专利名称：光叶眼子菜快速繁殖的方法
技术领域：
本发明涉及水生植物的组织培养方法，尤其涉及一种光叶眼子菜(Potamogton lucens Linn)快速繁殖的方法，属于生物技术在水体植被恢复和水景布置中生产种苗的应用。
背景技术：
光叶眼子菜属眼子菜科眼子菜属，以其叶黄绿或带亮绿色供观赏，而且较抗污染，是生物食物链中的重要植物资源，又是水体植被恢复中的主要水生植物。光叶眼子菜的叶子呈长椭圆形、卵状椭圆形至披针状椭圆形，无柄或具短柄，有时柄长可达2厘米；叶片长2～18厘米，宽0.8～3.5厘米，质薄，先端尖锐，常具0.5～2厘米长的芒状尖头，基部楔形，边缘浅波状，疏生细微锯齿；叶脉5～9条，在清水中栩栩如生。
在自然界中繁殖系数低，如利用常规的分株法繁殖，形成不了规模化生产，难以满足水体植被恢复的需求。
组织培养作为生物技术领域中的一种重要手段，利用植物细胞的全能性，如茎尖、嫩芽等组织，通过离体培养，产生愈伤组织、分化成苗、诱导生根，从而形成植物的无性系快速繁殖的植株。虽然组织培养是一种比较成熟的技术，其基本培养基一般采用MS，但对不同植物，从产生愈伤组织、分化成苗、诱导生根的不同生长阶段需要不同的营养配置，以及不同的生长条件。因此对光叶子菜的组织培养，也需要特殊的培养基和培养条件。
发明内容
本发明的目的是提供一种光叶眼子菜快速繁殖的方法。
为了达到上述目的，本发明包括下列步骤①取光叶眼子菜地下茎尖作为培养物；②将培养物消毒处理；③接入诱导培养基中培养；④转接于分化与增殖培养基培养；⑤或将光叶眼子菜芽分株，可作为新的光叶眼子菜培养物，重复步骤④可得到大量的光叶眼子菜芽；或将光叶眼子菜芽转接于生根培养基中诱导生根，即得到光叶眼子菜苗。
本发明具有如下优点和积极效果1、本发明的诱导培养基、分化与增殖培养基及生根培养基是最适合光叶眼子菜三个不同生长阶段——诱导培养、分化与增殖及生根培养的最佳培养基配方。
2、一个光叶眼子菜地下茎尖经反复增殖，一年可繁殖上万株种苗，为水体植被恢复和水景布置提供大量的种苗。
具体实施例方式
下面结合实施例详细说明1、所述的步骤①取长度为1～2厘米的光叶眼子菜地下茎尖作为光叶眼子菜培养物。
2、所述的步骤②将光叶眼子菜培养物用流水冲冼30～50分钟后，取出用75％的酒精棉球擦洗光叶眼子菜培养物的表面，再用0.1％的氯化汞浸泡消毒5～8分钟，然后取出用无菌水冲洗4～6次，每次2～4分钟；3、所述的步骤③将经步骤②处理的光叶眼子菜培养物接入诱导培养基中，培养的温度23～25℃，光照10～12h/d，光照强度1000Lx；培养20～30天，光叶眼子菜培养物开始萌动、生长；诱导培养基为每升MS基本培养基中加入0.1毫克KT(6-呋喃氨基嘌呤)、0.1毫克2，4-D(2，4-二氯苯氧乙酸)、30克蔗糖、6克琼脂；其中每升MS基本培养基含NH4NO3(硝酸铵) 1650毫克KNO3(硝酸钾) 1900毫克CaCI2·2H2O(二水氯化钙) 440毫克MgSO4·7H2O(硫酸镁) 370毫克KH2PO4(磷酸二氢钾) 170毫克KI(碘化钾) 0.83毫克H3BO3(硼酸) 6.2毫克MnSO4·4H2O(硫酸锰) 22.3毫克ZnSO4·7H2O(硫酸锌) 8.6毫克Na2MoO4·2H2O(钼酸钠) 0.25毫克CuSO4·5H2O(硫酸铜) 0.025毫克CoCI2·6H2O(氯化钴) 0.025毫克FeSO4·7H2O(硫酸亚铁)27.8毫克乙二胺四乙酸二钠37.3毫克肌醇100毫克烟酸0.5毫克盐酸吡哆醇 0.5毫克盐酸硫胺素 0.1毫克甘氨酸 2毫克余者为水；4、所述的步骤④将经步骤③培养的光叶眼子菜培养物转接于分化与增殖培养基，培养温度25～28℃，光照10h/d，光照强度2000Lx；培养30～40天长出许多光叶眼子菜芽；分化与增殖培养基为每升MS基本培养基中加入1毫克BA(6-苄基腺嘌呤)、0.1毫克NAA(萘乙酸)、30克蔗糖、6克琼脂；5、所述的步骤⑤
若将步骤④的光叶眼子菜芽分株，可作为新的光叶眼子菜培养物，重复步骤④可得到大量的光叶眼子菜芽；若将步骤④的光叶眼子菜芽转接于生根培养基中诱导生根，培养温度24～26℃，光照12h/d，光照强度3000Lx；培养25～30天即得到光叶眼子菜苗；生根培养基为每升MS基本培养基中加入1升蒸馏水、4毫克BA(6-苄基腺嘌呤)、4毫克IAA(萘乙酸)、40克蔗糖、12克琼脂。
由此可见，实施本发明，可在短期内得到大量的光叶眼子菜试管苗。
权利要求
1.一种光叶眼子菜快速繁殖的方法，其特征在于包括下列步骤①取光叶眼子菜地下茎尖作为培养物；②将培养物消毒处理；③接入诱导培养基中培养；④转接于分化与增殖培养基中培养；⑤或将光叶眼子菜芽分株，可作为新的光叶眼子菜培养物，重复步骤④可得到大量的光叶眼子菜芽；或将光叶眼子菜芽转接于生根培养基中诱导生根，即得到光叶眼子菜苗。
2.按权利要求1所述的一种光叶眼子菜快速繁殖的方法，其特征在于所述的步骤①是取长度为1～2厘米的光叶眼子菜地下茎尖作为光叶眼子菜培养物。
3.按权利要求1所述的一种光叶眼子菜快速繁殖的方法，其特征在于所述的步骤②是将光叶眼子菜培养物用流水冲冼30～50分钟后，取出用75％的酒精棉球擦洗光叶眼子菜培养物的表面，再用0.1％的氯化汞浸泡消毒5～8分钟，然后取出用无菌水冲洗4～6次，每次2～4分钟。
4.按权利要求1所述的一种光叶眼子菜快速繁殖的方法，其特征在于所述的步骤③是将经步骤②处理的光叶眼子菜培养物接入诱导培养基中，培养的温度23～25℃，光照10～12h/d，光照强度1000Lx；培养20～30天形成愈伤组织；诱导培养基为每升MS基本培养基中加入0.1毫克6-呋喃氨基嘌呤、0.1毫克2，4-二氯苯氧乙酸、30克蔗糖、6克琼脂；其中每升MS基本培养基含NH4NO31650毫克KNO31900毫克CaCI2·2H2O 440毫克MgSO4·7H2O 370毫克KH2PO4170毫克KI 0.83毫克H3BO36.2毫克MnSO4·4H2O 22.3毫克ZnSO4·7H2O 8.6毫克Na2MoO4·2H2O 0.25毫克CuSO4·5H2O 0.025毫克CoCI2·6H2O 0.025毫克FeSO4·7H2O 27.8毫克乙二胺四乙酸二钠37.3毫克肌醇100毫克烟酸0.5毫克盐酸吡哆醇 0.5毫克盐酸硫胺素 0.1毫克甘氨酸 2毫克余者为水。
5.按权利要求1所述的一种光叶眼子菜快速繁殖的方法，其特征在于所述的步骤④是将经步骤③培养的光叶眼子菜培养物转接于分化与增殖培养基，培养温度25～28℃，光照10h/d，光照强度2000Lx；培养30～40天长出许多光叶眼子菜芽；分化与增殖培养基为每升MS基本培养基中加入1毫克6-苄基腺嘌呤、0.1毫克萘乙酸、30克蔗糖、6克琼脂。
6.按权利要求1所述的一种光叶眼子菜快速繁殖的方法，其特征在于所述的步骤⑤是将步骤④的光叶眼子菜芽转接于生根培养基中诱导生根，培养温度24～26℃，光照12h/d，光照强度3000Lx；培养25～30天即得到光叶眼子菜苗；生根培养基为每升MS基本培养基中加入1升蒸馏水、4毫克BA、4毫克IAA、40克蔗糖、12克琼脂。
全文摘要
本发明公开了一种光叶眼子菜快速繁殖的方法，涉及水生植物的组织培养方法。本发明包括下列步骤①取光叶眼子菜地下茎尖作为培养物；②将培养物清洗处理；③接入诱导培养基中培养；④转接于分化与增殖培养基培养；⑤或将光叶眼子菜芽分株，可作为新的光叶眼子菜培养物，重复步骤④可得到大量的光叶眼子菜芽；或将光叶眼子菜芽转接于生根培养基中诱导生根，即得到光叶眼子菜苗。本发明具有诱导培养、分化与增殖及生根培养的最佳培养基配方，可快速繁殖光叶眼子菜，一棵光叶眼子菜地下茎尖一年可繁殖上万株种苗，为水体植被恢复和水景布置提供大量的种苗。
文档编号A01G7/00GK1930953SQ20061012476
公开日2007年3月21日 申请日期2006年10月13日 优先权日2006年10月13日
发明者赵家荣, 刘艳玲, 徐立铭 申请人:中国科学院武汉植物园