专利名称：独蒜兰的试管种球生产技术的制作方法
技术领域：
本发明提供独蒜兰的试管种球生产技术。
背景技术：
独蒜兰属约有30个种，我国就有16个，其形态独特，花色艳丽，具有很高的观赏价值，在国际兰花贸易中占有重要的地位。更重要的是独蒜兰可以像球根花卉如风信子、百合等一样进行促成栽培开花，这使得它具有非常巨大的发展前景。目前独蒜兰国际需求巨大，欧美市场上价格昂贵，而野生兰科植物全部受国际公约的保护，其商品苗都要通过人工繁殖进行生产。我国是独蒜兰属植物的主要原产国，拥有丰富的种质资源，但随着生态环境的改变和国际需求引起的滥采和走私，独蒜兰野生资源受到严重的破坏。而目前国内除台湾外尚无独蒜兰的人工繁殖和栽培。
独蒜兰的繁殖主要采用分株繁殖，但繁殖速度慢，而独蒜兰种子由于胚发育不完全，自然状态下极难萌发。国外及台湾常规的独蒜兰生产都是采用生产试管苗移栽的方式，运输成本高，移栽、管理费工，成活率低。
发明内容
本发明采用人工营养液和人工培养基，独特的种子萌发培养基，和壮苗培养基，通过提高培养温度，使试管苗形成休眠球茎。并在较低温度和自然光下炼苗，打破休眠。应用无菌播种的方法能获得大量试管种球，和大量试管苗，采用诱导形成休眠球茎，将球茎出瓶后再运输极为方便，栽培容易，成活率高。
本发明所述的独蒜兰的试管种球生产技术，具体包括以下步骤1、材料选取独蒜兰属植物，开花时选取生长健壮的母株进行人工授粉，授粉后180天，果荚基本成熟。
2、无菌播种果荚成熟时取下，用75％的酒精浸泡30秒后置于0.1％的升汞溶液中消毒20分钟，无菌水冲洗4～5次后切开果实，将粉末状胚接种到改良1/2MS培养基(MS培养基+NDM培养基维生素成分)附加10％的椰子汁、6-苄基嘌呤0～1毫克/升、萘乙酸0-1毫克/升及活性碳2克/升培养基中；培养温度(25±1)℃，光照度1500～2000lx，光照12小时/天；培养30天左右胚萌发，萌发率依品种不同在10％和80％之间。
3、壮苗培养及休眠球茎诱导60天左右形成完整植株后，接种到改良花宝培养基附加香蕉100g/升、6-苄基嘌呤0.2-1毫克/升、萘乙酸0.2-5毫克/升的壮苗培养基上壮苗培养，并于培养2个月生成壮苗后，将培养温度提高至30℃继续培养1个月，培养材料叶片黄落，形成休眠状态的球茎。
4、炼苗及移栽将形成的球茎转移到20℃温室中，自然光下炼苗10天，然后将其从玻璃瓶中取出，洗净培养基和黄萎的根叶，移入泥炭和细沙配制的混合基质中，保持20-25℃，适当通风和足够的湿度，一周后有新芽自球茎基部长出，2周后可生根，形成新的植株，成活率可达95％以上。
以上步骤中所用的培养基都附加蔗糖15克/升，pH 5.2-5.4。培养温度(25±1)℃，光照度1500～2000lx，光照12小时/天。
本发明所述的技术能成功地进行独蒜兰的无菌播种和试管种球生产，本技术提出生产休眠球茎方式出瓶移栽，新颖实用，成活率高。实施该技术只需有常规的植物组织培养设备即可进行。
本发明所述的独蒜兰的试管种球生产技术与现有技术相比，能成功地进行独蒜兰的无菌播种和试管种球生产，具有投入少，产出高的特点。
具体实施例方式
实施例11、材料Pleione maculata秋花独蒜兰开花后选取健壮植株不同个体间授粉，授粉后130天取果荚播种；2、果荚消毒果实，用75％的酒精浸泡30秒后置于0.1％的升汞溶液中消毒20分钟，无菌水冲洗5次；3、种子萌发切开果实，将粉末状胚接种到改良1/2MS培养基+10％的椰子汁+6-苄基嘌呤0.5毫克/升+萘乙酸0.5毫克/升+活性碳2克/升的萌发培养基中；在培养30天左右胚萌发，萌发率约60％；4、成苗培养继续培养60天左右形成完整植株后，接种到改良花宝培养基+香蕉100g/升+萘乙酸0.5毫克/升的壮苗培养基上壮苗培养，培养60天后形成健壮小苗。
5、休眠种球诱导在培养2个月生成壮苗后，将培养温度提高至30℃继续培养1个月，培养材料叶片黄落，形成休眠状态的球茎。
6、炼苗与移栽将形成的球茎转移到20℃温室中，自然光下炼苗10天，然后将其从玻璃瓶中取出，洗净培养基和黄萎的根叶，移入泥炭和细沙配制的混合基质中，保持适当通风和足够的湿度，一周后有新芽自球茎基部长出，2周后可生根，形成新的植株，成活率约95％。
权利要求
1.一种独蒜兰的试管种球生产技术，采用人工营养液和人工培养基，独特的种子萌发培养基，和壮苗培养基，通过提高培养温度，使试管苗形成休眠球茎；并在较低温度和自然光下炼苗，打破休眠；应用无菌播种的方法能获得大量试管种球，和大量试管苗，其特征在于具体步骤包括如下1)、材料选取独蒜兰属植物，开花时选取生长健壮的母株进行人工授粉，授粉后180天，果荚基本成熟；2)、无菌播种果荚成熟时取下，用75％的酒精浸泡30秒后置于0.1％的升汞溶液中消毒20分钟，无菌水冲洗4～5次后切开果实，将粉末状胚接种到改良1/2MS培养基中；培养温度25±1℃，光照度1500～2000lx，光照12小时/天；培养30天胚萌发；3)、壮苗培养及休眠球茎诱导60天形成完整植株后，接种到壮苗培养基上壮苗培养，并于培养2个月生成壮苗后，将培养温度提高至30℃继续培养1个月，培养材料叶片黄落，形成休眠状态的球茎，培养条件同步骤2)；4)、炼苗及移栽将形成的球茎转移到20℃温室中，自然光下炼苗10天，然后将其从玻璃瓶中取出，洗净培养基和黄萎的根叶，移入泥炭和细沙配制的混合基质中，保持20-25℃，适当通风和足够的湿度，一周后有新芽自球茎基部长出，2周后可生根，形成新的植株。
2.根据权利要求1中所述的独蒜兰的试管种球生产技术，其特征在于步骤2)、中所述改良1/2MS培养基为MS培养基+NDM培养基维生素成分，附加10％的椰子汁、6-苄基嘌呤0～1毫克/升、萘乙酸0-1毫克/升及活性碳2克/升。
3.根据权利要求1中所述的独蒜兰的试管种球生产技术，其特征在于步骤3)、中所述壮苗培养基为改良花宝培养基附加香蕉100g/升、6-苄基嘌呤0.2-1毫克/升、萘乙酸0.2-5毫克/升。
全文摘要
本发明提供独蒜兰的试管种球生产技术，独蒜兰形态独特，花色艳丽，具有很高的观赏价值，我国是独蒜兰属植物的主要原产国，拥有丰富的种质资源，但近年来独蒜兰野生资源受到严重的破坏。独蒜兰的繁殖主要采用分株繁殖，但繁殖速度慢，国外及台湾常规的独蒜兰生产都是采用生产试管苗移栽的方式，运输成本高，移栽、管理费工，成活率低。本发明采用人工营养液和人工培养基，提高培养温度，低温炼苗，应用无菌播种的方法能获得大量试管种球，和大量试管苗，采用诱导形成休眠球茎，将球茎出瓶后再运输极为方便，栽培容易，成活率高。
文档编号A01H3/04GK1631102SQ200410077728
公开日2005年6月29日 申请日期2004年12月29日 优先权日2004年12月29日
发明者陈之林, 叶秀麟, 杨燕仪, 易琦斐, 段俊, 曾宋君, 梁承邺 申请人:中国科学院华南植物园