专利名称：一种食用菌液化菌种的制备方法
技术领域：
本发明属于食用菌菌种的培养方法，具体地说，是一种食用菌液化菌种的制备方法。
背景技术：
食用菌菌种的生产是食用菌栽培中的关键环节，要实现食用菌栽培的优质、高效，首先要做到菌种的高质量、高效率、低成本生产。现有食用菌菌种的生产,主要有固体菌种和液体菌种两种生产方法，固体菌种的生产，其工艺路线是母种一原种一栽培种一菌包(或栽培瓶)，即在无菌条件下，用I支20mmX 200mm的母种接到4瓶 6瓶(750ml/瓶)经彻 底灭菌的固体培养基中，在适温下发菌培养成为原种；然后用I瓶原种扩接到40瓶 50瓶(750ml/瓶)固体培养基中，经过发菌培养成栽培种；最后用I瓶栽培种再扩接22袋 25袋固体料袋，经过发菌培养成菌包。该方法的优点是接种时机械损伤小，适应环境能力强，发菌温度要求不高。但是，其存在以下缺点一是要经历母种、原种、栽培种三个环节，生产环节多，污染几率大；二是生产周期长，菌种生产周期需77天 120天；三是菌龄长，原种、栽培种、菌包发菌时间长，上下菌龄不一致,上部菌龄长,活力下降；四是菌种生产占用场地大，设施投入多。液体菌种的生产工艺为母种一一级培养一二级培养(小型发酵罐)一大型发酵罐一菌包，即I支20mmX 200mm的母种接500ml —级培养液，经两次发酵得100L液体菌种，100L液体菌种接菌包3000袋。该方法优点一是生产周期短，制备液体菌种一般只要5 7天；二是菌龄短，液体发酵5 7天时的菌丝体正值旺盛生长期，接种后菌包萌发快，菌丝活力强；三是成本相对较低，不到固体菌种的1/3。但缺点一是液体发酵需要投资整套的发酵设备，而该设备价格昂贵，投入大，非一般的菇农所能接受，所以目前其只能用于工厂化生产，推广到菇农有一定的困难；二是污染不容易控制，食用菌液体发酵过程中间任何一个环节都要严格控制，一旦出现菌种带杂菌、接种操作不当、培养基或设备灭菌不彻底、空气过滤不严格、中间补料操作不当等，都会污染发酵罐，从而影响菌种的生产。
发明内容
本发明的目的是针对现有食用菌菌种生产方法存在的缺陷，提供一种食用菌液化菌种的制备方法。本发明的目的是由以下技术方案来实现的一种食用菌液化菌种的制备方法，其步骤包括固体菌种的纯化培养、无菌水的制备
步骤I :
固体菌种的纯化培养固体培养基经高压灭菌后接入纯菌种，在适温下培养成固体菌
种；
所说的固体培养基主要成分及重量配比，根据不同的食用菌品种和不同的生产条件而定，所说的高压灭菌为0. 15Mpa压力下保持2小时 2. 5小时，所说的适温为22°C 28°C，保持空气湿度在60% 75%，通风、避光发菌培养后得到固体菌种；步骤2
无菌水的制备采用蒸汽灭菌制备无菌水，或直接机械过滤制备无菌水，或者以其它方法制备无圃水；
其特征是它还包括以下两个步骤
步骤3
固体菌种的液化在无菌条件下，将所得到的固体菌种捣碎成颗粒状，与等量的无菌水混合，然后加入粉碎机粉碎成浆糊状菌种，再加入10倍 100倍的无菌水进行稀释，稀释后即成液化菌种；
步骤4 : 液化菌种的接种将经过高压灭菌消毒后的食用菌栽培料包(袋)置于洁净的冷却室内冷却至28°C以下，在无菌条件下，将液化菌种搅拌均匀，然后用器具将液化菌种倒入料包(袋)中，将接好菌种的食用菌栽培菌包(袋)移入食用菌培养房，在合适的温度、湿度下进行发菌管理。本发明一种食用菌液化菌种的制备方法，既可用于大规模的工厂化食用菌生产，也可以用于千家万户菇农的小规模食用菌生产，其具有以下优点
1、工艺简化，生产周期短，成本低液化菌种的制备工艺，与原有菌种制备技术相比，减少了一次发菌环节，工艺更简化，生产周期缩短，发菌时间缩短1/3以上，减少了使用场地、设施、原材料及劳动力的消耗，降低了成本；
2、接种简便，发菌快，菌龄齐液化菌种可以现配现用，接种简单到可以用器具倒入培养料中，解决了原有固体菌种多代扩繁，发菌时间长、上下菌龄不一致、活力下降的难题，具有发菌快，菌龄齐的特点，出菇更早、更集中，更优质，产量高；
3、效率高，投资小克服了液体菌种复杂的全封闭连续发酵技术工艺、潜在杂菌污染的缺点，液化菌种生产可以分批进行，数量可控，污染风险小，无需整套发酵设备，只需要简单的粉碎机，接种简单到可以用器具倒入培养料中，工作效率高，投资和运行成本小。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明一种食用菌液化菌种的制备方法作进一步说明。实施例一
秀珍菇液化菌种的制备
步骤I :
秀珍菇固体菌种的纯化培养选用固体培养基成分及重量配比为棉籽壳木屑麦麸玉米粉石膏石灰=42 : 40 : 10 : 5 : 2 : I，加入水后含水量达到58% 62%，混合均匀后装瓶(750ml/瓶)，经0. 15Mpa压力下灭菌2小时 2. 5小时，置洁净的冷却室内冷却至28°C以下，在无菌条件下，将秀珍燕母种接到固体培养基内，I支20mmX 200mm的母种接4 6瓶固体培养基，然后移入23°C 25°C的培养室，保持空气湿度在60% 75%，通风、避光发菌30天 35天后，培养成秀珍菇固体菌种；
步骤2 :无菌水的制备采用蒸汽灭菌制备无菌水，即将蒸汽通入洁净的水中，使之沸腾2分钟 3分钟，冷却至25°C以下备用；
步骤3 :秀珍菇固体菌种的液化在无菌条件下，将所得到的秀珍菇固体菌种捣碎成颗粒状，与等量的无菌水混合，加入消过毒的粉碎机内，粉碎成浆糊状秀珍菇菌种，粉碎细度在80目 200目之间，然后倒入消过毒的大器皿后再加入10倍至100倍的无菌水进行搅拌稀释，稀释后即成秀珍菇液化菌种，装罐备用；
步骤4 :秀珍菇液化菌种的接种选用与固体菌种培养基相同的成分及重量配比制成秀珍菇培养基，装包(袋)后在0. 15Mpa压力下灭菌2小时 2. 5小时，灭菌消毒后置于洁净的室内冷却至28°C以下，在无菌条件下，将备用液化菌种搅拌均匀，然后用勺子将秀珍菇液化菌种S入栽培菌包(袋)中，每包(袋)S入5g 15g，将接好菌种的栽培菌包(瓶)移入培养房，在温度23°C 25 °C、空气湿度65% 75%、通风、避光条件下，进行发菌管理。实施例二
金针菇液化菌种的制备
步骤I : 金针菇固体菌种的纯化培养选用固体培养基成分及重量配比为棉籽壳木屑麦麸玉米粉米糠石膏粉石灰=50 : 18 : 15 : 10 : 5 : I. 5 : 0. 5，加入水后含水量达到58% 62%，混合均匀后装瓶(750ml/瓶)，经0. 15Mpa压力下灭菌2小时 2. 5小时，置洁净的冷却室内冷却至28°C以下，在无菌条件下，将金针菇母种接到固体培养基内，I支20mmX 200mm的母种接4瓶 6瓶固体培养基，然后移入21°C 23°C的无菌房内，保持空气湿度在60% 75%，通风、避光发菌35天 40天后，培养成金针菇固体菌种；
步骤2
无菌水的制备采用直接烧开水的方法制备无菌水，开水沸腾2分钟 3分钟，冷却至23°C以下备用；
步骤3
金针菇固体菌种的液化在无菌条件下，将所得到的金针菇固体菌种捣碎成颗粒状，然后加入消过毒的粉碎机内，加入10倍至60倍的无菌水，直接粉碎成金针菇液化菌种，粉碎细度在80目 200目之间，装罐备用；
步骤4 :
金针菇液化菌种的接种选用与固体菌种培养基相同的成分及重量配比制成金针菇培养基，装包(袋)后在0. 15Mpa压力下灭菌2小时 2. 5小时,灭菌消毒后置于洁净的室内冷却至28°C以下，在无菌条件下，将备用液化菌种搅拌均匀，然后加入消过毒的喷雾器中，用加压方法将金针菇液化菌种喷入栽培菌包(袋)中，每包(袋)喷入5g 15g，将接好菌种的栽培菌包(瓶)移入培养房，在温度21°C 23 °C、空气湿度65% 75%、通风、避光条件下，进行发菌管理。实施例三
海鲜菇液化菌种的制备
步骤I :海鲜菇固体菌种的纯化培养选用固体培养基成分及重量配比为棉籽壳木屑麦麸玉米粉米糠石膏粉=50 15 15 10 9 I，加入水后含水量为58% 62%，混合均匀后装瓶(750ml/瓶)，经0. 15Mpa压力下灭菌2小时 2. 5小时，置洁净的冷却室内冷却至28°C以下，在无菌条件下，将海鲜燕母种接到固体培养基内，I支20mmX 200mm的母种接4 6瓶固体培养基，然后移入23°C 25°C的无菌房内发菌35天 40天后，培养成海鲜菇固体菌种；步骤2 :无菌水的制备采用水过滤器直接制备无菌水；
步骤3 :海鲜菇固体菌种的液化。在无菌条件下，将所得到的海鲜菇固体菌种捣碎成颗粒状，然后加入消过毒的粉碎机内，加入10倍至100倍的无菌水，直接粉碎成海鲜菇液化菌种，粉碎细度在80目 200目之间，装罐备用；
步骤4 :海鲜菇液化菌种的接种选用与固体菌种培养基相同的成分及重量配比制成海鲜菇培养基,装包(袋)后在0. 15Mpa压力下灭菌2小时 2. 5小时，灭菌消毒后置于洁净的室内冷却至28°C以下，在无菌条件下，将备用液化菌种搅拌均匀，然后用勺子将海鲜菇液化菌种S入栽培料包(袋)中，每包(袋)SA 5g 15g，将接好菌种的栽培菌包(瓶)移入培养房，在温度23°C 25 °C、空气湿度65% 75%、通风、避光条件下，
进行发菌管理。未使用完的液化菌种可以封装冷藏备用，冷藏温度为4°C 6°C。权利要求
1.一种食用菌液化菌种的制备方法，其步骤包括固体菌种的培养、无菌水的制备 步骤I: 固体菌种的纯化培养固体培养基经高压灭菌后接入纯菌种，在适温下培养成固体菌种； 所说的固体培养基主要成分及重量配比，根据不同的食用菌品种和不同的生产条件而定，所说的高压灭菌为0. 15Mpa压力下保持2小时 2. 5小时，所说的适温为22°C 28°C，保持空气湿度在60% 75%，通风、避光发菌培养后得到固体菌种； 步骤2 :无菌水的制备采用蒸汽灭菌制备无菌水，或直接机械过滤制备无菌水，或者以其它方法制备无菌水； 其特征是它还包括以下两个步骤 步骤3 固体菌种的液化在无菌条件下，将所得到的固体菌种捣碎成颗粒状，与等量的无菌水混合，然后加入粉碎机粉碎成浆糊状菌种，再加入10倍 100倍的无菌水进行稀释，稀释后即成液化菌种； 步骤4 : 液化菌种的接种将经过高压灭菌消毒后的食用菌栽培料包(袋)置于洁净的冷却室内冷却至28°C以下，在无菌条件下，将液化菌种搅拌均匀，然后用器具将液化菌种倒入料包(袋)中，将接好菌种的食用菌栽培菌包(袋)移入食用菌培养房，在合适的温度、湿度下进行发菌管理。
2.根据权利要求I所说的一种食用菌液化菌种的制备方法，其特征是步骤3所说的固体菌种的液化，还可以在无菌条件下，将所得到的固体菌种捣碎成颗粒状，直接加入10倍至100倍的无菌水进行粉碎，即得到液化菌种。
3.根据权利要求I所说的一种食用菌液化菌种的制备方法，其特征是步骤3所说的固体菌种的粉碎细度为80目 200目。
4.根据权利要求I所说的一种食用菌液化菌种的制备方法，其特征是步骤4所说的液化菌种的接种可以用加压方法将液化菌种喷入食用菌栽培料包中。
5.根据权利要求I所说的一种食用菌液化菌种的制备方法，其特征是步骤4所说的液化菌种的接种，每包(袋)栽培料包中，接入5g 15g液化菌种。
6.根据权利要求I所说的一种食用菌液化菌种的制备方法，其特征是步骤2所说的无菌水的制备，可以采用直接烧开水的方法制备无菌水。
全文摘要
本发明公开了一种食用菌液化菌种的制备方法，包括固体菌种的纯化培养、无菌水的制备、固体菌种的液化和液化菌种的接种四个步骤，在无菌条件下，将固体菌种加入粉碎机粉碎成浆糊状菌种，再加入无菌水进行稀释即成液化菌种，然后用器具将液化菌种倒入料包(袋)中即完成了接种，其具有工艺简化、生产周期短、接种简便、发菌快、菌龄齐、出菇早、优质高产、效率高、污染风险小、投资和运行成本小、经济效益好等优点。
文档编号A01G1/04GK102715014SQ201210208050
公开日2012年10月10日 申请日期2012年6月25日 优先权日2012年6月25日
发明者周国才, 黄良水 申请人:浙江常山荣昇食用菌有限公司