专利名称：：具有抗炎、抗真菌活性的6H-硫色烯并[4,3-d][1,2,4]三氮唑并[1,5-a]嘧啶类化合物的制作方法
技术领域：
：本发明专利涉及含氮硫的杂环化合物，特别是涉及一种6H-硫色烯并[4,3-d][l，2，4]三氮唑并[l，5-a]嘧啶系列抗炎、抗真菌合成药物。
背景技术：
：真菌是一种与宿主细胞有相似结构和生理代谢过程的真核细胞生物，按照真菌引起的感染部位不同，分为浅部菌感染和深部菌感染。浅部真菌感染主要是由各种癣菌引起，如手足癣、头癣、体癣等，目前常以灰霉菌素、制霉菌素、酮康唑等作为治疗药物。深部真菌感染危害大，甚至危机生命，它主要由致病真菌引起，它包括白色念珠菌、新型隐球菌、曲霉菌、毛霉菌等，这些真菌属于正常机体内菌群成员，正常情况下不引起疾病，但是，长期大量使用广谱抗生素、激素和免疫抑制剂等可以导致发病。近年来，深部真菌感染的发病率有逐年上升的趋势。由于真菌的生物特性，一般抗真菌药物往往在破坏真菌细胞同时，又会损伤宿主细胞，再加上耐药菌株的不断出现，使得真菌感染疾病的治疗陷于两难之境。截至目前，可应用于临床的疗效好、毒副作用小、安全系数(safetyIndex,LD5/ED95)高的药物寥寥无几。两性霉素B和三唑类氟康唑类药物也因其毒副作用大而在应用方面受限。因此，开发和探求一种高效低毒、具有治疗预防双重功效的广谱和窄谱抗真菌活性的新化合物，成为当前一项具有重要意义的研究工作。
发明内容本发明的目的在于弥补上述现有技术中的不足之处，而提供合成方法简单、效果好的6H-硫色烯并[4,3-d][l，2,4]三氮哇并[l,5-a]嘧啶系列抗真菌合成药物。本发明目标物可以通过如下措施来达到抗炎、抗真菌6H-硫色烯并[4,3-d][l,2,4]三氮唑并[l,5-a]嘧啶类化合物，其特征在于用通式(I)、(II)表示化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中当R!、R2、R3中有一个或两个为H时，另外两个或一个分别为R产X(卤素取代基)、-OH、-OMe、-OEt、-Me、-Et、-NMe2、-NEt2、C3-do烃基或取代烃基R2=X(卤素取代基)、-OH、Me、-Et、-OMe、-OEt、-CF3、-NMe2、-NEt2、C3-Qo烃基或取代烃基R3=X(卤素取代基)、-OMe、-OEt、-Me、Et、-NMe2、-NEt2、C3-C10烃基或取代烃基R4=H、Q-Cu)的链烃或环烃、取代的d-do的链烃或环烃、苯基或取代苯基、杂芳环或取代杂芳环R5=H、-Me、-Et、CrCK)烃基或取代烃基卤素取代基是指氟、氯、溴、碘。6H-硫色烯并[4,3-d][l，2,4]三氮唑并[l，5-a]嘧啶类药物的合成方法如下在苯磺酰氯(或取代苯磺酰氯)中加入金属锌，然后向其中滴加4MH2S04，边滴加边搅拌，分离纯化得到苯硫酚(或取代苯硫酚)，再将该产物溶于2MNaOH溶液中(可加入适量的乙醇)。另将p-氯丙酸(或其甲基酯、乙基酯)溶于计算量的Na2C03溶液中，然后与上述溶液混合超声，回流6-8小时，除尽醇后抽滤，滤液用4MH2S04酸化，减压蒸馏，抽滤，水洗干燥，得卩-(取代苯硫)-丙酸，再用多聚磷酸(或浓硫酸)缩合，分离纯化得到取代塞克尔曼酮(Thiochromanone)粗品。在芳香醛(取代芳香醛)的乙醇和10%NaOH混合溶液中室温下滴加上述得到的取代塞克尔曼酮，加完后保持温度反应1小时，冷却抽滤，水洗，得取代亚甲基取代塞克尔,曼酮。得到的产品与3-氨基-l,2，4-三氮唑在DMF中分别加热2和10小时。反应2小时的反应体系中加入苯，析出固体过滤；将滤饼用苯和DMF重结晶，得到固体化合物I。反应10小时的体系加入甲醇析出固体过滤，收集滤饼得到固体化合物n。6H-硫色烯并[4，3-dl[l，2，41三氮唑并[l，5-al嘧啶类化合物的合成方法<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>第二步<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>Ri、R2、R3、R4、Rs定义同上。本发明相比现有技术具有如下优点6H-硫色烯并[4,3-d][l,2,4]三氮唑并[1,5-a]嘧啶类系列化合物是含有氮硫原子的杂环化合物，具有广泛生物活性。它不但对常见浅表真菌感染具有较好的抑制活性，而且对深部真菌具有良好的杀菌活性。本发明原料常见易得、合成方法简单、收率较高，有很好的研究价值和应用前景。具体实施例方式下面列举制备例和实施例，结合附表2对本发明加以进一步说明。制备例1附表2中化合物l苯硫酚的制备取0.2mol苯磺酰氯置于三颈瓶中，另称取27g金属锌粉加入，搅拌均匀，0°C冰水浴滴加4MH2S04，边滴加边搅拌，反应6-8小时后，过滤分离，洗漆，干燥，重结晶纯化。产率为89.8-92.1%,熔点为70/TC。若合成取代苯硫酚，可用取代苯磺酰氯合成，方法与上述步骤基本相同；例如卤代苯磺酰氯收率一般在77%-89%之间。制备例2附表2中化合物2[6-氟-塞克尔曼酮]的制备将上述制得的氟代苯硫酚50mmo1溶于2MNaOH溶液中(可加入适量的乙醇)。另将8.2g(3-氯丙酸(或10g其甲基酯)溶于计算量的N32C03溶液中，然后与上述溶液混合，超声，回流6-8小时，除尽醇后抽滤，滤液用4MH2S04。酸化搅拌-2小时后抽滤，水洗干燥，得(3-(取代苯硫)-丙酸，再用聚磷酸(或浓硫酸)縮合24小时，分离纯化得到6-氟-塞克尔曼酮。产率70-75%,熔点92-93°C。制备例3附表2化合物3[3-次苄基-6-氟-硫色满酮]在38mmol10%KOH溶液和7.4mL无水乙醇中，搅拌下加入30mmo16-氟-硫色满酮(3)，温度控制在22-30°C，加入30mmol苯甲醛，保持反应温度反应3.5h。反应液在冰箱中放置10h,冷至(TC，抽滤水洗至中性。用乙醇/水重结晶干燥得浅黄色3-次苄基-6-氟-硫色满酮，产率85-92%。实施例1氟代苯硫酚lOOmmol溶于2MNaOH溶液中(可加入适量的乙醇)。另将120mmo1p-氯丙酸(或120mmo1其甲基酯)溶于计算量的Na2C03溶液中，然后与上述溶液混合，超声，回流6-8小时，除尽醇后抽滤，滤液用4MH2S04.酸化搅拌1-2小时后抽滤，水洗千燥，得P-(取代苯硫)-丙酸，产率65-75%。取制备的3-(4-氟-苯巯基)-丙酸(2)13mmol溶解在20mL浓硫酸在室温下放置8h。反应液冰解，过滤，滤饼用5-10n/。NaHCO3溶液洗涤，洗至中性，抽滤干燥，得浅黄色固体6-氟-硫色满酮，产率80-85%。在38mmol10%KOH溶液和7.4mL无水乙醇中，搅拌下加入30mmol6-氟-硫色满酮(3)，温度控制在22-30'C，加入30mmo1苯甲醛，保持反应温度反应3.5h。反应液在冰箱中放置10h，冷至0'C，抽滤水洗至中性。用乙醇/水重结晶干燥得浅黄色3-次苄基-6-氟-硫色满酮，产率85-92%。6mmo13-次苄基-6-氟-硫色满酮和和7mmo13-氨基1,2,4-三氮唑在5mLDMF中加热回流2h，向反应液中加入适量苯，抽滤干燥，得到白色固体4。14的制备方法1:6mmo13-次苄基-6-氟-硫色满酮和和7mmo13-氨基1,2,4-三氮唑在5mLDMF中加热回流15h,，向反应液中加入适量甲醇，抽滤，得到的滤饼干燥，即白色固体5。14的制备方法2:向2mmo14的甲醇热悬浮液中，加入2.5mmolNBS加热回流2h，冷却反应液，旋走大部分反应液至有大量固体析出，加入少量DMF重结晶，过滤，得到的滤饼干燥，即白色固体14。其它化合物的制备同4和14。部分合成化合物的理化常数如下部分合成化合物的理化常数<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>抑菌试验本发明6H-硫色烯并[4，3-d][l，2，4]三氮唑并[l,5-a]嘧啶系列药物通过对10属、18种18株真菌，采用二倍浓度稀释法进行体外抑菌实验，结果见体外抑菌实验结果表。供试菌株白色念珠菌(C.albicas)、热带念珠菌(C.tropicalis)、啤酒酵母菌(C.cecerisiae)、新生隐球菌(C.neoformans)、絮状表皮癣菌(E.floccosum)、石膏样毛癣菌(T.gypsoum)、红色毛癣菌(T.vubrum)、断发毛癣菌(T.tonsurans)、石膏样小孢子菌(M.gypseum)、木霉菌(trichoderum)、黑曲霉菌(A.niger)、灰绿曲菌(A.glaucus)、普通青霉菌(P.commune)、裴氏瓶霉菌(P.pedrosoi)、卡氏枝孢霉菌(C.carionii)、紧密瓶霉菌(P.comaitum)、疣状瓶霉菌(P.verrcosa)和申克孢子丝菌(S.schenekn)。菌液配制将充分发育的供试菌种移至5mL无菌生理盐水内，捣碎后超声充分震荡，去除块状不溶物质，混匀，作为原菌液，测试时调整其浓度为106个细胞/mL后使用。供试化合物为附表2中的化合物4-14。实验方法供试化合物用适量二甲亚砜溶解，再用无菌蒸馏水稀释，加入灭过菌的1%(热)的葡萄糖蛋白陈琼脂培养基中，样品浓度为200，100，50，25,12.5,6.25,3.12,1.60mg/mL。接种供试菌以后，置恒温烘箱培养5-7日以无真菌生长的最高稀释浓度为最小抑菌浓度MIC。从实验结果可以看出，6H-硫色烯并[4,3-d][l,2,4]三氮唑并[l,5-a]嘧啶对真菌都有不同程度的抑制活性，其中一些化合物的抗真菌活性与对照品克霉哇相当；有些甚至优于克霉哇的抗真菌活性。总之，本发明涉及到的药物，都是以苯磺酰氯(或取代苯磺酰氯)作为原料合成出来的，合成反应过程中用到的各种化学试剂都是常见和简单易得的，反应的收率也比较理想。通过药理毒理学实验，表明系列化合物对真菌都有不向程度的抑制活性。本发明化合物广泛应用于抗真菌和植物病原体真菌领域，有广阔的研究价值和应用前景。<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>权利要求1.具有抗炎、抗真菌活性的6H-硫色烯并[4，3-d][1，2，4]三氮唑并[1，5-a]嘧啶类化合物；2.根据权利要求l，6H-硫色烯并[4,3-d][l，2，4]三氮唑并[1，5-a]嘧啶类化合物,其特征在于用通式(I)、(II)表示化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>其中当R"R2、R3中有一个或两个为H时，另外两个或一个分别为R产X(囟素取代基)、-OH、-OMe、-OEt、-Me、-Et、-NMe2、-NEt2、CVd。烃基或取代烃基R2=X(卣素取代基)、-OH、Me、-Et、-OMe、-OEt、-CF3、-NMe2、-NEt2、C3-do烃基或取代烃基R3=X(卤素取代基)、-OMe、-OEt、-Me、Et、-NMe2、-NEt2、C3-C10烃基或取代烃基R4=H、d-Cu)的链烃或环烃、有取代基的Ci-do的链烃或环烃、苯基或取代苯基、杂芳环或取代杂芳环R5=H、-Me、-Et、Crdo烃基或取代烃基卤素取代基是指氟、氯、溴、碘。3.根据权利要求l所述6H-硫色烯并[4,3-d][l,2，4]三氮唑并[l，5-a]嘧啶类化合物的制备工艺，其特征是它包括以下步骤.-①将上述制得的取代苯硫酚lOOmmoI溶于2MNaOH溶液中(可加入适量的乙醇)。另将120mmolp-氯丙酸(或120mmo1其甲基酯)溶于计算量的Na2C03溶液中，然后与上述溶液混合，超声，回流6-8小时，除尽醇后抽滤，滤液用4MH2S04酸化搅拌1-2小时后抽滤，水洗干燥，得p-(取代苯硫基)-丙酸，产率65-75%。②取制备的3-(取代苯巯基)-丙酸(2)13mmol溶解在20mL浓硫酸在室温下放置18h。反应液冰解，过滤，滤饼用5-10。/。NaHCO3溶液洗涤，洗至中性，抽滤干燥，得浅黄色固体取代硫色满酮，产率80-85%。③在38mmon0o/。KOH溶液和7.4tnL无水乙醇中，搅拌下加入30mmo1取代硫色满酮(3),温度控制在22-30°C，加入30mmol苯甲醛，保持反应温度反应3.5h。反应液在冰箱中放置10h，冷至0X:，抽滤水洗至中性。用乙醇/水重结晶干燥得浅黄色3-次苄基-取代硫色满酮，产率85-92%。④6mmo13-次苄基-取代硫色满酮和7mmo13-氨基1,2,4-三氮唑在5mLDMF中加热回流2h，向反应液中加入适量苯，抽滤干燥，得到白色固体取代7,12-二氢-6H-硫色烯并[4,3-d][l,2,4]三氮唑并[l,5-a]嘧啶。⑤6H-硫色烯并[4,3-d][l,2,4]三氮唑并[l,5-a]嘧啶的制备方法1:6mmo13-次苄基-取代硫色满酮和和7mmo13-氨基-l，2,4-三氮唑在5mLDMF中加热回流15h，向反应液中加入适量甲醇，抽滤，得到的滤饼干燥，即取代6H-硫色烯并[4,3-d][l,2,4]三氮唑并[l,5-a]嘧啶。6H-硫色烯并[4，3-d][l,2,4]三氮唑并[l,5-a]嘧啶的制备方法2:向2mmo14的甲醇热悬浮液中，加入2.5mmolNBS加热回流2h，冷却反应液，旋走大部分反应液至有大量固体析出，加入少量DMF重结晶，过滤，得到的滤饼干燥，即取代6H-硫色烯并[4，3-d][l,2，4]三氮唑并[l,5-a]嘧啶。4.根据权利要求l,6H-硫色烯并[4，3-d][l,2,4]三氮唑并[l,5-a]嘧啶类化合物的特征在于具有抗炎、抗真菌、抗植物病原体真菌活性。5.根据权利要求l，6H-硫色烯并[4,3-d][l，2,4]三氮唑并[l，5-a]嘧啶类化合物可用于抗炎、抗真菌、抗植物病原体真菌药物。全文摘要本发明公开了新的具有抗炎、抗真菌活性的含氮硫的并四环杂环化合物6H-硫色烯并[4，3-d][1，2，4]三氮唑并[1，5-a]嘧啶类化合物。针对现有技术中抗真菌药物少，毒性大的研发现状，本发明进行了新的6H-硫色烯并[4，3-d][1，2，4]三氮唑并[1，5-a]嘧啶类化合物的设计合成，并进行了抗真菌实验，实验结果表明这一类化合物具有好的抗真菌活性。本发明化合物合成方法简单，原料易得，合成方法详见说明书。本发明产品可用于抗炎、抗真菌、抗植物病原体真菌药物。文档编号A01P3/00GK101565424SQ20081009390公开日2009年10月28日申请日期2008年4月22日优先权日2008年4月22日发明者杨更亮,祝士国,马正月申请人:杨更亮