专利名称：壳聚糖季铵盐作为标本防霉菌剂的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种标本防霉剂及其应用方法，具体涉及壳聚糖季铵盐作为标本防霉菌剂的用途，属于标本防霉剂技术领域。
背景技术：
种类繁多的动物、植物、文物等标本因为霉菌的危害而受到最为严重的损害，使标本使用寿命大为缩短，同时也造成巨大经济损失。动物标本渗出油脂后会很快长出白霉。白霉是一种真菌，它附着在标本的表面上，使标本皮肤变碎、腐烂。目前的标本消杀霉菌方法只用化学药品法，主要有福尔马林-高锰酸钾熏蒸消毒法、邻苯基酚麝香草酚、水杨酸苯胺等。标本一旦霉变，再用甲醛等化学药品法杀菌，效果不佳，说明霉菌对化学药品已经产生耐药性。不但不能做到完全控制标本霉菌的效果.同时对工作人员及参观者的身体健康造成严重伤害。因此寻找安全无毒、无二次污染，安全环保的标本防霉剂已是迫在眉睫。
目前用动物浸制的标本发霉一直是医学教学、临床病理检验、法医、动物研究、博物馆等机构遇到的棘手问题。动物浸制标本通常经防腐固定处理后，浸泡于5%福尔马林(主要成分为甲醛)溶液中进行湿保存，防腐效果虽好，但对人体黏膜的刺激大，并污染周围环境，而且在使用过程中会出现标本外露部分霉变的情况，液面也会出现一层薄而透明的霉膜。渗出油脂的标本会很快长出白霉。白霉属于真菌，它附着在标本的表面上，使标本皮肤变碎、腐烂。标本一旦霉变，再用甲醛杀菌，尤其是霉菌，效果不佳，说明霉菌对甲醛已经产生耐药性。常见的霉菌主要有白曲霉菌、黑曲霉菌和黄曲霉菌等。
标本霉变给展览、教学、科普、科研带来了诸多影响，使其失去使用价值，而且工作人员长时间、大量接触霉菌也会危害身体健康。虽然其他防腐剂也有一些报道，如苯甲酸钠、山梨酸钾、丙酸钙、双乙酸钠和苯酚等，但目前都不能达到福尔马林的防腐效果。
动物剥制标本虫蛀霉烂问题严重影响了标本的保藏，但防虫防霉新材料和新方法的研究相对较少，新型的安全环保的防霉剂还很少见，所以研究开发新型的防霉剂有非常重要的意义。
壳聚糖季铵盐，是一种环保型高分子聚合物杀菌消毒剂，具有杀菌广谱；有效浓度低；作用速度快；性质稳定；易溶于水的优良性能；可在常温下使用；长期抑菌、无副作用；无腐蚀性；无色、无嗅；无毒；不燃、不爆、使用安全；价格适中；运输方便，可以说是最佳的杀菌剂。壳聚糖季铵盐为消毒 抗菌组分，可抑制细菌、病毒的分裂生殖功能，堵塞微生物的呼吸通道，达到灭菌效果。添加壳聚糖季铵盐后，细菌的细胞质聚集明显，有非常明显的质壁分离，细胞壁模糊，部分缺失，大肠杆菌和金色葡萄球菌的细胞壁的保护功能明显下降，大量细胞内酶外泄。这是因为壳聚糖季铵盐是典型的阳离子型高聚物，在溶液中呈强阳离子性而抑菌。
壳聚糖季铵盐是一种环保型多用途新型聚合物，在工业、农业、医用和日常生活中有着极其广泛的用途。但壳聚糖季铵盐作为标本防霉剂，尚未见报道。所以研究使用壳聚糖季铵盐作为标本防霉剂，安全无毒，无二次污染，环保，对保护标本，减少动物、植物、文物等标本因为霉变而引起的经济损失和保护人类健康具有重要的现实意义。发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供壳聚糖季铵盐作为标本防霉菌剂的用途，该防霉剂是一种环保型标本防霉剂，该防霉剂安全无毒，无二次污染，可以减少标本因为霉变而引起的经济损失，同时可以达到保护人类的身体健康。
为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是: 1.壳聚糖季铵盐作为标本防霉菌剂的用途；所述的防霉剂由壳聚糖季铵盐组成；所述的壳聚糖季铵盐的浓度为0.010 100.0摩尔/升；所述的用途是用浓度为0.010 100.0摩尔/升的壳聚糖季铵盐涂抹\浸泡\或者喷淋标本，起到标本防霉作用。
防霉剂的抑囷试验: 1.接种活化 先将标本体表的霉菌采集后，用PDA培养基于30°C下培养，然后先将霉菌接种活化，将试管斜面霉菌孢子用灭菌水洗下，用移液枪吸取菌悬液200mL加入PDA平板培养基，涂布棒将菌悬液涂均匀(涂布棒事先用95%乙醇或乙醛洗后再在酒精灯上烧掉灭菌)，放置5min后，将平板置放30°C、生化培养箱中培养24— 48h，生长出来无杂菌后可作为种子苗； 2.抑制实验部分 (1)壳聚糖季铵盐抑标本霉菌实验 将壳聚糖季铵盐用无菌水稀释至0.05% (3个)、0.1% (3个)、0.2% (3个)、0.3% (3个)、空白组(I个)，每个浓度装入灭菌具塞试管； 用剪刀剪取直径0.7cm滤纸片若干，置试管中121°C、30min灭菌。将种子菌依三步重新按平板约10个、每种浓度滤纸片用灭菌镊子取12个，分别接种3个平板，30°C培养48—72h，观察抑菌圈大小，翻过来用尺子测量； (2)甲醛(福尔马林)抑制实验 用同浓度0.05%,0.1%、0.2%、0.3%甲醛溶液做对照试验，方法同上。
本发明的有益效果是: 1.这是一种完全安全\环保的标本防治霉菌方法； 2.该种防霉剂不含乙醇和甲醛，对人体及环境无毒副作用，可使标本保持原样，并且可在-40°C 40°C范围内使 用； 3.本标本防霉菌剂在中性条件下就能够较好抑制细菌和霉菌的滋生，对标本具有良好的保存、固定、杀菌、防霉作用；且此保存液原料均为无毒无害环保天然活性物，对人体和环境安全无害，是福尔马林理想的替代产品。
图1为壳聚糖季铵盐抑制标本青霉抑菌效果图，抑菌圈直径:1.5 1.8 ; 图2为为青霉阴性对照图； 图3为100PPM壳聚糖季铵盐抑制标本绿霉抑菌效果图，抑菌圈直径:1.9 2.1 ; 图4为为青霉阴性对照；图5为IOOPPM甲醛抑制标本青霉菌效果图，抑菌圈直径:0.5 0.8cm。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明做进一步详细说明，这些实施例仅用来说明本发明，并不限制本发明的范围。
实施例1 采用本发明方法按下列步骤进行壳聚糖季铵盐抑制标本青霉菌实验，抑菌圈直径:1.5 1.8 ; 1.接种活化 将试管斜面霉菌孢子用灭菌水洗下，用移液枪吸取菌悬液200mL加入PDA平板培养基，涂布棒将菌悬液涂均匀(涂布棒事先用95%乙醇或乙醛洗后再在酒精灯上烧掉灭菌)。放置5min后。将平板置放30°C、生化培养箱中培养24— 48h。生长出来无杂菌后可作为种子苗； 2.抑制实验部分 (1)壳聚糖季铵盐抑标本霉菌实验 将壳聚糖季铵盐用无菌水稀释至0.05% (3个)、0.1% (3个)、0.2% (3个)、0.3% (3个)、空白组(I个)，每个浓度装入灭菌具塞试管； 用剪刀剪取直径0.7cm滤纸片若干，置试管中121°C、30min灭菌。将种子菌依三步重新按平板约10个、每种浓度滤纸片用灭菌镊子取12个，分别接种3个平板，30°C培养48—72h，观察抑菌圈大小，翻过来用尺子测量； (2)甲醛(福尔马林)抑制实验 用同浓度0.05%,0.1%、0.2%、0.3%甲醛溶液做对照试验，方法同上。
实施例2 采用本发明方法按下列步骤进行壳聚糖季铵盐抑制鱼标本绿霉: 1、接种活化 将试管斜面霉菌孢子用灭菌水洗下，用移液枪吸取菌悬液200mL加入PDA平板培养基，涂布棒将菌悬液涂均匀(涂布棒事先用95%乙醇或乙醛洗后再在酒精灯上烧掉灭菌)，放置5min后，将平板置放30°C、生化培养箱中培养24— 48h。生长出来无杂菌后可作为种子苗； 2.抑制实验部分 (1)壳聚糖季按盐抑标本绿霉霉囷实验 将壳聚糖季铵盐用无菌水稀释至0.05% (3个)、0.1% (3个)、0.2% (3个)、0.3% (3个)、空白组(I个)，每个浓度装入灭菌具塞试管； 用剪刀剪取直径0.7cm滤纸片若干。置试管中121°C、30min灭菌。将种子菌依三步重新按平板约10个、每种浓度滤纸片用灭菌镊子取12个，分别接种3个平板，30°C培养48—72h，观察抑菌圈大小，翻过来用尺子测量； (2)甲醛(福尔马林)抑制实验 用同浓度0.05%,0.1%、0.2%、 0.3%甲醛溶液做对照试验，方法同上。
实施例3 采用本发明方法按下列步骤进行壳聚糖季铵盐抑制鱼标本黑曲霉霉菌实验:该处理方法步骤是: 先将标本体表的霉菌采集后，用PDA培养基于30°C下培养，然后先将霉菌接种活化，将试管斜面霉菌孢子用灭菌水洗下，用移液枪吸取菌悬液200mL加入PDA平板培养基，涂布棒将菌悬液涂均匀(涂布棒事先用95%乙醇或乙醛洗后再在酒精灯上烧掉灭菌)，放置5min后，将平板置放30°C、生化培养箱中培养24— 48h，生长出来无杂菌后可作为种子苗； 将壳聚糖季铵盐用无菌水稀释至0.05% (3个)、0.1% (3个)、0.2% (3个)、0.3% (3个)、空白组(I个)，每个浓度装入灭菌具塞试管； 用剪刀剪取直径0.7cm滤纸片若干，置试管中121°C、30min灭菌。将种子菌依三步重新按平板约10个、每种浓度滤纸片用灭菌镊子取12个，分别接种3个平板，30°C培养48—72h，观察抑菌圈大小，翻过来用尺子测量；壳聚糖季铵盐浓度为:0.010 100.0摩尔/升；同时设计甲醛作为对照组，实验方法同上。
实施例4 采用本发明方法按下列步骤进行壳聚糖季铵盐抑制鱼标本白曲霉抑制作用先将标本体表的霉菌采集后，用PDA培养基于30°C下培养，然后先将霉菌接种活化，将试管斜面霉菌孢子用灭菌水洗下，用移液枪吸取菌悬液200mL加入PDA平板培养基，涂布棒将菌悬液涂均匀(涂布棒事先用95%乙醇或乙醛洗后再在酒精灯上烧掉灭菌)，放置5min后，将平板置放30°C、生化培养箱中培养24— 48h，生长出来无杂菌后可作为种子苗； 将壳聚糖季铵盐用无菌水稀释至0.05% (3个)、0.1% (3个)、0.2% (3个)、0.3% (3个)、空白组(I个)，每个浓度装入灭菌具塞试管； 用剪刀剪取直径0.7cm滤纸片若干，置试管中121°C、30min灭菌。将种子菌依三步重新按平板约10个、每种浓度滤纸片用灭菌镊子取12个，分别接种3个平板，30°C培养48—72h，观察抑菌圈大小，翻过来用尺子测量；壳聚糖季铵盐浓度为:0.010 100.0摩尔/升；同时设计甲醛作为对照组，实验方法同上。
实验结果对比 如图所示，采用壳聚糖季铵盐抑动物标本霉菌，抑菌效果明显，能有效抑制动物标本中的霉菌的生长，100PPM甲醛抑制标本青霉菌效果较100PPM壳聚糖季铵盐抑制标本青霉霉菌效果差一些，同时有强烈刺激气味。
实施例5 用浓度为0.010摩尔/升的 壳聚糖季铵盐涂抹\浸泡\或者喷淋标本，起到标本防霉作用。
实施例6 用浓度为100.0摩尔/升的壳聚糖季铵盐涂抹\浸泡\或者喷淋标本，起到标本防霉作用。
实施例7 用浓度为50.0摩尔/升的壳聚糖季铵盐涂抹\浸泡\或者喷淋标本，起到标本防霉作用。
权利要求
1.壳聚糖季铵盐作为标本防霉菌剂的用途，其特征在于:壳聚糖季铵盐作为动物标本防霉剂的用途。
2.根据权利要求1所述的壳聚糖季铵盐作为标本防霉菌剂的用途，其特征在于:所述的防霉剂由壳聚糖季铵盐组成。
3.根据权利要求2所述的壳聚糖季铵盐作为标本防霉菌剂的用途，其特征在于:所述的壳聚糖季铵盐的浓度为0.0lO 100.0摩尔/升。
4.根据权利要求1所述的壳聚糖季铵盐作为标本防霉菌剂的用途，其特征在于:所述的用途是用浓度为0.010 100.0摩尔/升的壳聚糖季铵盐涂抹\浸泡\或者喷淋标本，起到标本防霉作用。
全文摘要
本发明涉及壳聚糖季铵盐作为标本防霉菌剂的用途，属于标本防霉剂技术领域；该防霉剂保存液为壳聚糖季铵盐总摩尔浓度为0.010～100.0摩尔/升的溶液，其使用方法是用该溶液涂抹\浸泡\或者喷淋标本,可以起到标本防霉作用；这是一种完全安全\环保的标本防治霉菌方法；该种保存液不含乙醇和甲醛，对人体及环境无毒副作用，可使标本保持原样，并且可在-40℃～40℃范围内使用；本标本防霉菌剂在中性条件下就能够较好抑制细菌和霉菌的滋生，对标本具有良好的保存、固定、杀菌、防霉作用；且此保存液原料均为低毒环保化学品，对人体和环境危害很小，是福尔马林理想的替代产品。
文档编号A01N3/00GK103141470SQ20131008547
公开日2013年6月12日 申请日期2013年3月18日 优先权日2013年3月18日
发明者张锐, 孙美榕 申请人:广东海洋大学