一种快速分离磷酸蛋白的装置的制造方法
【技术领域】
[0001]本实用新型属于生物实验设备，具体涉及一种快速分离磷酸蛋白的装置。
【背景技术】
[0002]蛋白质磷酸化与蛋白质活化密切相关，磷酸化蛋白质的分离与分析是生命科学研究的常用基本手段。磷酸蛋白的分离分析常采用磷酸蛋白的抗体实现，利用磷酸蛋白与相应抗体的结合作用，将蛋白从裂解的细胞液中分离出来进行下一步的分析，但是抗体和磷酸蛋白均溶于水，如何将结合磷酸蛋白的抗体从分离液中提取是一个较复杂的工艺，并且目前磷酸蛋白抗体存在价格昂贵，稳定性差，提取后的蛋白浓度低等问题。
【实用新型内容】
[0003]本实用新型解决的技术问题是:针对抗体结合并提取分离磷酸蛋白技术存在的缺陷，提供一种结构简单、成本低廉并且可快速分离与分析磷酸蛋白的装置。
[0004]本实用新型采用如下技术方案实现:
[0005]—种快速分离磷酸蛋白的装置，包括盒体I，所述盒体I内固定设有一通道4，所述通道4的一端通孔位于盒体顶面，另一端与一分离管5对接，所述分离管5为筒状，其顶端对接通道4，底端采用滤膜7封闭，并且所述分离管5的底端与滤液槽6对接，所述分离管5内部均匀分布有吸附磷酸化蛋白的微粒。
[0006]进一步的，所述滤液槽6的底部连接有引流管8，所述引流管8设有常闭的阀门。
[0007]进一步的，所述通道4为一截圆筒状管道的内腔，所述管道通过固定夹2竖直夹装在盒体I内。
[0008]进一步的，所述盒体I的底部设有防滑垫3。
[0009]进一步的，所述防滑垫3的底部设有若干交错的防滑齿排。
[0010]在本实用新型中，所述微粒为固定化Al3+。
[0011]进一步的，所述盒体I为方形箱体或圆柱箱体。
[0012]本实用新型在分离管内分离磷酸化蛋白质，所述分离管内均匀分布有多个微粒，样品液从通道引流进入分离管，微粒直接或间接与样品液中的识别分子结合，在本实用新型中，所述识别分子为要分离出来的磷酸蛋白质，在将识别分子粘附在微粒上后，清空下方滤液槽中的液体，洗去杂质，然后采用缓冲液倒入分离管内，将磷酸蛋白质从微粒上洗脱下来，完成磷酸蛋白质的分离收集。微粒对磷酸化蛋白质的吸附通过Al3+与磷酸的螯合作用，脱附通过PH改变及焦磷酸的竞争实现。
[0013]本实用新型具有如下有益效果:结构简单，设计巧妙，成本低廉，通过设置含有针对磷酸蛋白质识别分子微粒的分离管，能快速经过滤的方式直接或间接的将结合在微粒上的磷酸蛋白分离，并对磷酸蛋白进行定性分析和识别;通过盒体下方防滑垫的设置较大程度避免了试剂盒在工作台上打滑移动。
[0014]以下结合附图和【具体实施方式】对本实用新型做进一步说明。
【附图说明】
[0015]图1为实施例中的快速分离磷酸蛋白的装置结构示意图。
[0016]图中标号:1-盒体，2-固定夹，3-防滑垫，4-通道，5-分离管，6_滤液槽，7_滤膜，8_引流管。
【具体实施方式】
[0017]实施例
[0018]为使本实用新型实现的技术手段与功效易于理解，下面通过本实施例进一步阐述本实用新型。
[0019]参见图1，一种快速分离磷酸蛋白的装置，包括盒体I，本实施例中的盒体为立式的方形盒体，其他的实际应用中，也可采用其他形式如圆柱盒体的形式。盒体I内固定设有一通道4，通道4为一截圆筒状管道的内腔，通过固定夹2竖直夹装在盒体I内，固定夹2与盒体尺寸大小相符，其一端固定设置在盒体内壁上，另一端的夹体将管道固定夹持，保持通道4的一端通孔位于盒体顶面，另一端与一分离管5对接，分离管5为筒状，顶端对接通道4，底端采用滤膜7封闭，并且分离管5的底端与滤液槽6对接，分离管5内部均匀分布有吸附蛋白的微粒，如固体化Al3+，滤膜7—般采用300目的滤膜即可达到蛋白质分离过滤的效果。滤液槽6采用固定方式设置在盒体内，在底部连接有引流管8，引流管8设有常闭的阀门，在过滤后可通过引流管8将分离液进行排放，滤液槽6也可采用活动放置在盒体内的活动滤液槽，通过更换不同的容器来盛接分离磷酸蛋白的分离液。
[0020]盒体I的底部设有防滑垫3，防滑垫3的底部设有若干交错的防滑齿排，能够较大程度避免了实验过程中盒体在工作台上的滑移。
[0021]以下通过具体的试验过程说明本实施例的工作方式:将组织细胞提取液通过通道4加进入到分离管5后，其中的磷酸化蛋白作为识别分子与分离管5中的固体化Al3+识别结合，然后用缓冲液洗掉杂质，通过滤液槽6收集更换滤液，再通过洗脱液洗下识别分子上纯的磷酸蛋白，收集或用于后续分析。其中各种分离液包括如下:缓冲液A(30mM MES,0.25%CHAPS ,8M urea , 135mM sodium glutamate , 135mM potassium aspartate ,20mM加1(^2016 4册.1)用于使蛋白质与微粒结合，缓冲液8(30111]\1 MES,0.25%CHAPS,8M urea,2OOmM sodium glutamate , 200mM potassium aspartate, 20mM imidazole，pH6.I)用于洗除杂质;洗脱液(200mM pyrophosphate,8M urea，pH9.0)用于洗脱磷酸化蛋白。微粒对磷酸化蛋白质的吸附通过A13+与磷酸的螯合作用，脱附通过pH改变及焦磷酸的竞争实现。
[0022]上述为本实用新型的优选实施方式，但所属领域的技术人员应该明白，在不脱离所附权利说明书所限定的本实用新型的精神和范围内，在形式和细节上对本实用新型所作出的各种变化，都属于本实用新型的保护范围。
【主权项】
1.一种快速分离磷酸蛋白的装置，其特征在于:包括盒体(I)，所述盒体(I)内固定设有一通道(4)，所述管道通过固定夹(2)竖直夹装在盒体(I)内，所述通道(4)的一端通孔位于盒体顶面，另一端与一分离管(5)对接，所述分离管(5)为筒状，其顶端对接通道(4)，底端采用滤膜(7)封闭，并且所述分离管(5)的底端与滤液槽(6)对接，所述分离管(5)内部均匀分布有吸附磷酸化蛋白的微粒，所述微粒为固定化Al3+，所述滤液槽(6)的底部连接有引流管(8)，所述引流管(8)设有常闭的阀门。2.根据权利要求1所述的一种快速分离磷酸蛋白的装置，所述通道(4)为圆筒状管道的内腔。3.根据权利要求1所述的一种快速分离磷酸蛋白的装置，所述盒体(I)的底部设有防滑垫⑶。4.根据权利要求3所述的一种快速分离磷酸蛋白的装置，所述防滑垫(3)的底部设有若干交错的防滑齿排。5.根据权利要求4所述的一种快速分离磷酸蛋白的装置，所述盒体(I)为方形箱体或圆柱箱体。
【专利摘要】本实用新型公开了一种快速分离磷酸蛋白的装置，包括盒体，所述盒体内固定设有一通道，所述通道的一端通孔位于盒体顶面，另一端与一分离管对接，所述分离管为筒状，顶端对接通道，底端采用滤膜封闭，并且所述分离管的底端与滤液槽对接，所述分离管内部均匀分布有微粒。本实用新型采用微粒直接或间接与分离液的识别分子结合，将磷酸蛋白作为识别分子粘附在微粒上，能快速通过滤的方式将结合在微粒上的磷酸蛋白分离，以对磷酸蛋白进行定性分析和识别，同时本实用新型具有结构简单，设计巧妙，成本低廉的优点。
【IPC分类】G01N1/28, G01N1/40
【公开号】CN205301027
【申请号】
【发明人】蒋磊, 王浩, 邹江, 肖献忠, 王慷慨, 张华莉
【申请人】中南大学
【公开日】2016年6月8日
【申请日】2015年12月8日