专利名称：外源脱落酸调控大豆籽粒粒重的微注射法的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种外源激素调控大豆籽粒粒重的微注射法。
背景技术：
国内外施用外源激素调控大豆产量的研究方法主要采取喷施的措施，是通过把外源激素喷施到叶片或花荚的方式进行。此方法尽管简便可行，但强烈地受到环境条件影响。如降雨、温度、湿度和风向的影响，常常导致喷施的外源激素损失，使得外源激素对大豆产生的效果不明显。同时，此方法还受到大豆生育期和体内代谢水平的影响，导致了大豆叶片或花荚对外源激素的不稳定吸收。
发明内容
本发明目的是为了解决现有喷施外源激素调控大豆产量的研究方法易受环境条件影响而造成外源激素损失，受到大豆生育期和体内代谢水平的影响使得外源激素的吸收不稳定的问题，而提供一种外源脱落酸调控大豆籽粒粒重的微注射法。
本发明外源脱落酸调控大豆籽粒粒重的微注射法按如下步骤进行 一、缓冲液的配置称取38~42克的磷酸二氢钾和1.2-1.8克的硼酸溶于1升纯净水中；二、脱落酸注射液的配制用万分之一天平精确称取脱落酸标样0.6-0.7毫克固体，置于刻度为lml的塑料EP管中，取缓冲液溶解固体并定容lml，用涡旋器摇匀；三、注射用微量注射器从装有含脱落酸注射液的EP管中抽取的脱落酸注射液，在大豆R5期选取大豆植株中上部节位具有三个籽粒的荚果，沿荚果背缝离背部维管束l-2mm处注入到第二粒种子的两片子叶中间，以同一荚果的第三粒种子作为对照，向其两片子叶中间注入15|il的缓冲液，处理5株，每株10个荚果。四、称粒重当大豆完全生理成熟时，收获处理过的荚，对注射过外源脱落酸的籽粒和对照籽粒分别进行称重。
本发明外源脱落酸调控大豆籽粒粒重的微注射法的采用避免了因降雨、温度、湿度和风向等外界环境的影响导致的外源脱落酸浓度显著下降，避免了外源脱落酸的损失，使得外源脱落酸对大豆产生的效果明显。运用微注射法使得大豆籽粒在脱落酸处理后出现粒重增加趋势，与对照(只注射了不含脱落酸的
等量缓冲液)相比，单粒增重28%。此方法不受外界环境如降水等的影响，外源脱落酸能够直接被籽粒所吸收，达到良好的外源脱落酸吸收效果。运用此方法把外源脱落酸直接引入大豆荚果内并产生直接作用，使得处理效果更加明显。此方法将对研究外源激素调控大豆粒重的生理生态过程和机理具有重要的理论和实践意义。
具体实施例方式
本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式
，还包括各具体实施方式
间的任意组合。
具体实施方式
一本实施方式外源脱落酸调控大豆籽粒粒重的微注射法按如下步骤进行 一、缓冲液的配置称取38 42克的磷酸二氢钾和1.2~1.8克的硼酸溶于l升纯净水中；二、脱落酸注射液的配制用万分之一天平精确称取脱落酸标样0.6 0.7毫克固体，置于刻度为lml的塑料EP管中，取缓冲液溶解固体并定容lml，用涡旋器摇匀；三、注射用微量注射器从装有含脱落酸注射液的EP管中抽取15W的脱落酸注射液，在大豆R5期选取大豆植株中上部节位具有三个籽粒的荚果，沿荚果背缝离背部维管束1 2rnrn处注入到第二粒种子的两片子叶中间，以同一荚果的第三粒种子作为对照，向其两片子叶中间注入15pl的缓冲液，处理5株，每株10个荚果。四、称粒重当大豆完全生
理成熟时，收获处理过的荚，对注射过外源脱落酸的籽粒和对照籽粒分别进行称重。
本实施方式中加入的外源激素、磷酸二氢钾和硼酸是在国内的化学品公司购得。
具体实施方式
二本实施方式与具体实施方式
一的不同点为步骤一中称取40克的磷酸二氢钾和1. 2~1. 8克的硼酸溶于1升纯净水中。其它步骤及参
数与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
三本实施方式与具体实施方式
一的不同点为步骤一中称取40克的磷酸二氢钾和1. 5克的硼酸溶于1升纯净水中。其它步骤及参数与
具体实施方式
一相同。
具体实施方式
四本实施方式与具体实施方式
一的不同点为步骤二中称取脱落酸标样0. 668毫克固体。其它步骤及参数与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
五本实施方式外源脱落酸调控大豆籽粒粒重的微注射法按如下步骤进行 一、缓冲液的配置称取40克的磷酸二氢钾和1.5克的硼酸溶于l升纯净水中；二、脱落酸注射液的配制用万分之一天平精确称取脱落
酸标样0.668毫克固体，置于刻度为lml的塑料EP管中，取缓冲液溶解固体
并定容lml，用涡旋器摇匀；三、注射用微量注射器从装有含脱落酸注射液
的EP管中抽取15W的脱落酸注射液，在大豆R5期选取大豆植株中上部节位具有三个籽粒的荚果，沿荚果背缝离背部维管束1 2mm处注入到第二粒种子的两片子叶中间，以同一荚果的第三粒种子作为对照，向其两片子叶中间注入15pl的缓冲液，处理5株，每株10个荚果。四、称粒重当大豆完全生理成熟时，收获处理过的荚，对注射过外源脱落酸的籽粒和对照籽粒分别进行称重。2008年采用本实施方式微注射法注射大豆植株使得大豆籽粒在脱落酸处理后出现粒重增加趋势，与对照(只注射了不含脱落酸的等量缓冲液)相比，单粒增重28%。
权利要求
1、一种外源脱落酸调控大豆籽粒粒重的微注射法，其特征在于外源脱落酸调控大豆籽粒粒重的微注射法按如下步骤进行一、缓冲液的配置称取38～42克的磷酸二氢钾和1.2～1.8克的硼酸溶于1升纯净水中；二、脱落酸注射液的配制用万分之一天平精确称取脱落酸标样0.6～0.7毫克固体，置于刻度为1ml的塑料EP管中，取缓冲液溶解固体并定容1ml，用涡旋器摇匀；三、注射用微量注射器从装有含脱落酸注射液的EP管中抽取15μl的脱落酸注射液，在大豆R5期选取大豆植株中上部节位具有三个籽粒的荚果，沿荚果背缝离背部维管束1～2mm处注入到第二粒种子的两片子叶中间，以同一荚果的第三粒种子作为对照，向其两片子叶中间注入15μl的缓冲液，处理5株，每株10个荚果。四、称粒重当大豆完全生理成熟时，收获处理过的荚，对注射过外源脱落酸的籽粒和对照籽粒分别进行称重。
2、 根据权利要求1所述的一种外源脱落酸调控大豆籽粒粒重的微注射法，其特征在于步骤一称取40克的磷酸二氢钾和1. 2~1. 8克的硼酸溶于1升纯净 水中。
3、 根据权利要求1所述的一种外源脱落酸调控大豆籽粒粒重的微注射法， 其特征在于步骤一称取40克的磷酸二氢钾和1. 5克的硼酸溶于1升纯净水中。
4、根据权利要求1所述的一种外源脱落酸调控大豆籽粒粒重的微注射法， 其特征在于步骤二中称取脱落酸标样0. 668毫克固体。
全文摘要
一种外源脱落酸调控大豆籽粒粒重的微注射法，它涉及一种外源激素调控大豆籽粒粒重的微注射法。它解决了现有喷施外源激素调控大豆产量的研究方法易受环境条件影响而造成外源激素损失，受到大豆生育期和体内代谢水平的影响使得外源激素的吸收不稳定的问题。本发明外源脱落酸调控大豆籽粒粒重的微注射法按如下步骤进行一、缓冲液的配置；二、脱落酸注射液的配制；三、注射；四、称粒重。本发明外源脱落酸调控大豆籽粒粒重的微注射法的采用避免了因降雨、温度、湿度和风向等外界环境的影响使得外源脱落酸浓度显著下降，避免了外源脱落酸的损失。此方法将对研究外源激素调控大豆粒重的生理生态过程和机理具有重要的理论和实践意义。
文档编号A01G1/00GK101642024SQ20091007289
公开日2010年2月10日 申请日期2009年9月15日 优先权日2009年9月15日
发明者兵 刘, 刘晓冰, 程 王, 剑 金 申请人:中国科学院东北地理与农业生态研究所