溶液2/标准溶液2;将供试溶液2/标准溶液2离心取上清;HPLC分析并记录图谱。
[0028]步骤6供试溶液3/标准溶液3:移取60ul步骤5的供试溶液2/标准溶液2至A盒上层O?1.5ml螺口锥底管中，做平行样;加入1ul步骤2的硼氢化钠溶液，做平行样;室温反应24小时以上，作为供试溶液3/标准溶液3;将供试溶液3/标准溶液3离心取上清;HPLC分析并记录图谱。
[0029]本实用新型的优点在于:结构设计简单，节省实验人员大量的实验准备时间，测试快速方便、高效可靠，测试结果稳定。
[0030]以上所述仅是本实用新型的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本实用新型技术原理的前提下，还可以做出若干改进，这些改进也应视为本实用新型的保护范围。
【主权项】
1.一种肝素酶法检测依诺肝素钠1.6-酐含量试剂盒，其特征在于，包括试剂盒A和B各一个，A盒为实验耗材和溶液A(A)、溶液B(B)，室温长期保存，B盒为液体肝素酶溶液，需-20°C或-80°C保存;所述试剂盒A分为上下两层，上层为试剂管，下层为溶液A(A)、溶液B(B)和实验耗材。2.根据权利要求1所述的肝素酶法检测依诺肝素钠1.6-酐含量试剂盒，其特征在于，试剂盒A上层，所述试剂管，每组分别为O?2ml离心管(3)、0?1.5ml螺口锥底管(4)。3.根据权利要求1所述的肝素酶法检测依诺肝素钠1.6-酐含量试剂盒，其特征在于，试剂盒A下层，所述实验耗材，包括2ml注射器、小型号滤头、浮漂(1)。
【专利摘要】本实用新型公开了一种肝素酶法检测依诺肝素钠1.6-酐含量试剂盒，包括试剂盒A和B各一个，A盒为实验耗材和溶液A、溶液B，室温长期保存，B盒为液体肝素酶溶液，需-20℃或-80℃保存。本实用新型的肝素酶法检测依诺肝素钠1.6-酐含量试剂盒，结构设计简单，节省实验人员大量的实验准备时间，测试快速方便、高效可靠，测试结果稳定。
【IPC分类】C12M1/00, C12M1/34
【公开号】CN205295301
【申请号】
【发明人】卢元, 苏楠, 梅祥
【申请人】北京贝奥康泰医药科技有限公司
【公开日】2016年6月8日
【申请日】2015年7月8日