专利名称：心叶球兰组织培养方法
技术领域：
本发明涉及一种植物的组织培养方法，尤其是涉及心叶球兰的组织培养方法，属农业种植技术领域。
背景技术：
心叶球兰属萝摩科乳草亚科球兰属植物，又名凹叶球兰、腊兰和腊花等，原产于泰国、老挝等地。其为常绿木质藤本，可攀附他物生长，蔓长可达5米以上，具气根；叶对生，肥厚，倒心形，绿色；伞状花序，花冠淡绿色，具芳香。作为近年来引进的一种新型观赏植物，心叶球兰具有生长缓慢，耐旱、耐荫，适宜室内摆放的特点，是一种极具市场开发前景的植物。心叶球兰在东南亚各国很受欢迎，有良好的市场需求，在我国云南等地也有分布和销售。除成株外，心叶球兰的叶片扦插生根后可作为盆栽销售，因其叶片心形而具独特观赏价值，受到人们尤其是青年男女的喜爱。但因其繁殖缓慢，市场上成株及盆栽产品供不应求且价格较高。心叶球兰的传统繁殖方式是利用茎段扦插，一般来说是在晚春进行扦插繁殖；繁殖系数低，生长缓慢。尽管有文献对心叶球兰组织培养进行了报道，但其繁殖系数低、成本高，远远不能满足工业生产的需要，不能缓解市场上心叶球兰的缺乏情况。
发明内容
本发明的目的在于克服上述现有技术存在的缺陷，提供一种在短期内获得大量的植株幼苗，生产出性状一致的种苗，保证后续产品整齐划一的商品性能，降低成本，提高繁殖系数和繁殖速度，能够适应大规模工业化生产的心叶球兰组织培养方法。本发明的目的可以通过以下技术方案来实现心叶球兰组织培养方法，其特征在于，该方法包括以下步骤(I)消毒灭菌从老挝采集野生心叶球兰，选择生长势较好、叶片观赏价值较高的植株作为母本； 将叶片从母株上摘下，用洗衣粉在流水中清洗15-30min ;在超净工作台中，将清洗后的叶片用70% -75%的酒精浸泡30s，用无菌水冲洗一遍；再将叶片浸入O. I %的升汞溶液中 10_20min,无菌水冲洗4_5遍；(2)愈伤组织诱导培养将表面灭菌后的材料在灭过菌的滤纸上，用解剖刀切割成O. 5-lcm2的小块，接种在诱导培养基上；将材料在温度25±2°C、光照800-1000LX下培养，光照时间为8_10h/d ；⑶增殖培养外植体诱导培养50-60天后，可得到愈伤组织，将其分割转接在增殖培养基上；愈伤组织进行增殖培养30天后，形成绿色、表面有不规则突起的颗粒状组织；在此阶段可对愈伤组织进行切割转接增值，实现扩繁目的；将材料在温度25±2°C、光照1000-1500LX下培养，光照时间为10-12h/d ；(4)芽分化培养将愈伤组织切割，一般体积为O. 5-1 cm3大小,转接于芽分化培养基上；将材料在温度25±2°C、光照1500-2000LX下培养，光照时间为10_12h/d ；(5)壮苗及芽繁培养分化培养40-50天后，愈伤组织上着生多个丛生芽及芽点，可将其转接入壮苗及芽繁培养基上；将材料在温度25±2°C、光照2500-3000LX下培养，光照时间为10_12h/d ；(6)生根培养壮苗培养至苗高为2. 5_3cm时，将无根苗转接入生根培养基；生根培养一个月后，生根苗即可转入温室大棚进行驯化炼苗并销售给种植户；将材料在温度25±2°C、光照 2500-3000LX下培养，光照时间为10_12h/d ；最终生根率为90% -93. 3% ；所述的诱导培养基包括MS基本培养基，3%的葡萄糖，O. 7%的琼脂，6苄基嘌呤 6-BA1. 0-2. Omg/L，萘乙酸 NAA O. 8_L 2mg/L，2，4 二氯苯氧乙酸 2-4D O. 8-1. 2mg/L ；所述的增殖培养基包括MS基本培养基，3%的蔗糖，O. 7%的琼脂，6苄基嘌呤 6-BA1. 0-2. Omg/L，萘乙酸 NAA O. 5-1. 5mg/L，2，4 二氯苯氧乙酸 2-4D O. 8-1. 2mg/L ；所述的芽分化培养基包括MS基本培养基，3 %的蔗糖，O. 7 %的琼脂，6苄基嘌呤 6-BA0. 5-2. Omg/L，萘乙酸 NAA O. 5-1. 2mg/L,赤霉素 GA O. 8-1. 2mg/L ；所述的壮苗及芽繁培养基包括MS基本培养基，3%的蔗糖，O. 7%的琼脂，6苄基嘌呤 6-BA0. 5-1. 2mg/L，萘乙酸 NAA O. 5-1. 2mg/L ；所述的生根培养基包括1/2MS基本培养基，2%的蔗糖，O. 5%的琼脂，O. 5%的活性炭，萘乙酸 NAA O. 5-1. 2mg/L0所述的MS基本培养基是由大量元素、微量元素、有机成分组成。所述的诱导培养基成分优选包括MS基本培养基，3%的葡萄糖，O. 7%的琼脂，6 苄基嘌呤 6-BA I. 5mg/L，萘乙酸 NAA I. Omg/L，2，4 二氯苯氧乙酸 2-4D I. Omg/L。所述的增殖培养基成分优选包括MS基本培养基，3%的蔗糖，0. 7%的琼脂，6苄基嘌呤 6-BA I. 5mg/L,萘乙酸 NAA I. 0mg/L, 2,4 二氯苯氧乙酸 2-4D I. 0mg/L。所述的芽分化培养基成分优选包括MS基本培养基，3%的蔗糖，0. 7%的琼脂，6 苄基嘌呤 6-BA I. 5mg/L，萘乙酸 NAA 0. 8mg/L，赤霉素 GA I. 0mg/L。所述的在壮苗及芽繁培养基成分优选包括:MS基本培养基，3%的蔗糖，0. 7%的琼脂，6苄基嘌呤6-BA 0. 5mg/L，萘乙酸NAA 0. 5mg/L。所述的生根培养基成分优选包括1/2MS基本培养基，2%的蔗糖，0. 5%的琼脂， 0.5%的活性炭，萘乙酸NAA 0.8mg/L。各培养基的培养温度为25±2°C，光照800-3000LX，光照时间为8_12h/d。与现有技术相比，本发明通过组培技术，利用植物组织培养手段对心叶球兰繁殖时，可发挥快繁优势，短时间内获得相对多的幼苗；并且植物组织培养作为一种无性繁殖方式，可保证幼苗整齐划一，既便于后期统一的移栽和种植管理，也能保证所长成的商品成株和盆栽在各个性状上的一致。相对于以往的繁殖方式，本发明所涉及的培养基配方及配套的培养方式，可降低成本，提高繁殖系数和繁殖速度，能够适应大规模工业化生产。
图I为本发明心叶球兰组织培养方法的流程图。
具体实施例方式下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。本发明心叶球兰组织培养方法，其特征在于，该方法包括以下步骤(I)消毒灭菌从老挝采集野生心叶球兰，选择生长势较好、叶片观赏价值较高的植株作为母本。 将叶片从母株上摘下，用洗衣粉在流水中清洗15_30min(分钟)；在超净工作台中，将清洗后的叶片用70%-75%的酒精浸泡30s(秒)，用无菌水冲洗一遍；再将叶片浸入O. 1%的升汞溶液中10-20min (分钟)，无菌水冲洗4_5遍；(2)愈伤组织诱导培养将表面灭菌后的材料在灭过菌的滤纸上，用解剖刀切割成O. 5-lcm2的小块，接种在诱导培养基上；将材料在温度25±2°C (度)、光照800-1000LX(勒克斯)下培养，光照时间为8-10h/d(小时/天)；(3)增殖培养外植体诱导培养50-60天后，可得到愈伤组织，将其分割转接在增殖培养基上；愈伤组织进行增殖培养30天后，会形成绿色、表面有不规则突起的颗粒状组织；在此阶段可对愈伤组织进行切割转接增值，实现扩繁目的；将材料在温度25±2°C、光照1000-1500LX 下培养，光照时间为10-12h/d;(4)芽分化培养将愈伤组织切割，一般体积为O. 5-lcm3(立方厘米)大小，转接于芽分化培养基上；将材料在温度25±2°C、光照1500-2000LX下培养，光照时间为10_12h/d ；(5)壮苗及芽繁培养分化培养40-50天后，愈伤组织上着生多个丛生芽及芽点，可将其转接入壮苗及芽繁培养基上；将材料在温度25±2°C、光照2500-3000LX下培养，光照时间为10_12h/d ；(6)生根培养壮苗培养至苗高为2. 5-3cm(厘米)时，将无根苗转接入生根培养基；生根培养一个月后，生根苗即可转入温室大棚进行驯化炼苗并销售给种植户；将材料在温度25±2°C、 光照2500-3000LX下培养，光照时间为10_12h/d。最终生根率为90 % -93. 3 %。所述的诱导培养基包括MS基本培养基，3 %的葡萄糖，O. 7 %的琼脂，6苄基嘌呤 6-BA1. 0-2. Omg/L，萘乙酸 NAA O. 8_L 2mg/L，2，4 二氯苯氧乙酸 2-4D O. 8-1. 2mg/L。所述的增殖培养基包括MS基本培养基，3%的蔗糖，O. 7%的琼脂，6苄基嘌呤 6-BA1. 0-2mg/L，萘乙酸 NAA O. 5-1. 5mg/L，2，4 二氯苯氧乙酸 2-4D O. 8-1. 2mg/L。所述的芽分化培养基包括MS基本培养基，3 %的蔗糖，O. 7 %的琼脂，6苄基嘌呤 6-BA0. 5-2. Omg/L，萘乙酸 NAA O. 5-1. 2mg/L,赤霉素 GA O. 8-1. 2mg/L。所述的壮苗及芽繁培养基包括MS基本培养基，3%的蔗糖，O. 7%的琼脂，6苄基嘌呤 6-BA0. 5-1. 2mg/L，萘乙酸 NAA O. 5-1. 2mg/L。所述的生根培养基包括1/2MS基本培养基，2%的蔗糖，O. 5%的琼脂，O. 5%的活性炭，萘乙酸 NAA O. 5-1. 2mg/L0所述的MS基本培养基是由大量元素、微量元素、有机成分组成。所述的诱导培养基成分优选包括MS基本培养基，3%的葡萄糖，O. 7%的琼脂，6 苄基嘌呤 6-BA I. 5mg/L，萘乙酸 NAA I. Omg/L，2，4 二氯苯氧乙酸 2-4D I. Omg/L。所述的增殖培养基成分优选包括:MS基本培养基，3%的蔗糖，O. 7%的琼脂，6苄基嘌呤 6-BA I. 5mg/L,萘乙酸 NAA I. Omg/L, 2,4 二氯苯氧乙酸 2-4D I. Omg/L。所述的芽分化培养基成分优选包括MS基本培养基，3%的蔗糖，O. 7%的琼脂，6 苄基嘌呤 6-BA I. 5mg/L，萘乙酸 NAA O. 8mg/L，赤霉素 GA I. Omg/L。所述的壮苗及芽繁培养基成分优选包括MS基本培养基，3%的蔗糖，O. 7%的琼脂，6 苄基嘌呤 6-BA O. 5mg/L，萘乙酸 NAA O. 5mg/L。所述的生根培养基成分优选包括1/2MS基本培养基，2%的蔗糖，O. 5%的琼脂，
O.5%的活性炭，萘乙酸NAA 0.8mg/L。所述的各培养基的培养温度为25±2°C，光照800-3000LX，光照时间为8_12h/d。实施例I(I)消毒灭菌从老挝采集野生心叶球兰，选择生长势较好、叶片观赏价值较高的植株作为母本。 将叶片从母株上摘下，用洗衣粉在流水中清洗15min ;在超净工作台中，将清洗后的叶片用 70%的酒精浸泡30s，用无菌水冲洗一遍；再将叶片浸入O. I %的升汞溶液中lOmin，无菌水冲洗4遍。(2)愈伤组织诱导培养将表面灭菌后的材料在灭过菌的滤纸上，用解剖刀切割成O. 5cm2的小块，接种在诱导培养基上，该培养基成分为MS基本培养基，3%的葡萄糖，O. 7%的琼脂，6苄基嘌呤 (6-BA) I. Omg/L,萘乙酸(NAA) O. 8mg/L, 2,4 二氯苯氧乙酸(2-4D) O. 8mg/L。将材料在温度23°C、光照800LX下培养，光照时间为8h/d。(3)增殖培养外植体诱导培养50天后，可得到愈伤组织，将其分割转接在增殖培养基上，该培养基成分为MS基本培养基，3%的蔗糖，O. 7%的琼脂，6苄基嘌呤(6-BA)lmg/L，萘乙酸 (NAA) O. 5mg/L, 2,4 二氯苯氧乙酸(2-4D) O. 8mg/L。愈伤组织进行增殖培养30天后，会形成绿色、表面有不规则突起的颗粒状组织；在此阶段可对愈伤组织进行切割转接增值，实现扩繁目的。将材料在温度23°C、光照1000LX下培养，光照时间为10h/d。(4)芽分化培养将愈伤组织切割，一般体积为0. 5cm3大小，转接于芽分化培养基上，该培养基成分为MS基本培养基，3 %的蔗糖，0. 7 %的琼脂，6苄基嘌呤(6-BA) 0. 5mg/L，萘乙酸 (NAA) 0. 5mg/L,赤霉素(GA) 0. 8mg/L。将材料在温度23°C、光照1500LX下培养，光照时间为10h/d。(5)壮苗及芽繁培养
分化培养40天后，愈伤组织上着生多个丛生芽及芽点，可将其转接入壮苗及芽繁培养基上，该培养基成分为MS基本培养基，3 %的蔗糖，O. 7 %的琼脂，6苄基嘌呤 (6-BA) O. 5mg/L,蔡乙酸(NAA)O. 5mg/L。将材料在温度23°C、光照2500LX下培养，光照时间为10h/d。(6)生根培养壮苗培养至苗高为2. 5cm时，将无根苗转接入生根培养基，该培养基成分为 1/2MS基本培养基，2%的蔗糖，O. 5%的琼脂，O. 5%的活性炭，萘乙酸(NAA)O. 5mg/L。生根培养一个月后，生根苗即可转入温室大棚进行驯化炼苗并销售给种植户。将材料在温度23°C、光照2500LX下培养，光照时间为10h/d。最终生根率为 90. 8%。实施例2(I)消毒灭菌从老挝采集野生心叶球兰，选择生长势较好、叶片观赏价值较高的植株作为母本。 将叶片从母株上摘下，用洗衣粉在流水中清洗25min ;在超净工作台中，将清洗后的叶片用 75%的酒精浸泡30s，用无菌水冲洗一遍；再将叶片浸入O. I %的升汞溶液中15min，无菌水冲洗5遍。(2)愈伤组织诱导培养将表面灭菌后的材料在灭过菌的滤纸上，用解剖刀切割成O. 8cm见方的小块，接种在诱导培养基上，该培养基成分为MS基本培养基，3%的葡萄糖，O. 7%的琼脂，6苄基嘌呤(6-BA) I. 5mg/L,萘乙酸(NAA) I. Omg/L, 2,4 二氯苯氧乙酸(2-4D) I. Omg/L。将材料在温度25°C、光照1000LX下培养，光照时间为9h/d。(3)增殖培养外植体诱导培养55天后，可得到愈伤组织，将其分割转接在增殖培养基上，该培养基成分为MS基本培养基，3%的蔗糖，O. 7%的琼脂，6苄基嘌呤(6-BA)1.5mg/L，萘乙酸 (NAA) I. Omg/L, 2,4 二氯苯氧乙酸(2_4D) I. 0mg/L。愈伤组织进行增殖培养30天后，会形成绿色、表面有不规则突起的颗粒状组织；在此阶段可对愈伤组织进行切割转接增值，实现扩繁目的。将材料在温度25°C、光照1500LX下培养，光照时间为12h/d。(4)芽分化培养将愈伤组织切割，一般体积为Icm3大小，转接于芽分化培养基上，该培养基成分为MS基本培养基，3 %的蔗糖，0. 7 %的琼脂，6苄基嘌呤(6-BA) 1. 5mg/L，萘乙酸 (NAA) 0. 8mg/L,赤霉素(GA) I. 0mg/L。将材料在温度25°C、光照2000LX下培养，光照时间为12h/d。(5)壮苗及芽繁培养分化培养50天后，愈伤组织上着生多个丛生芽及芽点，可将其转接入壮苗及芽繁培养基上，该培养基成分为MS基本培养基，3%的蔗糖，0.7%的琼脂，6苄基嘌呤 (6-BA) 0. 5mg/L,蔡乙酸(NAA)O. 5mg/L。将材料在温度25°C、光照3000LX下培养，光照时间为12h/d。(6)生根培养
8
壮苗培养至苗高为3cm时，将无根苗转接入生根培养基，该培养基成分为1/2MS 基本培养基，2%的蔗糖，O. 5%的琼脂，O. 5%的活性炭，萘乙酸(NAA)O. 8mg/L。生根培养一个月后，生根苗即可转入温室大棚进行驯化炼苗并销售给种植户。将材料在温度25°C、光照3000LX下培养，光照时间为12h/d。最终生根率为 93. 3%。实施例3(I)消毒灭菌从老挝采集野生心叶球兰，选择生长势较好、叶片观赏价值较高的植株作为母本。 将叶片从母株上摘下，用洗衣粉在流水中清洗30min;在超净工作台中，将清洗后的叶片用 75%的酒精浸泡30s，用无菌水冲洗一遍；再将叶片浸入O. I %的升汞溶液中20min，无菌水冲洗5遍。(2)愈伤组织诱导培养将表面灭菌后的材料在灭过菌的滤纸上，用解剖刀切割成Icm见方的小块，接种在诱导培养基上，该培养基成分为=MS基本培养基，3%的葡萄糖，O. 7%的琼脂，6苄基嘌呤 (6-BA) 2. Omg/L，萘乙酸(NAA) I. 2mg/L，2，4 二氯苯氧乙酸(2-4D) I. 2mg/L。将材料在温度27°C、光照1000LX下培养，光照时间为10h/d。(3)增殖培养外植体诱导培养60天后，可得到愈伤组织，将其分割转接在增殖培养基上，该培养基成分为MS基本培养基，3%的蔗糖，O. 7%的琼脂，6苄基嘌呤(6-BA)2.0mg/L，萘乙酸 (NAA) I. 5mg/L, 2,4 二氯苯氧乙酸(2_4D) I. 2mg/L。愈伤组织进行增殖培养30天后，会形成绿色、表面有不规则突起的颗粒状组织；在此阶段可对愈伤组织进行切割转接增值，实现扩繁目的。将材料在温度27°C、光照1500LX下培养，光照时间为12h/d。(4)芽分化培养将愈伤组织切割，一般体积为Icm3大小,转接于芽分化培养基上,该培养基成分为MS基本培养基，3%的蔗糖，O. 7%的琼脂，6苄基嘌呤(6-BA)2mg/L，萘乙酸(NAA)l. 2mg/ L,赤霉素(GA) I. 2mg/L。将材料在温度27°C、光照2000LX下培养，光照时间为12h/d。(5)壮苗及芽繁培养分化培养50天后，愈伤组织上着生多个丛生芽及芽点，可将其转接入壮苗及芽繁培养基上，该培养基成分为MS基本培养基，3 %的蔗糖，O. 7 %的琼脂，6苄基嘌呤 (6-BA) I. 2mg/L,萘乙酸(NAA) I. 2mg/L。将材料在温度27°C、光照3000LX下培养，光照时间为12h/d。(6)生根培养壮苗培养至苗高为3cm时，将无根苗转接入生根培养基，该培养基成分为1/2MS 基本培养基，2%的蔗糖，O. 5%的琼脂，O. 5%的活性炭，萘乙酸(NAA) I. 2mg/L。生根培养一个月后，生根苗即可转入温室大棚进行驯化炼苗并销售给种植户。将材料在温度27°C、光照3000LX下培养，光照时间为12h/d。最终生根率为 91. 5%。
试验结果与分析I外植体愈伤组织诱导及增殖的观察表I不同的6BA浓度对外植体愈伤组织诱导和增殖的影响
编号浓度(mg/L)~愈伤组织团数增殖率
70 649. 2%
2I. 590. 288.9%
权利要求
1.心叶球兰组织培养方法，其特征在于，该方法包括以下步骤(1)消毒灭菌从老挝采集野生心叶球兰，选择生长势较好、叶片观赏价值较高的植株作为母本；将叶片从母株上摘下，用洗衣粉在流水中清洗15-30min ;在超净工作台中，将清洗后的叶片用70% -75%的酒精浸泡30s，用无菌水冲洗一遍；再将叶片浸入0. I %的升汞溶液中 10_20min,无菌水冲洗4_5遍；(2)愈伤组织诱导培养将表面灭菌后的材料在灭过菌的滤纸上，用解剖刀切割成0. 5-lcm2的小块，接种在诱导培养基上；将材料在温度25±2°C、光照800-1000LX下培养，光照时间为8_10h/d ；(3)增殖培养外植体诱导培养50-60天后，可得到愈伤组织，将其分割转接在增殖培养基上；愈伤组织进行增殖培养30天后，形成绿色、表面有不规则突起的颗粒状组织；在此阶段可对愈伤组织进行切割转接增值，实现扩繁目的；将材料在温度25±2°C、光照1000-1500LX下培养， 光照时间为10-12h/d ；(4)芽分化培养将愈伤组织切割，一般体积为0. 5-lcm3大小，转接于芽分化培养基上；将材料在温度 25±2°C、光照1500-2000LX下培养，光照时间为10_12h/d ;(5)壮苗及芽繁培养分化培养40-50天后，愈伤组织上着生多个丛生芽及芽点，可将其转接入壮苗及芽繁培养基上；将材料在温度25±2°C、光照2500-3000LX下培养，光照时间为10_12h/d ；(6)生根培养壮苗培养至苗高为2. 5-3cm时，将无根苗转接入生根培养基；生根培养一个月后， 生根苗即可转入温室大棚进行驯化炼苗并销售给种植户；将材料在温度2 5 ± 2 °C、光照 2500-3000LX下培养，光照时间为10_12h/d ；最终生根率为90% -93. 3% ；所述的诱导培养基包括MS基本培养基，3 %的葡萄糖，0. 7 %的琼脂，6苄基嘌呤 6-BA1. 0-2. Omg/L，萘乙酸 NAA 0. 8-1. 2mg/L，2，4 二氯苯氧乙酸 2-4D 0. 8-1. 2mg/L ；所述的增殖培养基包括MS基本培养基，3%的蔗糖，0.7%的琼脂，6苄基嘌呤 6-BA1. 0-2. Omg/L，萘乙酸 NAA 0. 5-1. 5mg/L，2，4 二氯苯氧乙酸 2-4D 0. 8-1. 2mg/L ；所述的芽分化培养基包括MS基本培养基，3%的蔗糖，0.7%的琼脂，6苄基嘌呤 6-BA0. 5-2. Omg/L，萘乙酸 NAA 0. 5-1. 2mg/L,赤霉素 GA 0. 8-1. 2mg/L ；所述的壮苗及芽繁培养基包括MS基本培养基，3%的蔗糖，0.7%的琼脂，6苄基嘌呤 6-BA0. 5-1. 2mg/L，萘乙酸 NAA 0. 5-1. 2mg/L ；所述的生根培养基包括1/2MS基本培养基，2%的蔗糖，0. 5%的琼脂，0. 5%的活性炭， 萘乙酸 NAA 0. 5-1. 2mg/L。
2.根据权利要求I所述的心叶球兰组织培养方法，其特征在于所述的MS基本培养基是由大量元素、微量元素、有机成分组成。
3.根据权利要求I所述的心叶球兰组织培养方法，其特征在于，所述的诱导培养基成分优选包括MS基本培养基，3%的葡萄糖，0. 7%的琼脂，6苄基嘌呤6-BA I. 5mg/L，萘乙酸NAA1. Omg/L，2，4 二氯苯氧乙酸 2-4D I. Omg/L。
4.根据权利要求I所述的心叶球兰组织培养方法，其特征在于，所述的增殖培养基成分优选包括MS基本培养基，3 %的蔗糖，0. 7 %的琼脂，6苄基嘌呤6-BA I. 5mg/L,萘乙酸 NAA1. Omg/L，2，4 二氯苯氧乙酸 2-4D I. Omg/L。
5.根据权利要求I所述的心叶球兰组织培养方法，其特征在于，所述的芽分化培养基成分优选包括MS基本培养基，3%的蔗糖，0. 7%的琼脂，6苄基嘌呤6-BA I. 5mg/L，萘乙酸 NAAO. 8mg/L,赤霉素 GA I. Omg/L。
6.根据权利要求I所述的心叶球兰组织培养方法，其特征在于，所述的在壮苗及芽繁培养基成分优选包括MS基本培养基，3%的蔗糖，0. 7%的琼脂，6苄基嘌呤6-BA 0. 5mg/L, 萘乙酸 NAA 0. 5mg/L0
7.根据权利要求I所述的心叶球兰组织培养方法，其特征在于，所述的生根培养基成分优选包括1/2MS基本培养基，2 %的蔗糖，0. 5 %的琼脂，0. 5 %的活性炭，萘乙酸NAA0.8mg/L。
8.根据权利要求I所述的心叶球兰组织培养方法，其特征在于各培养基的培养温度为 25±2°C，光照 800-3000LX，光照时间为 8_12h/d。
全文摘要
本发明涉及一种植物的组织培养方法，尤其是涉及心叶球兰的组织培养方法，属农业种植技术领域。本发明心叶球兰的组织培养方法包括消毒灭菌、愈伤组织诱导培养、增殖培养、芽分化培养、壮苗及芽繁培养、生根培养六个步骤。本发明通过组培技术，利用植物组织培养手段对心叶球兰繁殖时，可发挥快繁优势，短时间内获得相对多的幼苗；并且植物组织培养作为一种无性繁殖方式，可保证幼苗整齐划一，既便于后期统一的移栽和种植管理，也能保证所长成的商品成株和盆栽在各个性状上的一致。相对于以往的繁殖方式，本发明所涉及的培养基配方及配套的培养方式，可降低成本，提高繁殖系数和繁殖速度，能够适应大规模工业化生产。
文档编号A01H4/00GK102577972SQ20121006364
公开日2012年7月18日 申请日期2012年3月12日 优先权日2012年3月12日
发明者岳健, 张志敏, 李建, 李昆华, 李江黎 申请人:云南山里红生物科技有限公司