专利名称：常见滩涂贝类育成杂交方法
技术领域：
本发明涉及一种海洋贝类遗传育种技术，具体的说是选用两个具有较大遗 传差异地理群体的常见滩涂贝类进行育成杂交的方法。
背景技术：
杂交育种是培育新品种的主要途径。通过选用具有优良性状的品种、品系、 群体以及个体进行杂交，繁殖出符合育种要求的杂种群，对生产具有重要的指 导和实践意义。杂交可以使双亲的基因重新组合，形成各种不同的类型，为选
择提供丰富的材料；基因重组可以将双亲控制不同性状的优良基因结合于一体， 或将双亲中控制同一性状的不同微效基因积累起来，产生在各该性状上超过亲 本的类型。
育成杂交包括简单育成杂交、引入育成杂交、级进育成杂交等。简单育成 杂交是根据当地、当时的自然条件、生产需要以及原地方品种品质等客观因素 确定育种目标，应用相应的不同品种(品系、群体)使它们各参加杂交一次， 并结合定向选育，将不同品种的优点，综合到新品种的一种杂交育种的方法。 引入育成杂交是引入一个相应的改良品种(品系、群体)与当地被改良品种进 行杂交，获得级进第一代杂交种(FJ。然后将此杂交种再与引进品种回交，以 获得在生产性能上显着地向改良品种方面发展，并适当保留引入品种的某些优 点。级进育成杂交与引入育成杂交相反，是以杂交种R再与当地优良品种(品 系、群体)回交，如此各代杂种连续与当地优良品种回交若干代，并结合定向 培育，以获得在生产性能上显著地向改良品种方面发展，并适当保留本地品种 原有的某些优点。
目前，对水产动物的杂交主要集中在简单育成杂交上，因为该法简便，易 于见到杂交效果，但是杂交子代具有杂种优势衰退、性状分离的现象。中国发 明专利号为CN101147473的发明公开了刺参级进杂交育种方法。该方法虽然改 良了刺参的品质，提高了生长、存活及相关的抗逆性状。但是，与本发明相比， 该发明育成杂交方法单一、杂交种后代(〉F2)仍会发生杂种优势衰退、性状分 离的不足。
发明内容
本发明旨在解决当前滩涂贝类存在的种质抗逆性差，生长速度慢等问题。 通过两个差异较大地理群体滩涂贝类相互关联的三种育成杂交方法，有效地增 强了常见滩涂贝类对温度、盐度等环境因子剧变的抵抗能力，使其生长、存活 性状得到改良，并能够使杂交种一直保持杂种优势；完善了育成杂交的在贝类 应用上的育种方法，有效地防止杂交子代杂种优势衰退现象的发生；为滩涂贝 类高产、抗逆品种开发奠定了坚实的基础。
本发明采集A、 B两个不同地理群体的滩涂贝类亲本，逐步进行简单育成杂 交、引入育成杂交、级进育成杂交、亲本回交，使杂交子代一直保持其杂种优 势。其具体工艺过程包括以下歩骤
第一歩、采集A、 B两个不同地理群体的滩涂贝类亲本，选择2龄健康无损 的个体为亲本，其中A群体为土著种，B群体为引入种。
第二步、将采集的亲本放置于虾池屮进行生态促熟，经过6 12个月的底播 养殖，于第2年性腺同步成熟。
第三步、采用直径为0.6mm的电钻进行亲本性别鉴定，鉴别后，通过阴干、 流水刺激，使亲本同步产卵排精，然后按照A群体亲本XB群体亲本的方式进 行群体正反杂交，得到简单育成杂交的子一代(FAB)。
第四步、按照三段法在生态虾池中进行简单育成杂交子一代的养成，养成 周期》1年，于第3年或第4年的秋季，杂交子一代与亲本性腺同步成熟。
第五步、杂交子一代(FAB) XB群体亲本进行引入育成杂交；杂交子一代 (Fab) XA群体进行级进育成杂交，得到两个不同组合的育成杂交子一代，三 段法养成。
第六步、重复第五步，将育成杂交子一代继续与亲本回交。 本发明适用于各种不同地理群体同种贝类亲本之间的杂交，适用于菲律宾 蛤仔、中国蛤蜊、四角蛤蜊、青蛤、文蛤、绎蛏、泥蚶等常见的滩涂贝类。
本发明对亲本采用生态促熟法，克服了不同地理群体间的地理隔离，性成 熟和繁殖等生理差异，促使性腺同步发育精卵同步排放。本发明采用了逐步进 行简单育成杂交、引进育成杂交、级进育成杂交等杂交方式，促使杂交子代始 终保持杂种优势，防止杂交种发生子代衰退，其杂合度不断得到加强。由于每
次杂交都采用lH反杂交，所以能够更加充分的利用亲本效应，从中得到的最有 效的育成杂交子代。与现有养殖的滩涂贝类品种相比，本发明有效增强了滩涂 贝类对温度、盐度等环境因子剧变的抵抗能力，使其生长、存活性状得到改良， 为滩涂贝类高产、抗逆良种开发奠定了基础。
具体实施例方式
下面以不同地理群体菲律宾蛤仔为实施例，进一步说明本发明，但不构成 对本发明的限制。 实施例1
第一步、采集大连群体和莆田群体的菲律宾蛤仔亲本于2003年9月，选 择2龄健康无损的大连群体和莆田群体的菲律宾蛤仔亲本。其中，中国莆田群 体生长快，壳薄，抗热能力强；大连群体个体大小适中，壳厚，抗寒能力强。
第二歩、两个地理群体菲律宾蛤仔亲本的生态促熟将采集的亲本放置于 虾池中进行生态促熟，经过12个月的底播养殖，于第2004年9月，性腺同步 成熟。
第三步、两个理群体间的简单育成杂交采用直径为0.6mm的电钻进行亲 本性別鉴定，鉴别后,通过阴干、流水刺激，亲本可以同步产卵排精；然后按照 大连群体x莆田群体的方式进行群体正反杂交，得到简单育成杂交的子一代。
第四步、三段法养成简单育成杂交子一代按照的三段法在生态虾池中进 行简单育成杂交子一代的养成，养成周期》1年。于2005年的秋季，杂交子一 代与亲本性腺同步成熟。
第五步、引入育成杂交与级进育成杂交同第二步，进行杂交子一代x莆田 群体进行引入育成杂交；杂交子一代x大连群体进行级进育成杂交，得到两个不 同组合的育成杂交子一代，三段法养成。
第六步、重复第五步，于2006年秋季，将引入育成杂交子代与莆田群体亲 本回交；级进杂交子代与大连群体亲本回交，得到了回交子代。
经过上述方法得到的回交子代，其生长速度提高了40 60%，存活率提高了 60~80%。
实施例2
第一步、采集中国广西群体和日本东京群体的菲律宾蛤仔亲本于2004年
9月，选择2龄健康无损的中国广西群体和日本东京群体的菲律宾蛤仔亲本。其 中，中国广西群体个体大，壳薄，抗热能力强；日本东京群体个体大小适中， 壳厚，抗寒能力强。
第二步、两个地理群体菲律宾蛤仔亲本的生态促熟将采集的亲木放置于 虾池中进行生态促熟，经过12个月的底播养殖，于第2005年9月，性腺同步成熟。
第三步、两个理群体间的简单育成杂交采用直径为0.6mm的电钻进行亲 本性别鉴定，鉴别后,通过阴干、流水刺激，亲本可以同步产卵排精；然后按照 中国广西群体x日本东京群体的方式进行群体正反杂交，得到简单育成杂交的子一代。
第四步、三段法养成简单育成杂交子一代按照的三段法在生态虾池中进 行简单育成杂交子一代的养成，养成周期》1年。于2006年的秋季，杂交子一 代与亲本性腺同步成熟。
第五步、引入育成杂交与级进育成杂交同第三步，进行杂交子一代x日木 东京群体进行引入育成杂交；杂交子一代x中国广西群体进行级进育成杂交，得 到两个不同组合的育成杂交子一代(Fabxb、 Fabxa)，三段法养成。
第六步、重复第五步，于2007年秋季，将引入育成杂交子代与日本东京群 体亲本回交；级进杂交子代与中国广西群体亲本回交，得到了回交子代。
经过上述方法得到的回交子代，其生长速度提高了 90 150%，存活率提高 了卯 120%。
实施例3
第一步、采集中国莆田群体和日本东京群体的菲律宾蛤仔亲本于2005年 9月，选择2龄健康无损的中国莆田群体和日本东京群体的菲律宾蛤仔亲本。其
中，中国莆田群体生长快，壳薄，抗热能力强；日本东京群体个体大小适中， 壳厚，抗寒能力强。
第二步、两个地理群体菲律宾蛤仔亲本的生态促熟将采集的亲本放置于 虾池中进行生态促熟，经过12个月的底播养殖，于第2006年9月，性腺同步 成熟。
第三步、两个理群体间的简单育成杂交采用直径为0.6mm的电钻进行亲
本性别鉴定，鉴别后，通过阴干、流水刺激，亲本可以同步产卵排精；然后按照 中国莆田群体x日本东京群体的方式进行群体正反杂交，得到简单育成杂交的子 一代。
第四步、三段法养成简单育成杂交子一代按照的三段法在生态虾池屮进 行简单育成杂交子一代的养成，养成周期^1年。于第2007年的秋季，杂交子 一代与亲本性腺同步成熟。
第五步、引入育成杂交与级进育成杂交同第三步，进行杂交子一代x日本 东京群体进行引入育成杂交；杂交子一代x中国莆田群体进行级进育成杂交，得 到两个不同组合的育成杂交子一代，三段法养成。
经过上述方法得到的引入育成杂交子代，其生长速度提高了 30~50%，存活 率提高了 50~70%;级进杂交子代，其生长速度提高了 40 60%，存活率提高了 60~80%。
实施例4
第一步、采集中国莆田群体和韩国釜山群体的菲律宾蛤仔亲本于2005年 9月，选择2龄健康无损的中国莆田群体和韩国釜山群体的菲律宾蛤仔亲本。其
中，中国莆田群体生长快，壳薄，抗热能力强；韩国釜山群体个体大小适中，
壳厚，抗寒能力强。
第—步、两个地理群体菲律宾蛤仔亲本的生态促熟将采集的亲本放置于
虾池中进行生态促熟，经过12个月的底播养殖，于第2006年9月，性腺同步 成熟。
第三步、两个理群体间的简单育成杂交采用直径为0.6mm的电钻进行亲 本性别鉴定，鉴别后，通过阴干、流水刺激，亲本可以同步产卵排精；然后按照 中国莆田群体x韩国釜山群体的方式进行群体正反杂交，得到简单育成杂交的子一代。
第四歩、三段法养成简单育成杂交子一代按照的三段法在生态虾池中进 行简单育成杂交子一代的养成，养成周期》1年。于第2007年的秋季，杂交子 一代与亲本性腺同步成熟。
第五步、引入育成杂交与级进育成杂交同第三步，进行杂交子一代x韩国 釜山群体进行引入育成杂交；杂交子一代x中国莆田群体进行级进育成杂交，得
到两个不同组合的育成杂交子一代，三段法养成。
经过上述方法得到的引入育成杂交子代，其生长速度提高了30~40%，存活 率提高了 20 30%;级进杂交子代，其生长速度提高了 20~30%，存活率提高了 30 40%。
权利要求
1、一种常见滩涂贝类育成杂交方法，其特征在于，采集A、B两个不同地理群体的滩涂贝类亲本，逐步进行简单育成杂交、引入育成杂交、级进育成杂交、亲本回交，其具体工艺过程包括以下步骤第一步、采集A、B两个不同地理群体的滩涂贝类亲本，选择2龄健康无损的个体为亲本，其中A群体为土著种，B群体为引入种；第二步、将采集的亲本放置于虾池中进行生态促熟，经过6～12个月的底播养殖，于第2年性腺同步成熟；第三步、采用直径为0.6mm的电钻进行亲本性别鉴定，鉴别后，通过阴干、流水刺激，使亲本同步产卵排精，然后按照A群体亲本×B群体亲本的方式进行群体正反杂交，得到简单育成杂交的子一代(FAB)；第四步、按照三段法在生态虾池中进行简单育成杂交子一代的养成，养成周期≥1年，于第3年的秋季，杂交子一代与亲本性腺同步成熟；第五步、杂交子一代(FAB)×B群体亲本进行引入育成杂交，杂交子一代(FAB)×A群体进行级进育成杂交，得到两个不同组合的育成杂交子一代(FAB×B、FABxA)，三段法养成；第六步、重复第五步，将育成杂交子一代继续与亲本回交。
2、 根据权利要求1所述的一种常见滩涂贝类育成杂交方法，其特征在于第 四步杂交子一代在养成周期第4年的秋季，与亲本性腺同步成熟。
3、 根据权利要求l所述的一种常见滩涂贝类育成杂交方法，其特征在于适 用于各种不同地理群体同种贝类亲本之间的杂交。
4、 根据权利要求1所述的一种常见滩涂贝类育成杂交方法，其特征在于适 用的滩涂贝类包括菲律宾蛤仔、中国蛤蜊、四角蛤蜊、青蛤、文蛤、绎蛏、泥 甜。
全文摘要
常见滩涂贝类育成杂交方法，采集不同地理群体滩涂贝类的2龄亲本；经过生态促熟，促使性腺同步成熟；开展两个地理群体间的简单育成杂交；三段法养成简单育成杂交子一代；杂交子一代与引入群体进行引入育成杂交；杂交子一代与土著群体进行级进育成杂交，得到育成杂交子一代。在此基础上，重复以上步骤，将育成杂交子一代继续与亲本群体回交，使杂交子代一直保持其杂种优势。本发明操作简便，实用性高，有效地增强了滩涂贝类对温度、盐度等环境因子剧变的抵抗能力，使其生长、存活性状得到改良，并能够使杂交种一直保持杂种优势，为滩涂贝类高产、抗逆良种开发奠定了基础。
文档编号A01K61/00GK101361467SQ20081001342
公开日2009年2月11日 申请日期2008年9月25日 优先权日2008年9月25日
发明者洋 刘, 张国范, 张跃环, 凤 杨, 王金海, 闫喜武, 霍忠明 申请人:大连水产学院