小鼠近视模型的诱导装置、诱导方法以及小鼠近视模型的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种小鼠近视模型的诱导装置、诱导方法以及小鼠近视模型。装置由螺丝套件和近视头架两部分组成。螺丝套件包括螺杆、垫片及螺帽，缝合于小鼠头顶部作为第一支点固定近视头架。近视头架具可塑性，由腰孔，连接杆，镜架及鼻托四部分组成。腰孔用于与螺杆固定及前后距离微调；镜架用于固定镜片，可根据小鼠眼球位置调整；鼻托固定于鼻部，作为第二支点加固近视头架；连接杆连接上述三部分。本发明与现有技术相比，手术创伤小；整体性能强，稳定、安全可靠；非接触性设计，不影响小鼠生理习性，且利于反复操作及测量；装置材料易获取，成本低。
【专利说明】小鼠近视模型的诱导装置、诱导方法以及小鼠近视模型
【技术领域】
[0001]本发明涉及近视研究领域中小鼠近视模型的诱导装置、诱导方法以及小鼠近视模型。
【背景技术】
[0002]近视动物模型是近视研究的重要组成部分，对探讨近视发病机理和寻求防治措施起到至关重要的作用。自上世纪70年代初小鸡近视眼模型的建立，目前已有多种模式生物建立了近视模型，包括恒河猴、豚鼠、小鼠、斑马鱼等。这其中小鼠因其遗传背景清晰，且建立了一系列成熟的基因敲除及转基因模型，近10年来已成为国内外普遍采用的造模对象。
[0003]小鼠近视的诱导方法主要有形觉剥夺法(Form deprivation myopia, FDM)和离焦镜片诱导法(Lens induced myopia, LIM)。形觉剥夺法应用比较广泛,具体操作方法又包括了眼睑缝合法、半透明膜法、塑料眼罩法、项圈+眼罩法以及头架+眼罩法；离焦镜片诱导法报道相对少，包括单纯眼罩法、项圈+眼罩法及屈光手术等。各种方法的特点简介如下:
眼睑缝合法是Tejedor，J首创的经典方法，操作简单，但易被小鼠破坏，存在感染风险，且压迫眼球可能影响其健康，有逐渐被淘汰的趋势；半透明膜法由国内复旦大学研究组设计，类似于弥散镜片，将半透明膜固定于眼周，操作简单，同样容易被小鼠破坏；塑料眼罩法温州医学院发明，将特制的塑料眼罩缝合固定于小鼠的诱导眼一侧，操作简单，但稳定性可能不高；项圈+眼罩法由Schaeffel F首创，是目前应用比较多的方法，项圈可减少小鼠对眼罩的破坏，但容易影响其进食饮水及精神状态，且限制生理性“洗脸”清洁动作；单纯眼罩法最先由Barathi V A报道，可将诱导镜片的圆形底座先固定在眼周，再将镜片固定在底座上，置于眼前，操作简单，但易被破坏；屈光手术法理论可行，尚未见相关的研究论文报道。
[0004]头架+眼罩法由Faulkner A E首创，充分利用了卢页骨与眼球位置相对固定的特点，是目前小鼠近视模型研究领域比较成功的制作方法。该制作方法需暴露小鼠局部颅骨，刮除骨膜，通过骨钉、丙烯酸树脂头座等装置将遮眼镜框置于小鼠的诱导眼前，可进行遮眼镜框的前后距离调整，并配有对侧平衡杆以稳定装置。头架+眼罩法实现了模型制作时不直接接触小鼠眼球或眼周组织，可根据不同鼠龄调整遮眼镜框位置，能方便地对眼球进行操作和测量，利于眼部健康的维护。但该方法也存在明显的缺点:1)手术操作复杂，技术难度高，对小鼠创伤大；2)诱导装置复杂且成本高，仅能在少数有条件的实验室开展；3)头顶固定装置对局部组织的影响大，脱落后再次造模的可能性小。
[0005]总之，目前小鼠近视模型的诱导方法很多，各有利弊。相对而言，项圈能够限制小鼠的搔抓，但会显著影响正常的生活习性；头顶固定最稳定，但手术复杂且技术难度高，成本也高，目前小鼠近视模型的制作尚缺乏一种既稳定、安全、经济又微创的方法。
【发明内容】
[0006]本发明目的在于尽可能克服目前小鼠近视诱导方法的缺点，不安装项圈限制小鼠的正常习性，吸取头顶固定稳定性高的经验，提出一种小鼠近视模型的诱导装置、诱导方法以及小鼠近视模型，相对稳定、安全、经济又微创。
[0007]—种小鼠近视模型的诱导装置，包括螺丝套件和近视头架两部分，所述的螺丝套件用于将近视头架固定在小鼠的头部。
[0008]优选地，所述的螺丝套件采用无毒、生物相容性好的尼龙平头螺丝套件，包括螺杆，螺帽及垫片。 [0009]优选地，所述的近视头架具有可塑性，包括腰孔、连接杆、镜架及鼻托四部分，连接杆分别与腰孔、镜架、鼻托相连；腰孔呈椭圆形，用于与螺杆固定及前后距离微调，镜架设有多个镜片托用于固定镜片，鼻托用于缝合固定近视头架于鼻部。
[0010]一种小鼠近视模型的诱导方法，步骤如下:
1)小鼠麻醉后头颈部剃毛，垂直耳根连线作长I厘米的纵行皮肤切口；
2)以顶间骨与两块顶骨的交点为中心，缝合固定螺杆于周边组织，再缝合皮肤切口；
3)安装垫片，将腰孔置于垫片上，根据眼球位置调节前后距离，使眼球中心与镜架中心相对应，再用螺帽固定近视头架；
4)对鼻托进行形态微调，使之与小鼠鼻部相吻合，缝合固定鼻托；
5)利用镜片托固定镜片于镜架的一只上，并在连接杆上作标记；得到所述的小鼠近视模型。
[0011]一种利用所述的方法得到的小鼠近视模型，小鼠的诱导眼呈近视化发展，与对照眼的屈光度、眼轴长度存在显著性的统计学差异。
[0012]本发明的有益效果在于:
1)手术创伤较头架+眼罩法小，仅涉及皮肤及肌肉缝合；
2)装置整体不接触眼球或眼周结构，操作安全；
3)螺丝固定的方法方便拆卸，利于日常维护及检测；
4)头架前后距离及镜架位置可调，适合不同日龄的小鼠造模；
5)双支点固定，稳定可靠，无须单独饲养；
6)不安装项圈，不影响小鼠进食进水，也不限制“洗脸”行为；
7)装置可自行采购或制作，成本低。
【专利附图】
【附图说明】
[0013]图1是本发明的螺丝套件结构示意图；
图2是本发明的近视头架结构示意图；
图3是小鼠佩戴本发明装置的正视效果图；
图4是小鼠佩戴本发明装置的右视效果图；
图中，螺杆1、螺帽2、垫片3、腰孔4，连接杆5，镜架6，鼻托7。
【具体实施方式】
[0014]以下结合附图和【具体实施方式】对本发明做进一步的说明。
[0015]一种小鼠近视模型的诱导装置，包括螺丝套件(如图1所示)和近视头架(如图2所示)两部分，所述的螺丝套件用于将近视头架固定在小鼠的头部。
[0016]优选地，所述的螺丝套件采用无毒、生物相容性好的尼龙平头螺丝套件，包括螺杆I，螺帽2及垫片3。
[0017]优选地，所述的近视头架具有可塑性，包括腰孔4、连接杆5、镜架6及鼻托7四部分，连接杆5分别与腰孔4、镜架6、鼻托7相连；腰孔4呈椭圆形，用于与螺杆I固定及前后距离微调，镜架设有多个镜片托用于固定镜片，鼻托用于缝合固定近视头架于鼻部。
[0018]一种小鼠近视模型的诱导方法(如图3、4所示)，步骤如下:
1)小鼠麻醉后头颈部剃毛，垂直耳根连线作长I厘米的纵行皮肤切口；
2)以顶间骨与两块顶骨的交点为中心，缝合固定螺杆I于周边组织，再缝合皮肤切
n ；
3)安装垫片3，将腰孔4置于垫片3上，根据眼球位置调节前后距离，使眼球中心与镜架6中心相对应，再用螺帽2固定近视头架；
4)对鼻托7进行形态微调，使之与小鼠鼻部相吻合，缝合固定鼻托7；
5)利用镜片托固定镜片于镜架6的一只上，并在连接杆5上作标记；
得到所述的小鼠近视模型。
[0019]一种利用所述的方法得到的小鼠近视模型，小鼠的诱导眼呈近视化发展，与对照眼的屈光度、眼轴长度存在显著`性的统计学差异。
实施例
[0020]我们采用出生后2广24天的C57BL6小鼠作为模式动物，安装好所述诱导装置，右眼镜架安装离焦镜片作为实验眼，左眼镜架不安装镜片作为对照。诱导4周后进行验光及生物学参数测量，发现实验眼呈近视化发展，与对照眼的屈光度、眼轴长度存在显著性的统计学差异。
【权利要求】
1.一种小鼠近视模型的诱导装置，其特征在于，它包括螺丝套件和近视头架两部分，所述的螺丝套件用于将近视头架固定在小鼠的头部。
2.根据权利要求1所述的小鼠近视模型的诱导装置，其特征在于，所述的螺丝套件采用无毒、生物相容性好的尼龙平头螺丝套件，包括螺杆(1)，螺帽(2)及垫片(3)。
3.根据权利要求1或2所述的小鼠近视模型的诱导装置，其特征在于，所述的近视头架具有可塑性，包括腰孔(4)、连接杆(5)、镜架(6)及鼻托(7)四部分，连接杆(5)分别与腰孔(4 )、镜架(6 )、鼻托(7 )相连；腰孔(4 )呈椭圆形，用于与螺杆(I )固定及前后距离微调，镜架设有多个镜片托用于固定镜片，鼻托用于缝合固定近视头架于鼻部。
4.一种小鼠近视模型的诱导方法，其特征在于，步骤如下: 1)小鼠麻醉后头颈部剃毛，垂直耳根连线作长I厘米的纵行皮肤切口； 2)以顶间骨与两块顶骨的交点为中心，缝合固定螺杆(I)于周边组织，再缝合皮肤切n ； 3)安装垫片(3)，将腰孔(4)置于垫片(3 )上，根据眼球位置调节前后距离，使眼球中心与镜架(6 )中心相对应，再用螺帽(2 )固定近视头架； 4)对鼻托(7)进行形态微调，使之与小鼠鼻部相吻合，缝合固定鼻托(7 ); 5)利用镜片托固定镜片于镜架(6)的一只上，并在连接杆(5)上作标记；得到所述的小鼠近视模型。
5.一种利用权利要求4所`述的方法得到的小鼠近视模型，小鼠的诱导眼呈近视化发展，与对照眼的屈光度、眼轴长度存在显著性的统计学差异。
【文档编号】A01K67/02GK103598143SQ201310576052
【公开日】2014年2月26日 申请日期:2013年11月18日 优先权日:2013年11月18日
【发明者】徐柏升, 姜波, 洪楠, 顾扬顺 申请人:浙江大学