生产株性稳定的番木瓜组培苗的方法

专利名称：生产株性稳定的番木瓜组培苗的方法
技术领域：
本发明涉及通过组织培养技术的植物再生方法，具体说是涉及番木瓜通过生物组培无性繁殖技术获得株性稳定的植株方法。
背景技术：
番木瓜是一种在热带、亚热带地区广泛栽培的多年生果树。由于番木瓜本身花性复杂，用常规种子繁殖无法保证植株的株性一致，在种播苗中两性株(结长圆形瓜)占55％，雌性株(结圆形瓜)占45％，而长圆形两性瓜的市场价格是雌性瓜的市场价格的2-3倍，所以能培育出株性稳定的两性株幼苗，将使种植番木瓜的产值可提高25-50％，从而可大大增加种植户的收益。有文献资料报道，采用扦插、嫁接等无性繁殖技术可以解决这一问题，但是，采用这种方法所获得的种苗数量有限，无法在生产上大面积推广。番木瓜的组织培养研究已有文献报道，但这些研究只涉及到“番木瓜组织培养再生植株”技术，其培育出的组培苗与实生苗一样无法区分两性株与雌性株，因此，这些技术无法获得株性一致的植株，在生产中无实用意义。为此，我们有必要寻找一套可生产株性稳定的番木瓜组培苗的方法。

发明内容
本发明的目的是通过生物技术手段获得株性稳定的植株，建立一套可进行工厂化生产的、株性稳定的番木瓜组培苗的生产方法。
本发明解决其株性稳定的番木瓜组培苗方法所采用的技术方案是选株→外植体无菌消毒→接种于初代培养基上→诱导不定芽发生→切取不定芽转入继代培养基中增植培养→不定芽转入生根培养基中诱导不定根发生→形成具有根、茎、叶的完整番木瓜组培苗→假植→移植于营养杯→组培苗大田种植的方法。
在具体实施过程中外植体无菌消毒的方法，采用酒精先消毒后用次氯酸钠消毒再用氯化汞消毒液消毒然后用无菌水冲洗的消毒效果为佳；所说的不定芽转入继代培养基中增植培养的继代培养基是采用在1/2～3/2的MS中添加6-苄氨基嘌呤0.1～1.0mg/L和赤霉素0.1～0.5mg/L和蔗糖3～5％组成的培养基为佳，所说的生根培养基是采用在MS中添加吲哚丁酸1～3mg/L和活性炭0.01～0.3％组成的培养基为佳，所说的假植是采用细沙床种植，并用70％遮荫网和薄膜双层覆盖为佳。
采用了本发明所说的一种株性稳定的番木瓜组培苗方法后的有益效果是1、所培育出的番木瓜植株株性稳定率可达100％，即可按客户要求生产100％的两性株或100％的雌性株番木瓜组培苗。
2、所培育出的番木瓜植株，果实的品质、大小、形状均匀一致，为番木瓜的产业化、标准化生产打下基础，提高市场竞争力。
3、所培育出的番木瓜植株，与同期种播苗相比，平均生长量高5～10％，现蕾期和开花期提前8～10天，结果位低，座果率高。
下面结合具体实施例叙述本发明的技术方案。
具体实施例方式
实施例1采用“美中红”番木瓜成龄两性株，取其侧芽，依次在75％酒精、1％次氯酸钠和0.2％氯化汞溶液中分别浸泡1分钟、15分钟、10分钟，用无菌水冲洗5次，接种于通用的初代培养基上，诱导出不定芽发生后，切取不定芽转入3/2MS中添加6-苄氨基嘌呤0.5mg/L和赤霉素0.2mg/L和蔗糖4％组成的继代培养基中进行增植培养，将不定芽转入生根培养基中诱导不定根发生，其生根培养基采用在MS中添加吲哚丁酸2mg/L和活性炭0.2％的培养基，当形成具有根、茎、叶的完整番木瓜组培苗，诱根率达75％后移植于细沙床假植，并用75％遮荫网和薄膜双层覆盖，当成活后的组培苗移栽定植于大田。大田种植试验结果100％为两性植株，丰产且提前结果，果实的大小、形状一致，达到了满意的如期效果。
实施例2采集“美中红”番木瓜成龄雌性株的侧芽，用实施例1相同的消毒方法和培养条件所获得的组培苗定植于大田，结果表现为100％雌性植株。
实施例3采集“穗中红”番木瓜成龄两性株的侧芽，依次在75％酒精、1％次氯酸钠和0.2％升汞溶液中分别浸泡2分钟、20分钟、10分钟，用无菌水冲洗5次后，接种于通用的初代培养基，诱导出不定芽发生后，切取不定芽转入3/2MS添加6-苄氨基嘌呤0.6mg/L和赤霉素0.4mg/L和蔗糖4％组成的继代培养基中进行增植培养，将不定芽转入生根培养基中诱导不定根发生，其生根培养基采用在MS中添加吲哚丁酸2.5mg/L和活性炭0.2％的培养基，当形成具有根、茎、叶的完整番木瓜组培苗，诱根率达85％后移植于细沙床假植，并用75％遮荫网和薄膜双层覆盖，当成活后的组培苗移栽定植于大田。大田试验结果两性株为100％，丰产且提前结果，果实的大小、形状一致。
实施例4采集高酶品种“黄08”番木瓜成龄雌性株的侧芽，用实施例3相同的消毒方法和培养条件所获得的组培苗定植于大田，结果表现为100％雌性植株。
权利要求
1.一种生产株性稳定的番木瓜组培苗方法，其特征在于；采用选株→外植体无菌消毒→接种于初代培养基上→诱导不定芽发生→切取不定芽转入继代培养基中增植培养→不定芽转入生根培养基中诱导不定根发生→形成具有根、茎、叶的完整番木瓜组培苗→假植→移植于营养杯→组培苗大田种植的方法。
2.根据权利要求1所说的一种生产株性稳定的番木瓜组培苗方法，其特征在于所说的外植体无菌消毒的方法，采用酒糖先消毒后用次氯酸钠消毒再用氯化汞消毒然后用无菌水冲洗。
3.根据权利要求1所说的一种生产株性稳定的番木瓜组培苗方法，其特征在于所说的不定芽转入继代培养基中增值培养的继代培养基是采用在1/2～3/2的MS中添加6-苄氨基嘌呤0.1～1.0mg/L和赤霉素0.1～0.5mg/L和蔗糖3～5％组成的培养基。
4.根据权利要求1所说的一种生产番木瓜株性稳定的组培苗方法，其特征在于所说的生根培养基是采用在MS中添加吲哚丁酸1～3mg/L和活性炭0.01～0.3％组成的培养基。
5.根据权利要求1所说的一种生产番木瓜株性稳定的组培苗方法，其特征在于所说的假植是采用细沙床种植，并用70％遮荫网和薄膜双层覆盖。
全文摘要
一种生产株性稳定的番木瓜组培苗方法，涉及通过组织培养技术的植物再生方法。它是采用选株→外植体无菌消毒→接种于初代培养基上→诱导不定芽发生→切取不定芽转入继代培养基中增植培养→不定芽转入生根培养基中诱导不定根发生→形成具有根、茎、叶的完整番木瓜组培苗→假植→移植于营养杯→组培苗大田种植的方法，本方法培育出的番木瓜植株株性稳定率可达100％，即可按客户要求工厂化生产出100％的两性株或100％的雌性株番木瓜组培苗。
文档编号A01H4/00GK1481674SQ0213470
公开日2004年3月17日 申请日期2002年9月11日 优先权日2002年9月11日
发明者陈健, 陈国华, 游恺哲, 吴坤林, 林冠雄, 黄常华, 陈春锋, 曾宋君, 李卫红, 张奕奇, 陈 健 申请人:广州市果树科学研究所, 中国科学院华南植物研究所