专利名称：金银花“忍冬三号”晚花品种选育方法
技术领域：
本发明涉及药用植物品种选育技术，专用于选育性状稳定、适合生产需要的金银花“忍冬三号”新品种。
背景技术：
金银花药用历史悠久，属著名传统中药，可清热解毒、疏散风热，用于治疗痈肿疔疮、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热等症，疗效卓著，是中医临床清热解毒的首选药物，年需求量超过2000万公斤。除药用外，金银花在日用化工、食品饮料、牲畜饲料等领域也都有着非常广泛的用途。
为满足市场需求，金银花在山东、河南、河北、陕西等地均有大面积种植，传统道地产区为山东平邑和河南密州，尤以平邑县种植面积大，约有30万亩。金银花适应性强，种植技术相对简单，但采花需要人工数量多，是限制生产发展、导致生产成本增加的重要环节。特别是在山东省平邑县主产区，金银花均种植在山区丘陵地带，植株花期相对集中并且较短，如果采花人手不足，花蕾很快就 会开放，一旦开放药用价值显著降低，严重影响经济效益。因此，采取有效措施，选育优良品种，调整金银花植株花期，使其花期相对延长，是提高金银花品质、产量与经济效益的重要途径，但目前尚无人开展相应的研究工作。
发明内容
本发明针对金银花主产区植株花期集中，花蕾开放速度快，采收人手不足，导致金银花药材产量与质量降低的局面，确定要解决的技术问题是:提供一种金银花晚花品种的选育方法，培育生物学性状稳定，产花量较高，药材质量符合《中华人民共和国药典》(2010年版)标准要求的晚花品种，以错开植株开花高峰，相对延长采收时间，保证金银花药材的产量与质量，降低采收成本，提高种植收益。为解决上述技术问题，本发明所提供的金银花晚花品种“忍冬三号”的选育方法，包括:
步骤一:在山东省平邑县金银花主产区大田，选择3 4年生忍冬(Lonicera japonicaThunb.)扦插植株5000株，早春重新移栽，株行距保持在IOOcmX 150cm,作为F1代，按常规进行施肥、修剪、除草等田间管理。
步骤二:对匕代群体进行植株性状观察与测定，将在平邑县主产区5月25日后开花的植株挂牌标记，记录开始开花的日期，同时考察晚花单株的生物学性状，包括墩高、墩围直径、分枝数量、幼茎毛茸、新抽生枝条长度、叶形、叶片大小、叶色、叶片毛茸、花芽分化时间、花蕾在枝条上着生状况、花蕾发育速度、花蕾大小、花蕾形状、花蕾色泽、花蕾鲜重等，单株采集全年花蕾，干燥后称定干重，采用药典规定方法检测绿原酸与木犀草苷含量。
步骤三:在5月25日以后开花的植株群体中，选择植株健壮，枝条直立性较强，花蕾分化数量多，单株花蕾产量高，绿原酸、木犀草苷含量符合《中华人民共和国药典》(2010年版)要求的晚花单株，挂牌标记。步骤四:于8 9月份，剪取上述挂牌标记晚花单株上健壮、无病虫害、无损伤、直径
0.5cm左右的枝条，按常规扦插育苗，建立株系圃，作为F2代，观察植株生物学性状，特别是晚花性状的遗传稳定性，分别测定绿原酸、木犀草苷含量，确定植株健壮，枝条直立性较强，花蕾分化数量多，单株花蕾产量高，绿原酸、木犀草苷含量符合《中华人民共和国药典》(2010年版)要求的晚花无性株系。
步骤五:对符合要求的无性株系加强田间管理，于8 9月份，剪取植株上健壮、无病虫害、无损伤、直径0.5cm左右的枝条扦插扩繁,形成F3代群体,待其植株结花后,采用药典规定方法检测花蕾绿原酸、木犀草苷含量，依据《中华人民共和国药典》(2010年版)标准要求，获得健壮晚花单株56株。
步骤六:对上述56株健壮晚花单株继续扦插繁殖，并经连续3年培育筛选，至生物学性状、活性成分含量等趋于稳定，各项指标的一致性达到95%以上。
步骤七:待生物学性状与活性成分含量稳定后，进行3年的品比和生产试验，获得在山东省平邑县主产区初花期为5月25 30日，年产花四茬，末花期为10月20 30日的金银花晚花品种“忍冬三号”。其生物学特性为:枝条壮旺、粗壮，茎叶毛茸较少，直立性较强，上部稍缠绕，枝条顶端不生花雷，节间长3.5 11.5cm ;花雷多着生在枝条中部，花雷稀疏但肥大，千花蕾鲜重120.6g ;根系发达，抗旱耐瘠薄；五年生植株单株花蕾鲜重1180g，干重203.4g ;花蕾绿原酸含量2.02%、木犀草苷含量0.096%。本发明提供的金银花晚花品种“忍冬三号”选育方法，具有如下优点:①平邑县金银花主产区植株一般年产花二茬，70%的产量集中在第一茬，初花期一般在5月15日左右，第一茬花期大约持续15天，花期集中，由于采收人手不足，导致大量花蕾开放，降低了金银花药材的产量与质量，晚花品种使植株花期延后大约10天，相对延长了采收时间，有效缓解了采收人手不足的矛盾。②选育出的晚花品种植株实行无性繁殖，有利于保持品种的遗传稳定性。③通过本发明选育出的“忍冬三号”晚花品种，五年生植株单株花蕾鲜重1180g，干重203.4g，较普通混杂金银花产量提高了 12.8%;采用药典规定方法检测，花蕾绿原酸含量2.02%、木犀草苷含量0.096%，高于《中华人民共和国药典》(2010年版)标准要求。
附图为金银花“忍冬三号”晚花品种选育流程图。详细选育路线参见说明书附图。
具体实施例方式山东省平邑县属于我国金银花主 要道地产区，本单位于1986年开始在当地进行金银花品种选育工作。首先在山东省平邑县金银花主产区大田，选择3 4年生忍冬Lonicera japonicaThunb.扦插植株5000株，早春重新移栽，株行距保持在IOOcmX 150cm,作为F1代，按常规进行施肥、修剪、除草等田间管理。对匕代群体进行植株性状观察与测定，将在平邑县主产区5月25日后开花的植株挂牌标记，记录开始开花的日期，同时考察晚花单株的生物学性状(墩高，墩围直径，分枝数量，幼茎毛茸，新抽生枝条长度，叶形，叶片大小，叶色，叶片毛茸，花芽分化时间，花蕾在枝条上着生状况，花蕾发育速度，最大花蕾的大小、形状、色泽、鲜重等)，单株采集植株全年花蕾，干燥后称定干重，测定绿原酸与木犀草苷含量。在5月25日以后开花的植株群体中，选择植株健壮，枝条直立性较强，花蕾分化数量多，单株花蕾产量高，绿原酸、木犀草苷含量符合《中华人民共和国药典》(2010年版)要求的晚花单株，挂牌标记。然后于8 9月份，剪取上述挂牌标记晚花单株上健壮、无病虫害、无损伤、直径
0.5cm左右的枝条，按常规扦插育苗，建立株系圃，作为F2代，观察植株生物学性状，特别是晚花性状的遗传稳定性，分别测定绿原酸、木犀草苷含量，确定植株健壮，枝条直立性较强，花蕾分化数量多，单株花蕾产量高，绿原酸、木犀草苷含量符合《中华人民共和国药典》(2010年版)要求的晚花无性株系。对符合要求的无性株系加强田间管理，于8 9月份，剪取植株上健壮、无病虫害、无损伤、直径0.5cm左右的枝条扦插扩繁,形成F3代群体,待其植株结花后，测定花蕾中的绿原酸、木犀草苷含量，依据《中华人民共和国药典》(2010年版)标准要求，获得健壮晚花单株56株。对上述56株健壮晚花单株继续扦插繁殖，并经连续3年培育筛选，至生物学性状、活性成分含量等趋于稳定，各项指标的一致性达到95%以上。
待生物学性状与活性成分含量稳定后，进行3年的品比和生产试验，获得在山东省平邑县主产区初花期为5月25 30日，年产花四茬，末花期为10月20 30日的金银花晚花品种“忍冬三号”。其生物学特性为:枝条壮旺，茎叶毛茸较少，直立性较强，上部稍缠绕，枝条顶端不生花雷，节间长3.5 11.5cm ;花雷多着生在枝条中部，花雷稀疏但肥大，千花蕾鲜重120.6g ;根系发达，抗旱耐瘠薄。通过本发明选育出的“忍冬三号”晚花品种，五年生植株单株花蕾鲜重1180g，干重203.4g，较普通种质混杂金银花产量提高了 12.8%;花蕾绿原酸含量2.02%，木犀草苷含量
0.096%，高于《中华人民共和国药典》(2010年版)标准要求。参见表1、表2。
表2 “忍冬三号”晚花品种与普通金银花植株生物学性状比较
品种类型 I枝条状况I花蕾状况 I年产花巷次I初花期I末花期
忍冬三号壮旺，上部少缠绕肥大，数量多四茬5月25 30日10月20 30日
普通金银花I枝条上部缠绕I细小，数量少 I二巷|5月15 20曰卜月15 20曰
表2 “忍冬三号”晚花品种与普通金银花植株(五年生)药材产量与质量比较
品种类型 I单株花蕾产量I绿原酸含量％ I木犀草苷含量％
忍冬三号 203.4g_^02_0.096_
金银花 |l80.3g|l.98|θ.092绿原酸含量检测方法。色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.4%磷酸溶液(13: 87)为流动相；检测波长为327nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于1000。对照品溶液的制备:取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每Iml含40 μ g的溶液，即得(10°C以下保存)。供试品溶液的制备:取本品粉末(过四号筛)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率35kHz) 30分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置25ml棕色量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，即得。测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。木犀草苷含量检测方法。色谱条件与系统适用性试验:用苯基硅烷键合硅胶为填充剂(Agilent ZORBAX SB_phenyl4.6mmX 250mm, 5 μ m),以乙臆为流动相 A,以 0.5%冰醋酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为350nm。理论板数按木犀草苷峰计算应不低于20000。
权利要求
1.金银花“忍冬三号”晚花品种选育方法，其特征在于操作步骤如下: 步骤一:在山东省平邑县金银花主产区大田，选择3 4年生忍冬Lonicera japonicaThunb.扦插植株5000株，早春重新移栽，株行距保持在IOOcmX 150cm,作为Fi代，按常规进行施肥、修剪、除草等田间管理； 步骤二:对匕代群体进行植株性状观察与测定，将在平邑县主产区5月25日后开花的植株挂牌标记，记录开始开花的日期，同时考察晚花单株的生物学性状，包括墩高、墩围直径、分枝数量、幼茎毛茸、新抽生枝条长度、叶形、叶片大小、叶色、叶片毛茸、花芽分化时间、花蕾在枝条上着生状况、花蕾发育速度、花蕾大小、花蕾形状、花蕾色泽、花蕾鲜重等，单株采集全年花蕾，干燥后称定干重，测定绿原酸与木犀草苷含量； 步骤三:在5月25日以后开花的植株群体中，选择植株健壮，枝条直立性较强，花蕾分化数量多，单株花蕾产量高，绿原酸、木犀草苷含量符合《中华人民共和国药典》(2010年版)要求的晚花单株，挂牌标记； 步骤四:于8 9月份，剪取上述挂牌标记晚花单株上健壮、无病虫害、无损伤、直径0.5cm左右的枝条，按常规扦插育苗，建立株系圃，作为F2代，观察植株生物学性状，特别是晚花性状的遗传稳定性，分别测定绿原酸、木犀草苷含量，确定植株健壮，枝条直立性较强，花蕾分化数量多，单株花蕾产量高，绿原酸、木犀草苷含量符合《中华人民共和国药典》(2010年版)要求的晚花无性株系； 步骤五:对符合要求的无性株系加强田间管理，于8 9月份，剪取植株上健壮、无病虫害、无损伤、直径0.5cm左右的枝条扦插扩繁,形成F3代群体,待其植株结花后，测定花蕾中的绿原酸、木犀草苷含量，依据《中华人民共和国药典》(2010年版)标准要求，获得健壮晚花单株56株； 步骤六:对上述56株健壮晚花单株继续扦插繁殖，并经连续3年培育筛选，至生物学性状、活性成分含量等趋于稳定，各项指标的`一致性达到95%以上； 步骤七:待生物学性状与活性成分含量稳定后，进行3年的品比和生产试验，获得在山东省平邑县主产区初花期为5月25 30日，年产花四茬，末花期为10月20 30日的金银花晚花品种“忍冬三号”，其生物学特性为枝条壮旺、粗壮，茎叶毛茸较少，直立性较强，上部稍缠绕，枝条顶端不生花雷，节间长3.5 11.5cm,花雷多着生在枝条中部，花雷稀疏但肥大，千花蕾鲜重120.6g，根系发达，抗旱耐瘠薄，五年生植株单株花蕾鲜重1180g，干重203.4g，采用药典方法检测，花蕾绿原酸含量2.02%、木犀草苷含量0.096%。
2.根据权利要求1所述的金银花“忍冬三号”晚花品种选育方法，其特征在于:所述的步骤一中的三年生忍冬扦插植株为种质混杂群体，没有进行种质划分。
3.根据权利要求1所述的金银花“忍冬三号”晚花品种选育方法，其特征在于:所述的步骤五中的扦插扩繁，系为无性繁殖，采用扦插方式。
全文摘要
本发明涉及金银花“忍冬三号”晚花品种的选育方法，适用于金银花新品种的选育。采集、移栽山东省平邑县主产地大田扦插繁殖3～4年生金银花植株，通过对晚花植株生物学性状观察、相关指标测定、优选、扩繁、品比，获得始花期为5月25～30日，末花期为10月20～30日，年产四茬花的金银花晚花品种“忍冬三号”。该品种生物学性状稳定，抗逆性较强，年产花茬次多，药材产量较普通种质混杂金银花提高了12.8％，绿原酸、木犀草苷含量也有所提高，符合《中华人民共和国药典》(2010年版)标准要求。由于花期延后大约10天，有利于缓解花期采收劳力不足的矛盾，对于保证金银花药材产量与品质、提高经济效益具有重要意义。
文档编号A01G1/00GK103229715SQ201310058599
公开日2013年8月7日 申请日期2013年2月20日 优先权日2013年2月20日
发明者张龙霏, 张永清, 张芳, 李佳 申请人:张龙霏, 张永清, 张芳