专利名称：：宠物食品的制作方法
技术领域：
：本发明涉及宠物食品组合物与特级优质宠物食品产品的制备过程的组合。
背景技术：
：微牛物群所有新生动物肠内都是相对无菌的。因此在没有能够减少病原体的保护性微生物的生命阶段，新生动物就会更易被病原菌侵袭。在出生后不久，新生动物需要一个能够栖息于消化道内的微生物集合体。该微生物集合体被定义为微生物群。肠内微生物群包含多种不同的细菌和真菌，在整个肠道内近有400种不同微生物，其总数达104。消化系统内的定位肠内微生物的集合体分布于整个肠道中。在特殊的区域可发现微生物存在三种生态位(a)附着于肠壁。它可直接附着于上皮组织，如乳酸杆菌在嗉囊中，或是包埋于上皮组织的粘膜层上，如在盲肠中便是此种类型。(b)附着于食物颗粒上。(c)悬浮于肠内容物的液相中。组成肠内的不同区域菌群的组成是不同的，并且还依赖于如pH值等条件因素。小肠内趋向于由乳酸杆菌和一小部分其他的兼性厌氧菌，如大肠杆菌或链球菌所占领。在肠后面的区域有大量的专性(仅在唯一一种环境条件下能够存活)厌氧菌。如梭状芽胞杆菌和拟杆菌等厌氧菌尤其易生长于盲肠内。狗肠道内生长的菌群是典型的进化产生的与宿主共生的种群。这一点在盲肠微生物群中表现得尤为显著。M力麟射削涵勺柳微生物群在肠内与宿主形成共生关系，并通过制造不同种类的酶帮助宿主消化从而有益于宿主，这些酶能够帮助将诸如纤维素等大的食物颗粒/多糖进行消化/分解。肠内的细菌还可以剌激免疫响应。例如，无菌动物的丙种球蛋白水平与具备完整肠内菌群的常规动物水平相比更低。使用抗生素对肠内菌群是有害的。如要作为临床疾病的治疗使用抗生素时，会破坏益生菌的比率并导致肠道更加敏感，结果会滋生病原菌。沙门氏菌和肠内其他病原体侵袭的增强会导致抗病性随之减弱，从而引起腹泻。在处理动物时，应当考虑的一个因素是应激。事实证明，应激会影响肠内微生物群的组成。应激可被描述为剌激体内平衡、生理和行为反应超出标准的因素。唯一被接受的衡量应激存在或不存在的指标是看血液中肾上腺皮质激素的水平，当遇到应激时，血液中肾上腺皮质激素的水平会上升，这会影响肠的蠕动以及肠内的粘液物质的产生。应激还可以通过降低乳酸杆菌和其他乳酸菌(LAB)的浓度和增加大肠杆菌类的浓度来影响肠道微生物群。所有应激条件会使得应激的动物体肠内PH值趋于增加(更趋碱性)，这样肠道内的如大肠杆菌等病原菌就会增多从而损害有益菌种。接种疫苗、抗生素治疗、断奶、运送、迁移或生病，被认为是导致肠内微生物群平衡失调而有利于病原菌的应激中的一小部分因素。应激还会改变唾液中蛋白酶的含量。在应激的个体中，作为结果，纤维蛋白和自身的(共生)菌群会从口咽表面消失。该共生菌群然后迅速被由大部分绿脓杆菌组成的生物膜所取代。应激可抑制动物和人类的免疫反应，并且一些抗生素已经显示出可抑制免疫反应并显著导致脾和胸腺重量的减少。在这些情况下停止使用抗生素可使肠内菌群的再生恢复并使免疫功能得到恢复。抗生素通常亦会减少乳酸杆菌菌群数量。因此，耐受应激的动物呈现胃肠道生态系统调节机制的改变和破坏，使病原体在肠道内更容易建立。RoyFuller博士将益生菌定义为活的微生物饲料增补剂，它通过改善肠道微生物平衡而对宿主动物产生有益影响(Fuller,1989)。该定义强调了作为益生菌基本组成成分的活细胞的重要性。"益生(probiosis)"—词来源于希腊文"在前(pro)(预先)"和"生活力(biosis)(生命)"，因此它与抗生素的定义是相反的，它在胃肠道内促进细菌物种的繁衍。益生定义为标准成熟菌群能够抵抗组成菌株的过度生长和外来菌株的建立的性质，以及通过益生菌来加强和重建。益生菌用于预防性药物的概念是由Metchnikoff提出的。他提出巴尔干半岛人长寿是由于长期食用含有保加利亚乳杆菌的酸奶的结果。新生动物的肠道是相对无菌的，因此缺乏那些正常居于肠内并能对抗疾病的微生物。益生菌增补剂的介入可建立肠道微生物群。已发现益生菌是通过以下的作用机制发挥作用的竞争营养物在肠内，有益微生物和病原微生物可利用同种类的营养物质。因此，这就存在着对这些营养物质的竞争来生长和繁殖。由此，有益微生物在肠内定殖得越多，有益微生物和病原微生物之间产生的竞争越多。竞争附着位点附着于沿着肠壁的粘附位点是重要的寄居地，很多肠道病原体要附着在肠壁上以防止被肠道内的食物蠕动带走。剌激免疫剌激抗体的产生(局部和全身)增强巨噬细胞活性提高Y干扰素水平直接抗菌作用抗菌作用可通过细菌素完成，该细菌素是由多种乳酸菌产生或是有机酸的产物，它可以直接起作用或是通过降低PH值来起作用。改善消化益生菌通过产酶来发挥此类作用和增加有益健康的微生物菌群，这些酶能帮助多糖分子降解，从而可从食物中获得利用更多的营养物质。该微生物群还能产生维生素，从而为宿主提供第二营养来源。为了能够达到预期效果，微生物的最小浓度必须能够维持在肠内的生存和生长。然而，活菌的最小有效剂量并不容易确定。已有提出，一旦特定微生物的浓度降到107g排泄物，倘若它在全部时间内一直低于该浓度水平，它在生态系统中就失去了作用。观察结果显示，每克肠道内容物能忍受的梭菌属和肠道细菌总数小于107g。由此要求益生菌至少要达到107CFU才能够起作用，这样这些水平已被定义为最小剂量。安全性——被选作益生菌组分的微生物必须非病原性的且是无毒的。生存能力——仅当益生菌中包含的微生物在产物存贮和遍布整个肠内以确保微生物生存的时候保持活性，益生菌才会起作用。最小剂量——益生菌的浓度需达到每个动物个体含107_108CFU。质量保证——除了特定益生微生物外，益生菌在任一阶段都不能被任何其他微生物污染，如发酵制备过程以及储存过程，这是非常重要的。普咯泰克斯(Protexin)是一种高浓度的益生菌，它包含数百万个有益微生物，自然的存在于所有健康禽类和动物体的肠内。这些微生物可定殖于未成熟的肠内或重建紊乱的肠道，这样就增强了其对潜在病原菌竞争性排斥的机制。包含在本发明中的益生菌屎肠球菌，来自于是国际认证细菌菌种保藏中心NCMB(国家食品工业与海洋细菌菌种保藏中心)。该菌株培养于容积为5000L的发酵罐中。然后在将其与宠物食品和其他组分的普咯泰克斯浓縮物以精确的浓度混合之前，用包被的抗冻剂进行保护并且进行冷冻干燥以形成粉末。发酵设备需满足高级质量控制标准(GMP)，并满足卫生学标准。这样才能被允许制备人用等级的益生菌微生物。在宿主消化道内选择屎肠球菌来行使其特殊的功能。其包含在宠物食品中的合理性如下屎肠球菌保护宿主免受肠毒性大肠杆菌而引起腹泻(Jinetal.，2000;Underdahleta/.1982;Wadstrom，1984.)。抑制沙门氏菌，包括肠炎、鼠肠炎沙门氏菌(typhimurium)、鸡白痢(Audisioetal.，1999;Carinaetal.，2000;Maiaetal.，2001;RoachandTannock，1980)和李斯特菌属(Audisioetal.，1999and2001)。预防由抗生素诱发的腹泻或减少持续时间(Bergogre-Berezin，2000;Elmer，2001;Marteauetal.，2001)。抗菌物质(细菌素和乳酸)的产物可以对抗肠道病原体。(Audisioetal.，1999and2001;Carinaetal.，2000)。人体的免疫束U激作用(Agerholm-Larsen，2000;Ferenciketal.，1999and2000)。增加胆盐以及在胃环境(酸性pH值)下的存活力(Canganellaetal.，1997;Nikoskelainenetal.，2000;Zacconietal.，1992)。寄居于肠道内(Nikoskelainenetal.，2000;Zacconietal.，1992)预防急性婴儿腹泻和其他腹泻疾病(Elmeretal.，1996)。治疗人类过敏性肠综合症(Gardineretal.，1999)。增强鸡盲肠蜂窝组织炎活性(Kumprechtetal.，1984)。降低人体胆固醇(Agerholm-Larsen，2000;deRoosandKatan，2000)andmice(Zacconietal.，1992)。益生菌宠物食品对宿主动物有益方面的某些途径-减少应激的影响-减轻腹泻和其他消化功能紊乱-提高免疫力，提高抗病能力-降低沙门氏菌含量-促进消化益生菌对宿主动物的益处的某些途径-减少应激性的影响-减轻腹泻和其他消化功能紊乱-提高免疫力，提高抗病能力-降低沙门氏菌含量-促进消化任何时间使用益生菌宠物食品都是没有害处的！使用普咯泰克斯(Protexin)益生菌没有任何限制，该产品可在生产的任何阶段食用。本发明涉及的所有微生物普遍存在于所有健康禽类和动物中，它们均获得GRAS(安全可靠)认证。普咯泰克斯(protexin)从未被发现有毒性。即使使用推荐剂量的100倍的水平也不会引发问题。普咯泰克斯(protexin)制备过程中的任意组分都不会引起剌激或过敏反应。它们符合食品规章，并获得美国食品药品管理局认证。由于本发明中的细菌(普咯泰克斯，protexin)在排泄物中是无活性的，因此在粪便中没有持续作用或者残留。普咯泰克斯(protexin)没有已知的产甲烷作用。普咯泰克斯(Protexin)是惰性物质，因此不会持续残留在环境中。普咯泰克斯(Protexin)对水生生物、土壤动物和陆生植物均无已知的不良作用。此外，普咯泰克斯(Protexin)具备许多优点-高安全性，无过剂量危险-增强动物天然防御机制并更有效的对抗机会的感染。-广泛类型条件下的高效性任何禽类和动物的消化道都寄居了数百万的微生物。当一个动物体健康和无病时，其体内大多数是有益微生物。然而，即使该动物个体是健康的，在此"健康"的肠内仍然存在可能引起疾病的病原菌。这些病原菌的浓度很低因此不会引发疾病，除非该动物体的健康和免疫状态受到侵袭。本发明和其他的益生菌都显示出能够激发或维持动物体或禽类较高免疫状态，并且会因此而帮助预防疾病在动物体内发生。而且，本发明中的益生微生物在肠内具有竞争性抑制潜在致病菌的作用。宠物食品中包含的普咯泰克斯(Protexin)中含有乳酸菌，它在肠内可产生乳酸，具有较低的pH值，低pH值是有益微生物生长的最适条件。该作用可以阻止大肠菌类如大肠埃希氏菌的群集生长，因为大肠杆菌偏好碱性pH值。大多数动物胃中是非常酸性的，低pH值是试图除去部分食物中传染的负荷的自然方式。但是，该过程并非完全有效，因为显然的事实是口腔/肠道途径是传染源进入身体的最常见的途径。本发明中的微生物为乳酸菌(LAB)。该菌由于其能够生产酸性的乳酸而得名。它保证了细菌在最适酸性环境中生长。通过创造该酸性环境，LAB可抑制如偏好更碱性pH值的大肠菌类如大肠杆菌的生长。普咯泰克斯(protexin)宠物食品含有数十亿的微生物，因此能够解决胃除菌的问题，这样就可以解决幽门的问题并且能够寄居在肠内。而且，冻干和真空包被过程(vac皿mcoatingprocess)解决了本发明中微生物保存的问题，该包覆能够抵御胃酸。该宠物食品中包含的微生物菌株是在严格控制的条件下进行发酵的。每一菌株都有适合其生长需要的特定参数，如所用的培养基、pH值、氧气含量、温度等。这些参数由计算机和取样来控制。此外，全部生产制备过程都执行污染物监测。宠物食品中微生物菌株的选择需特别注意，这与抵抗胆汁、酶和酸性的作用有关。这些作用会严重影响生存能力。在有害环境条件中保护微生物，不论在细菌的生产过程中和生产之后都是很重要的。在冻干之前应用抗冻剂。这可另外防御水分、氧气和热，并且可充分延长成品的保存期。因此应用真空包被技术，对于维持终产物的稳定性是非常重要的。在过去的三年中，益生菌国际有限公司(ProbioticsInternationalLtd)在伯明翰大学开展研究改良了微生物的保护方法。尽管这项工作已经应用于实践，但是在未来的研究结果出现之前，该工作仍需要接受检验。此方法描述了通过表面接种技术来计算链球菌和肠球菌。此方法适用于粉末状、丸状和油基(包括糊状)食品的补充物，如益生菌。本试验的目的，在试验条件下，被定义为典型菌落的链球菌(包括肠球菌)是革兰氏阳性菌，并在过氧化氢酶试验中呈阴性反应。仪器-量程为0.02mL的自动移液器-灭菌玻璃珠-培养箱，温度设置为30±rC(或37+/-1"，或22+/-11:)-显微镜-量程为20iiL、1.0mL和9.0mL的移液管，带灭菌枪头/吸量管-标准琼脂平板法(平板计数)(SMA)-带盖的灭菌试管-灭菌广口瓶，带螺旋盖容器-匀质机和灭菌匀质袋-配平装置，灵敏度O.Olg-旋涡混合器培养基和试剂:7[O103]-2%(w/v)柠檬酸钠水溶液(乳制品专用)_3%过氧化氢溶液-血琼脂平板(BA)-十四酸异丙酯(异丙基十四酸酯)-KF链球菌平板(KF)-最大恢复稀释剂(MRD)-含有O.1%蛋白胨，0.85%氯化钠方法:准备1/10样本的组织匀浆并进行10倍梯度稀释，如下述方法A:la和A:lb所示。从最高稀释度开始，以每个稀释度0.02个体积涂布在KF平板和BA平板的适当标记区域上(参见A:2c)。待接种物干燥后，将平板倒置，于37t:温箱中培养48+/_2h。48h后检查平板并进行菌落计数。大多数链球菌是分散的小菌落，在血琼脂中呈灰色或白色菌落。肠球菌在KF链球菌琼脂中呈栗色/深粉红色，培养l天后形成。与肠球菌不同，链球菌在血琼脂上生长，而在KF琼脂上不长。在培养后期在两种培养基上进行链球菌和肠球菌的菌落计数，并作记录。要进行菌落表型判定和必要时通过革兰氏染色来鉴定链球菌的存在。再经过氧化氢酶试验进一步鉴定，革兰氏阳性球菌会在过氧化氢酶试验中呈阴性反应，即是链球菌/肠球菌。雌为获得每克的计数，数出的菌落总数乘以5个证实为链球菌(肠球菌)的菌落区段，再除以稀释度。若使用了表面悬滴平板法，则用上述A:2c中的方法从确定的菌落数，计算每克的数量。报告每克(或者每毫升)样品中链球菌(肠球菌)的数量。若该数值低于IOO，则近似记录为5。若该值是10或更大，则以二位有效数字即小数点前后各一位数字，乘以10的幂来记录。如果在10—1稀释度没有菌落，则记录为细菌总数(TVC)<2.5X107g。检测限度2.5X107g方法A:la匀浆样品的制备此方法描述了样品用以生产匀浆的制备方法，适宜用作列举的目的。该匀浆可用来制备进一步的稀释液。样品的准备和初始稀释度要根据待测样品的性质不同以及每个个体的诊断记录不同而有所变化。一般在无菌操作下精确称取10-25g样品，经过充分均匀稀释至任何一个1/10浓度。粉末和丸剂的制备1.在进入试验阶段前，如果可能的话在其容器中将样品充分震荡或混合。2.无菌条件下准确称量至少10g样品置于配衡匀质袋中。3.加入约2倍重量的十四酸异丙酯。4.加入9倍样品重量的最大恢复稀释剂(MRD)，配制浓度为1/10的溶液。记录样品加溶剂后的总重量，其重量应该是样品重量的10倍±5%，例如，样品重量为10.5g，则最终重量应该是105mL士5X或在100.3-110.2mL之间。5.均质化前再水化30分钟。6.将袋放入震荡机中处理1-2分钟。7.转移至无菌带盖广口瓶中。8.取10—1匀浆进一步10倍稀释。制备10—1匀浆与培养基接种间的时间间隔应不超过45分钟。方法A:lb十倍稀释液的制备由10—1匀浆制备的所有稀释液都要在匀浆制备后的15分钟内完成。所研究的样品的性质决定所需的稀释数量，以便得到每克的细胞总数。述1.在灭菌试管中，使用MRD为每份样品制备若干份9士0.lml空白稀释液。2.将这些试管使用样品实验室编号做好标记并识别这些稀释的试管。3.通过旋涡振荡使样品匀浆混匀，在除去等分试样之前让较大颗粒充分沉淀。若存在油脂层，则从水层取等分试样。4.制备样品匀浆与生长介质接种间的时间间隔应不超过45分钟。由1/10匀浆中稀释(i)将l/10匀浆lmL加到最初的9mL空白稀释液中，盖好试管塞。(ii)涡旋来混合内容物。该试管形成10—2稀释液。(iii)每次使用新吸头，重复此过程以得到进一步的10倍稀释液。方法A:2c好氧菌平板计数——表面悬滴法此法描述了通过表面点滴技术计算好氧嗜热微生物。此法描述了在30°C培养微生物，但可以应用于其他温度如22°C，37°C。表面计数法优先选择倾注培养法以获得专性厌氧微生物的最大回收率，并且在倾注培养法中可避免由热所引起的琼脂融化的可能。点滴平板法可将由于操作者操作疲劳所引起的计数误差降到最低，也减少了由芽孢杆菌株在涂布过程中产生问题，并且促进了菌落和食物颗粒间的分化。然而，由于使用的样品稀释液的体积较小，此法最适用于微生物含量超过3000CFU每克的机体。^￡1.按上述方法A:la和A:lb中所述，将样品匀浆并进行进一步的IO倍梯度稀释。2.在平板底部使用实验室样品编号做好标记。将平板进行分区(每个平板最多分四个区)，并用所用的稀释液标记区段。使用SMA平板。3.在制备样品匀浆的45分钟内，接种平板培养基。使用带有灭菌吸头的20iiL移液器，采取反向移液技术进行操作。从最高稀释度开始，在平板上相对应的区域每个稀释度接种2滴。从下一个最低稀释度开始，重复操作直至所有稀释液都接种于平板上。4.若计数结果较低，则可用5或10滴的食物匀浆(10—1稀释度)或将液态样品涂布在半个或整个平板上，以降低检测限。5.盖上盖子，使液滴在室温下干燥。6.将平板倒置，于3(TC温箱中培养72+/_3h(或根据客户需要选择22。C培养72+/-311、371:下培养24+/-2h或48。C培养+/_2h)。7.在培养结束阶段，在具有可数菌落的所有稀释度进行菌落的计数和标记。记录该计数。每滴菌液中的菌落总数通常会少于20个，但对于一些形成小菌落的微生物，会可能容易数出更多菌落数(例如乳酸菌)。翻湿飾表汰如果仅有一个稀释度可数出菌落，则每克菌落数由以下公式给出N二平均每滴的菌落个数Xl/dX50其中，N二菌落个数/gd=稀释度如果两个连续的稀释度可数出2个或更多菌落，则应用加权平均值公式得出每克的菌落个数。包括所有已选稀释度的所有滴数的计数，无菌落的滴也要计数。(v,+0.1v2)d其中，EC=所有菌滴中菌落的总数VI=第一个稀释度菌滴的总体积V2=第二个稀释度菌滴的总体积d=得到第一个计数的稀释度注意事项存在抑制作用的证据，仅最高稀释度的菌落数每滴产生2个或更多的菌落。记录用两位有效数字对每克或每毫升样品的菌落数进行记录。同时，记录本试验的实验条件，例如3(TC/72小时。4舍5入保留两位有效数字。若结果大于IOO，记录该数为10的幂，小数点两边各一位数字。如果样品的最小稀释度也没有出现菌落，则记录为少于每克或每毫升的最低检出如果最大稀释度的菌落太多，记录该数值作为比可计算菌落值更大的适宜的10的乘方。注意事项给出所列计数中的范围对于克服是有帮助的。检测限10—'用2滴2.5X107g或mL10—'用5滴1.0X107g或mL10—1用10滴50/g或mLA:16a链球菌和肠球菌的计数方法由ProbioticsInternational,MattsLane，StokesubHamdon，Somerset,TA146QE制备所有试验均由Microcheck技术服务有限公司实验室完成，lOSandownCentre，WhiteHorseBusinessPark,Trowbridge,WiltshireBA14OXD。参考文献:BS4285:牛奶的微生物检验。倾注培养法用于菌落计数。第2.1节，BSI，1989年。BS5763:食品和动物饲料的微生物检验。在3(TC下的菌落计数(平板划线技术)。第5章，BSI，1981。BS5763:食品和动物饲料微生物检验。制备稀释液。第6章，1983。BSENISO6887-1:食品和动物饲料微生物——试验样品的制备，初始悬浮液和IO倍稀释液的制备。初始悬浮液和梯度稀释液制备的一般规则。(ISO),1999年。实用性食品微生物。101页，5.6节，公共卫生服务，D.Roberts,W.Hooper和M.Greenwood,1995年。食品微生物，1.计数的意义和方法，ICMFS，伦敦，多伦多出版社，第2版，1988年.ISO8261:牛奶和乳制品——微生物检验样品和稀释液的制备。国际标准化组织(IS)，2001年。
发明内容该宠物食品有益于消化道环境的改善和宠物免疫系统的全面发展。该有益效果在于用真空包被技术将诸如商标名为Protexin的有益细菌以及益生菌包含于宠物食品中。—般来说，益生菌是一种含有潜在有益菌的饲料补充物。本文中的术语鱼油包括鲭鱼、灰鳟鱼、青鱼、沙丁鱼、三文鱼和长鳍金枪鱼的鱼油。益生菌培养物是用来帮助在机体消化道内自然产生的菌群的自我重建。因此有益于动物健康，帮助治疗消化问题。通过肠内微菌群的繁殖和栖息来建立和强化免疫系统，从而促进食物吸收效率和竞争性消除有害菌。它通过与细菌竞争粘附位点和底物的方式起作用。正常肠道菌群可被以下几种途径破坏胃肠疾病、抗生素治疗、饮食改变、饮食不当、运送、衰老、紧张等等。益生菌可提高宿主的免疫力，是由于它可促进细胞生长，增强噬菌细胞活性，增加抗体的产生，提高Y干扰素的水平。本发明中使用的益生菌和最小用量如下。益生菌菌株依据欧洲共同体规则ECNo.183/2003规则被分类为食品添加剂。鹏已注册的犬使用的益生菌菌株屎肠球菌NCMB10415ECNo.13首次注册日期7/11/05最小CFU/Kg全价饲料1.0X109最小CFU/Kg全价饲料1.0Xl(T已注册的兔使用的益生菌菌株酿酒酵母NCYCSC47ECE1702首次注册日期7/11/05最小CFU/Kg全部饲料2.5X109最小CFU/Kg全部饲料7.5Xl(T本发明将使用目前市售的益生菌以及，特别是，将要面市的Protexin(ProbioticsInternational)。没有注册的菌株益生菌是一类功能性食品，定义为食品中不可消化的组分，其通过选择性剌激结肠内一种或有限几种细菌的生长和/或活性而对宿主产生有益作用，最终增强宿主健康状态(GibsonandRoberfroid，1995)。本发明还包括用于将微生物菌包含在产物的每个粗颗粒(kibble)中的特定技术。来自联合宠物食品公司(比利时)的生产设备的真空多包被技术是一种能够包住有益的油脂、粉末、香味剂和满足终产物所需的其他组分的方法。由于需要保护细菌免受潮湿、热和日光照射，生产方法将包括冻干细菌并将其与油脂以所需浓度混合。当进行不断搅拌时，油脂需要变成液体以进行真空包被。这个过程通过加热油脂至细菌可耐受的一定温度来完成。该油脂将真空包被于粗粒上，这样就将细菌置于粗颗粒结构(kibblestructure)中。通过这种方式使细菌得到了保护，并且具有很大的生存和复苏的潜力。本发明中的宠物食品可以只以干燥的形式存在，因为这是维持细菌稳定性的基本因素。然而，该宠物食品可基于任何普通的宠物食品及其组分，只要其中包含的益生菌是稳定的。这些组分可以包括-粗蛋白-粗脂肪-NFE-碳水化合物(无氮提取物)-粗纤维-灰分和矿物质-维生素-所有其他用于市售宠物食品的有益成分。提供这些成分的一般组分是家禽肉、动物肉、鱼、有益油脂、米、谷物、动物油脂、海盐、完整蛋、玉米和所有其他有益的且常用于宠物食品的无害组分。总之，本发明联合了上述的特殊组分(Protexin益生菌)和上述所用的技术(真空包被技术)。发明详述本发明中的术语宠物包括狗、猫、兔、其他啮齿类和马。其中包括这些动物的所有年龄和品种在内。Protexin-本发明中所用的益生菌产品的品牌，其中使用了特有的制备方法。商标持有者为ProbioticsInternationalLtd，产品可从该公司获得。Protexin为高浓度的益生菌，它包含数百万有益微生物，这些微生物在所有健康禽类和动物肠内天然存在。这些微生物在未成熟的肠中进行定殖或重建紊乱的肠，从而增强对潜在病原菌的竞争性排斥的机制。本发明中使用的益生菌及其最小含有率如下益生菌依据欧洲共同体规则ECNo.183/2003分类为食品添加剂。鹏已注册的狗使用的益生菌屎肠球菌NCMB10415ECNo.13首次注册日期2005年7月11日最小CFU/Kg全部饲料1.0X109最小CFU/Kg全部饲料1.0Xl(T兔粮已注册的兔使用的益生菌酿酒酵母NCYCSC47ECE1702首次注册日期2005年7月11日最小CFU/Kg全部饲料2.5X109最小CFU/Kg全部饲料7.5Xl(T益生菌是一类功能性食品，定义为不可消化的食物组分，它可通过选择性剌激结肠内的一种或有限几种微生物的生长和/或活性达到对宿主的有益作用，从而提高宿主健康水平(GibsonandRoberfroid，1995)。本发明中的宠物食品可以仅以干燥形式存在，因为这是维持细菌稳定性的基本因素。然而，该宠物食品可基于任何传统宠物食品及其组分，只要其中包含的益生菌稳定即可。来自联合宠物食品公司的生产设备的真空多包被技术是一种能够装入有益的油酯、粉末剂、香味剂、和终产物所需的任何其他组分的方法。由于需要保护微生物免受潮湿、热和日光照射，因此从开始到结束的全部制备过程要在密封环境下进行。制备方法包括将冻干的细菌和鱼油以一定浓度进行混合。当进行不断搅拌，油脂需要形成液体用于真空包被。该过程需要将油脂保温于20°C_251:下完成，最佳温度为22°C，其仍然为细菌能够耐受的温度。将该油脂真空包被在粗颗粒上，从而将细菌置于粗粒结构(kibblestructure)中。这样使细菌得以保护并有较大的生存和复苏的潜力。本发明中的益生菌——屎肠球菌来自于国际认可的培养物保藏机构NCIMB(NationalCollectionsofIndustrialandMarineBacteria)。该菌株培养于5000L容积的发酵罐。接下来，在将其与宠物食品和Protexin浓縮物的其他组分以准确的浓度进行调和之前，使用抗冻剂进行保护并冷冻制成冻干粉。本发明中包含的微生物为乳酸菌(LAB)。该菌由于其能够生产酸性的乳酸而得名。它保证了细菌在最佳的酸性环境中生长。通过创造该酸性环境，LAB可抑制如偏好更碱性pH值的大肠杆菌类微生物如E.coli的生长。在细菌生产中和生产后，保护微生物远离不利的环境条件是重要的。在冻干前要使用抗冻剂保护。它可以帮助保护细菌避免潮湿、氧气和热，并实质上延长了成品的贮存期。因此采用真空包被技术可以保持最终产品的稳定性。本发明中相应的宠物食品参考附图描述如下图1描述了产品的稳定性存活力试验产物稳定性试验通过活菌计数法(TVC)给出每克产物中的菌落形成单位(CFU)的总数，试验条件如下-冷藏(6-8°C)-室温(21+/_3°C)13-力口速温度(acceleratedtemperature)(37+/_l°C)另外还要记录相对湿度。例如區实验室的相对湿度如下-冷藏39^RH_室温52%朋-力口速温度(acceleratedtemperature)54%RH样品详沭每月测试需要40克密封入最终产品包装形式(例如胶囊袋)的产品进行如下检<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>在加速温度的条件下，一个月加速稳定性的结果等于4个月的实时稳定性。活菌计数每月要进行四次(结果取平均值)，每次使用附件的方法或与其相似的方法。(用十四酸做稀释剂是重要的，以确保包含在颗粒中油组分内的微生物在样品终产品中是充分"溶解"的)。附加细节——试验的细节需做如下详细记录-产物封装-贮存条件冷藏(6-8°C)-室温21+/-1"-加速温度，37+/-1"_月份冷藏24个月-室温-24个月-加速试验_12个月-所有需要的项目(包括微生物学分析、表型、物理性质)实施例1:过程描述真空芯核液体包被是一种用于使微生物包含于颗粒/孔状结构中的过程。制备过程在密闭环境中进行。首先，未包被的产品从45-6(TC(根据由挤出机读取的数据)的干燥机(2层垂直干燥系统)中取出。然后将未包被的产品放入真空包被机的圆筒内，密封包被机，且开始移动(内部为一个标准大气压)产品，并抽真空。在真空液体包被的过程中，在真空条件下(0.5大气压)将油脂蒸发到产品上。此过程的温度需保持在2025t:，最佳温度为22t:，并在容器中保持22t:。包被机内部恢复为常压条件(l大气压)。在新的真空条件下(0.7大气压)将混合有益生菌组分(屎肠球菌或其他)的鱼油喷雾于产品上。包被机内部恢复为常压条件(1大气压)。在最后一个真空条件(0.8大气压)下将消化液(digest)喷雾于产品上。包被机内部恢复为常压条件(l大气压)。最后，打开包被机且将产物放入冷却器中。本发明的主旨并不局限于上述实施例,权利要求宠物食品，其包含传统宠物食品的主要成分以及微生物和油的混合物，其中用活微生物和鱼油的所述混合物真空包被宠物食品的所述主要成分。2.根据权利要求1所述的宠物食品，其中，包含在所述混合物中的活微生物是冷冻干燥后的益生菌微生物。3.根据权利要求2所述的宠物食品，其中，所述益生菌微生物是屎肠球菌、或酿酒酵母或者以相同目的开发的类似益生菌微生物。4.根据权利要求3所述的宠物食品，其中，全部饲料中屎肠球菌的最小用量为1.OX107CFU/Kg1.OX10"CFU/Kg，优选为1.0X109CFU/Kg1.0X10"CFU/Kg。5.根据权利要求3所述的宠物食品，其中，全部饲料中酿酒酵母的最小用量为2.5X107CFU/Kg7.5X1014CFU/Kg，优选为2.5X109CFU/Kg7.5X10"CFU/Kg。6.根据权利要求l所述的宠物食品，其中，所述鱼油选自以下油鲭鱼油、灰鳟鱼油、青鱼油、沙丁鱼油、三文鱼油或长鳍金枪鱼油。7.根据权利要求1和6所述的宠物食品，其中，将鱼油加热到20°C25°C的温度，优选加热至22t:的温度。8.根据权利要求l所述的宠物食品，其中，制备过程是在l巴以下的压力下的密闭环境中进行的。9.制备权利要求1-8中任一项所述的宠物食品的方法，该方法包括以下步骤_将益生菌微生物和鱼油混合；-使用真空包被方法，用所述微生物和鱼油的混合物包被传统宠物食品的主要成分。10.根据权利要求9所述的方法，其中，在混合之前将鱼油加热到20°C25t:的温度，优选加热到至少22t:的温度。11.根据权利要求9所述的方法，其中，所述包被是在1巴以下的压力下的密闭环境中进行的。全文摘要宠物食品包含传统宠物食品的主要成分以及微生物和油的混合物。用所述混合物真空包被宠物食品的主要成分。包含于所述混合物中的具活的微生物是冷冻干燥的益生菌微生物。制备宠物食品的方法包含以下步骤将益生菌微生物和鱼油混合，以及将该混合物真空包被于传统宠物食品上。该宠物食品的加工工艺是在1巴以下的压力下的密闭环境中进行的。文档编号A23K1/00GK101730478SQ200780052650公开日2010年6月9日申请日期2007年7月13日优先权日2007年2月21日发明者维根塔斯·基雷耶瓦斯申请人:巴科特菲尔德国际股份公司