专利名称：一种台湾长寿菜的快速繁殖方法
技术领域：
本发明涉及的是一种植物的培养方法，尤其涉及一种台湾长寿菜的快速繁殖方法。
背景技术：
长寿菜，又名叶用甘薯，俗称白薯叶、番薯叶、地瓜叶，是甘薯的叶、叶柄和芽梢部，学名Ipomoea atatas (L. ) Lam ,为旋花科(Convolvulaceae)牵牛花属草本匍匍性蔓生植物。在热带为多年生。原产于热带美洲。现广泛栽培于全世界热带和亚热带地区。我国南 北各地都有栽培，以收获地下块根为主，叶蔓作饲料，民间也有采食叶作为粗菜。近年发现，薯叶中含丰富的营养物质，是维生素历、矿物质钾、钙之来源，而且其病虫害甚少，很少使用农药，比其他叶菜类较抗暴风雨，生长迅速，为良好的夏季叶菜。它在人们追求享受自然的风味中获得重视，在台湾省它作为一种优良的深绿色蔬菜发展很快。，利用组培技术繁育长寿菜的技术尚未有人研究，组织培养体系尚未建立，优良品种的推广普及尚未完成，供求矛盾日益加剧，严重影响了长寿菜的应用和推广。
发明内容
本发明针对现有的不足提供了一种台湾长寿菜的快速繁殖方法。本发明通过以下方法实现上述目的。一种台湾长寿菜的快速繁殖方法，该方法包括下列步骤
(1)外植体的选择于5 7月采取生长健壮的长寿菜叶片或块茎作外植体；
(2)材料处理方法先用软毛刷将外植体表面的灰尘轻轻刷去，用流水冲洗Ih后用紫外灯照射10 min，转入超净工作台，在超净工作台上先用70%的乙醇浸泡20-50秒，然后用无菌水冲洗，再转入滴加了 2 3滴土温80的0. I %的升汞溶液中浸泡5-7min，依时间长短用无菌水冲洗3 4次,最后在无菌条件下分割材料。莖段切割成0. I 0. 6 cm长，叶片分割成约0. 3 cm XO. 3 cm的小片；
(3)初代培养在无菌的条件下将步骤(2)得到的外植体接种在初代培养基上，该培养基是在 MS 常规培养基中添加了 0. 5mg/L 的 2，4_D、0. 4mg/L 的 BA、0. 4mg/L 的 NAA、0. 5mg/L蛋白酪、0. 5mg/L的GA，PH 6. 0，培养温度为24°C，光照周期13h/d，光强度为2000-22001ux，待培养25天左右后，新芽长至3. Ocm左右时，即开始下一个阶段；
(4)继代培养将初代培养的外植体新芽剪下接种在继代培养基上，该培养基是在3/4MS 常规培养基中添加了 0. 5mg/L 的 6_BA、0. 4mg/L 的 NAA、0. 5mg/L 蛋白酪、0. 3mg/L 的IBA、0. 3mg/L的KT，PH 6. 0，培养温度为24°C，光照周期13h/d，光强度为2000_22001ux，待新芽长至2. Ocm时，即开始下一个阶段；
(5)生根培养将继代培养的外植体新芽剪下接种在生根培养基上，该培养基是在1/3MS 常规培养基中添加了 0. 6mg/L 的 IBA、0. 6mg/L 的 NAA，0. 3mg/L 的 KT，0. 4mg/L 的 NAA、
0.5mg/L蛋白酪、PH 6. 0，培养温度为24°C，光照周期13h/d，光强度为22001ux，待新苗长至2. 5cm时，即开始下一个阶段；
(6)炼苗先将培养瓶移至温室，自然条件下炼苗6d，然后解开封口膜，炼苗4d，炼苗期间适当遮光，使光照强度为自然光的50%，炼苗完成后取出小苗洗净根部附着的培养基，移栽到经消毒的重量比腐殖土 草炭珍珠岩蛭石=3 3 I 2的混合基质中，温度控制在29°C，前7d湿度控制在85%左右，以后逐渐降低湿度；
(7)移栽移栽时间10月12-22日将扦插播种成活的小苗移栽到预先准备好的苗圃地，选择地势平坦，排水良好，土层深厚肥沃的土地建立苗圃地；
移栽方法移栽前将苗圃地做成长5m、宽2. 5 m的低床，施足底肥，然后将扦插苗按15cmX25 cm株行距进行移栽,移栽深度2. 5 cm,移栽后及时烧透水；
移栽苗管理生长期每隔15 d叶面喷施有机复合肥100倍溶液，大田苗移栽后，移植苗 成活率达到96%以上；
所述的有机复合肥的制备方法为
该复合肥按照如下方法制备
(a)按所述重量份数选取配方量的原料；所述原料为尿素5-20%,磷酸一铵2-5%,硫酸钾4-5%，磷酸二氢钾4-6%，腐植酸10-15%，木质素5-7%，BA3_5%，水5_10%，壳聚糖1-5%，硼砂3-7%，氯化锌0. 5-1%，钥酸钠0. 05-0. 3%，硫酸锰0. 05-0. 1%，十二烷基苯磺酸钠
0.05-0. 3%,硫酸亚铁 0. 8-2%,硫酸镁 0. 03-0. 8%,硫酸铜 0. 01-0. 05%, 二甲基亚砜 0. 2-2% ；大田作物秸杆2-10%，禽畜粪便2-3% ；
所述禽畜粪便为猪粪、牛粪、羊粪、鸡鸭粪中的一种或任意几种混合；
(b)将所述植物纤维粉碎为粉末；
(c)将所述禽畜粪便、植物纤维粉末混合、拌匀，在发酵池中堆置湿料发酵，上覆保湿保温材料，经过60小时后，堆内温度达到50-70°C时第一次翻堆，并每隔24小时翻堆一次，经过3次翻堆后，发酵结束；
(d)将发酵产物与所述的尿素，磷酸一铵，硫酸钾，磷酸二氢钾，纳米硫酸亚铁，纳米碳，腐植酸，木质素，BA，水，壳聚糖，硼砂，氯化锌，钥酸钠，硫酸锰，十二烷基苯磺酸钠，硫酸亚铁，硫酸镁，硫酸铜，二甲基亚砜混合放入反应釜中，用水溶解，在100-120°C下搅拌混合反应2小时；待混合工艺完成后,用200目筛过滤溶液,去掉残洛。有益效果本发明对长寿菜采用组织培养技术，以茎段和叶片为外植体，经外植体灭菌、初代培养、继代培养、增殖培养、生根培养和炼苗移栽步骤，研究培养过程中试管苗的营养需求、激素对苗木生长分化的调控，解决盘叶忍冬的微体快速增殖、诱导生根的重要技术问题，建立了完善的盘叶忍冬组织培养体系，达到了高效诱导外植体分化增殖和高质量保证幼苗成活的目的，并且保存了母体的全部优良性状，遗传性状稳定。这种方法可在短期内形成大量优良试管苗，进行规模化、工厂化生产，并具体具有一下优点
1、本发明针对盘叶忍冬原产地的气候特点，降低了组培过程中的培养温度，并且延长了光照周期，增强了光强度，从而使培养环境更接近其原生地的气候；
2、本发明通过对初代培养基、继代培养基、增殖培养基、生根培养基配方的精确筛选，达到了增殖速度快、遗传性状稳定、繁殖系数高、试管苗生长旺盛的优良效果。3、在炼苗移栽中通过逐渐提高光照强度，并且在移栽过程中，逐渐降低湿度、严格控制温度，采用合适的基质配方，最终提高了生根试管苗的成活率。
4、后期管理中采用了复合有机肥，降低了药残，复合无公害蔬菜的生菜要求。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明作进一步的说明，下述实施例仅用于说明本发明，对本发明并没有限制。一种台湾长寿菜的快速繁殖方法，该方法包括下列步骤
(1)外植体的选择于5 7月采取生长健壮的长寿菜叶片或块茎作外植体；
(2)材料处理方法先用软毛刷将外植体表面的灰尘轻轻刷去，用流水冲洗Ih后用紫外灯照射10 min，转入超净工作台，在超净工作台上先用70%的乙醇浸泡20-50秒，然后用 无菌水冲洗，再转入滴加了 2 3滴土温80的0. I %的升汞溶液中浸泡5-7min，依时间长短用无菌水冲洗3 4次,最后在无菌条件下分割材料。莖段切割成0. I 0. 6 cm长，叶片分割成约0. 3 cm X0. 3 cm的小片；
(3)初代培养在无菌的条件下将步骤(2)得到的外植体接种在初代培养基上，该培养基是在 MS 常规培养基中添加了 0. 5mg/L 的 2，4_D、0. 4mg/L 的 BA、0. 4mg/L 的 NAA、0. 5mg/L蛋白酪、0. 5mg/L的GA，PH 6. 0，培养温度为24°C，光照周期13h/d，光强度为2000-22001ux，待培养25天左右后，新芽长至3. Ocm左右时，即开始下一个阶段；
(4)继代培养将初代培养的外植体新芽剪下接种在继代培养基上，该培养基是在3/4MS 常规培养基中添加了 0. 5mg/L 的 6_BA、0. 4mg/L 的 NAA、0. 5mg/L 蛋白酪、0. 3mg/L 的IBA、0. 3mg/L的KT，PH 6. 0，培养温度为24°C，光照周期13h/d，光强度为2000_22001ux，待新芽长至2. Ocm时，即开始下一个阶段；
(5)生根培养将继代培养的外植体新芽剪下接种在生根培养基上，该培养基是在1/3MS 常规培养基中添加了 0. 6mg/L 的 IBA、0. 6mg/L 的 NAA，0. 3mg/L 的 KT，0. 4mg/L 的 NAA、
0.5mg/L蛋白酪、PH 6. 0，培养温度为24°C，光照周期13h/d，光强度为22001ux，待新苗长至2. 5cm时，即开始下一个阶段；
(6)炼苗先将培养瓶移至温室，自然条件下炼苗6d，然后解开封口膜，炼苗4d，炼苗期间适当遮光，使光照强度为自然光的50%，炼苗完成后取出小苗洗净根部附着的培养基，移栽到经消毒的重量比腐殖土 草炭珍珠岩蛭石=3 3 I 2的混合基质中，温度控制在29°C，前7d湿度控制在85%左右，以后逐渐降低湿度；
(7)移栽移栽时间10月12-22日将扦插播种成活的小苗移栽到预先准备好的苗圃地，选择地势平坦，排水良好，土层深厚肥沃的土地建立苗圃地；
移栽方法移栽前将苗圃地做成长5m、宽2. 5 m的低床，施足底肥，然后将扦插苗按15cmX25 cm株行距进行移栽,移栽深度2. 5 cm,移栽后及时烧透水；
移栽苗管理生长期每隔15 d叶面喷施有机复合肥100倍溶液，大田苗移栽后，移植苗成活率达到96%以上；
所述的有机复合肥的制备方法为
该复合肥按照如下方法制备
(a)按所述重量份数选取配方量的原料；所述原料为尿素5-20%,磷酸一铵2-5%,硫酸钾4-5%，磷酸二氢钾4-6%，腐植酸10-15%，木质素5-7%，BA3_5%，水5_10%，壳聚糖1-5%，硼砂3-7%，氯化锌0. 5-1%，钥酸钠0. 05-0. 3%，硫酸锰0. 05-0. 1%，十二烷基苯磺酸钠0.05-0. 3%，硫酸 亚铁 0. 8-2%，硫酸镁 0. 03-0. 8%，硫酸铜 0. 01-0. 05%，二甲基亚砜 0. 2-2% ；大田作物秸杆2-10%，禽畜粪便2-3% ；
所述禽畜粪便为猪粪、牛粪、羊粪、鸡鸭粪中的一种或任意几种混合；
(b)将所述植物纤维粉碎为粉末；
(c)将所述禽畜粪便、植物纤维粉末混合、拌匀，在发酵池中堆置湿料发酵，上覆保湿保温材料，经过60小时后，堆内温度达到50-70°C时第一次翻堆，并每隔24小时翻堆一次，经过3次翻堆后，发酵结束；
(d)将发酵产物与所述的尿素，磷酸一铵，硫酸钾，磷酸二氢钾，纳米硫酸亚铁，纳米碳，腐植酸，木质素，BA，水，壳聚糖，硼砂，氯化锌，钥酸钠，硫酸锰，十二烷基苯磺酸钠，硫酸亚铁，硫酸镁，硫酸铜，二甲基亚砜混合放入反应釜中，用水溶解，在100-120°C下搅拌混合反应2小时；待混合工艺完成后,用200目筛过滤溶液,去掉残洛。
权利要求
1.一种台湾长寿菜的快速繁殖方法，其特征在于该方法包括下列步骤 (1)外植体的选择于5 7月采取生长健壮的长寿菜叶片或块茎作外植体； (2)材料处理方法先用软毛刷将外植体表面的灰尘轻轻刷去，用流水冲洗Ih后用紫外灯照射10 min，转入超净工作台，在超净工作台上先用70%的乙醇浸泡20-50秒，然后用无菌水冲洗，再转入滴加了 2 3滴土温80的0. I %的升汞溶液中浸泡5-7min，依时间长短用无菌水冲洗3 4次,最后在无菌条件下分割材料,莖段切割成0. I 0. 6 cm长,叶片分割成约0. 3 cm X0. 3 cm的小片； (3)初代培养在无菌的条件下将步骤(2)得到的外植体接种在初代培养基上，该培养基是在 MS 常规培养基中添加了 0. 5mg/L 的 2，4_D、0. 4mg/L 的 BA、0. 4mg/L 的 NAA、0. 5mg/L蛋白酪、0. 5mg/L的GA，PH 6. 0，培养温度为24°C，光照周期13h/d，光强度为2000-22001ux，待培养25天左右后，新芽长至3. Ocm左右时，即开始下一个阶段； (4)继代培养将初代培养的外植体新芽剪下接种在继代培养基上，该培养基是在3/4MS 常规培养基中添加了 0. 5mg/L 的 6_BA、0. 4mg/L 的 NAA、0. 5mg/L 蛋白酪、0. 3mg/L 的IBA、0. 3mg/L的KT，PH 6. 0，培养温度为24°C，光照周期13h/d，光强度为2000_22001ux，待新芽长至2. Ocm时，即开始下一个阶段； (5)生根培养将继代培养的外植体新芽剪下接种在生根培养基上，该培养基是在.1/3MS 常规培养基中添加了 0. 6mg/L 的 IBA、0. 6mg/L 的 NAA，0. 3mg/L 的 KT，0. 4mg/L 的 NAA、.0. 5mg/L蛋白酪、PH 6.0，培养温度为24°C，光照周期13h/d，光强度为22001ux，待新苗长至2. 5cm时，即开始下一个阶段； (6)炼苗先将培养瓶移至温室，自然条件下炼苗6d，然后解开封口膜，炼苗4d，炼苗期间适当遮光，使光照强度为自然光的50%，炼苗完成后取出小苗洗净根部附着的培养基，移栽到经消毒的重量比腐殖土 草炭珍珠岩蛭石=3 3 I 2的混合基质中，温度控制在29°C，前7d湿度控制在85%左右，以后逐渐降低湿度； (7)移栽移栽时间10月12-22日将扦插播种成活的小苗移栽到预先准备好的苗圃地，选择地势平坦，排水良好，土层深厚肥沃的土地建立苗圃地； 移栽方法移栽前将苗圃地做成长5m、宽2. 5 m的低床，施足底肥，然后将扦插苗按15cmX25 cm株行距进行移栽,移栽深度2. 5 cm,移栽后及时烧透水； 移栽苗管理生长期每隔15 d叶面喷施有机复合肥100倍溶液，大田苗移栽后，移植苗成活率达到96%以上； 所述的有机复合肥的制备方法为 该复合肥按照如下方法制备 (a)按所述重量份数选取配方量的原料；所述原料为尿素5-20%,磷酸一铵2-5%,硫酸钾4-5%，磷酸二氢钾4-6%，腐植酸10-15%，木质素5-7%，BA3_5%，水5_10%，壳聚糖1-5%，硼砂3-7%，氯化锌0. 5-1%，钥酸钠0. 05-0. 3%，硫酸锰0. 05-0. 1%，十二烷基苯磺酸钠.0. 05-0. 3%,硫酸亚铁 0. 8-2%,硫酸镁 0. 03-0. 8%,硫酸铜 0. 01-0. 05%, 二甲基亚砜 0. 2-2% ；大田作物秸杆2-10%，禽畜粪便2-3% ； 所述禽畜粪便为猪粪、牛粪、羊粪、鸡鸭粪中的一种或任意几种混合； (b)将所述植物纤维粉碎为粉末； (c)将所述禽畜粪便、植物纤维粉末混合、拌匀，在发酵池中堆置湿料发酵，上覆保湿保温材料，经过60小时后，堆内 温度达到50-70°C时第一次翻堆，并每隔24小时翻堆一次，经过3次翻堆后，发酵结束； (d)将发酵产物与所述的尿素，磷酸一铵，硫酸钾，磷酸二氢钾，纳米硫酸亚铁，纳米碳，腐植酸，木质素，BA，水，壳聚糖，硼砂，氯化锌，钥酸钠，硫酸锰，十二烷基苯磺酸钠，硫酸亚铁，硫酸镁，硫酸铜，二甲基亚砜混合放入反应釜中，用水溶解，在100-120°C下搅拌混合反应2小时；待混合工艺完成后,用200目筛过滤溶液,去掉残洛。
全文摘要
本发明公开了一种台湾长寿菜的快速繁殖方法，主要通过对初代培养、继代培养、增殖培养、生根培养以及炼苗移栽、后期管理的步骤，达到了增殖速度快、遗传性状稳定、繁殖系数高、苗生长旺盛的优良效果，愈伤组织的萌动率达到了96%，增殖倍数达到了4.7倍，生根率达到了100%，最终的成活率达到了96%。
文档编号C05G3/00GK102630447SQ201210085689
公开日2012年8月15日 申请日期2012年3月28日 优先权日2012年3月28日
发明者董国新 申请人:常熟市滨江农业科技有限公司