一种苹果品种烟富6号组培快繁的方法
【专利摘要】本发明公开了一种苹果品种烟富6号组培快繁的方法，该苹果品种烟富6号组培快繁的方法，通过采用培养基为MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.1mg+PVP500mg/L的培养基初代培养、采用MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.1mg/L处理的继代培养、采用生根培养基1/2MS+IBA1.0mg/L的生根培养、用纯锯末的炼苗移栽；实现了苹果品种烟富6号快速的繁殖，不仅保证了较高的成活率，而且也保留了品种的优良特性，为苹果产业的发展和进一步扩大提供了便捷的方法和途径。
【专利说明】一种苹果品种烟富6号组培快繁的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于苹果苗木栽培【技术领域】，尤其涉及一种苹果品种烟富6号组培快繁的 方法。
【背景技术】
[0002] 苹果产业在中国农业经济中占有非常重要的地位，2013年中国苹果种植面积 225.3万公顷，产量为3170万吨。占世界总产量的1/2。目前，我国的苹果生产模式由传统 低效郁闭果园模式逐步的转变为现代化矮砧密植集约高效生产栽培模式、并由世界苹果生 产大国逐步的转变为苹果产业强国。苹果苗木是苹果生产栽培的基础，苗木的质量直接影 响着苹果树体的生长、开花、结果以及抗逆性、抗病能力和寿命。苗木受到病毒的侵染之后， 树体正常的细胞增殖，就会受到破坏，严重的话会影响果树的生长势、果实品质和产量等正 常生理机制，这成为中国苹果产业发展的隐患。今后一段时期是我国苹果大规模更新换代 的关键时期，如何从苗木方面提供支持和保障便成为一个值得高度重视的问题。烟富6号 是长富2号的优良芽变。相比于母株长富2号，烟富6号为短枝型芽变，幼树期结果早，早 期产量高，果个大，着色良好，得到广大果农的喜爱。本发明建立一种苹果品种烟富6号快 速繁殖组培快繁的方法，对于生产优质短枝型苹果苗木，具有重要意义，市场前景广阔。
【发明内容】
[0003] 本发明实施例的目的在于提供一种苹果品种烟富6号组培快繁的方法，旨在为我 国苹果苗木的栽培提供一种组培快繁的方法，以加快我国苹果大规模更新换代。
[0004] 本发明实施例是这样实现的，一种苹果品种烟富6号组培快繁的方法，该苹果品 种烟富6号组培快繁的方法包括以下步骤：
[0005] 步骤一，以苹果品种烟富6号为材料，选择生长健壮无病虫害的母树，于3月份取 1年生枝条，放置25°C的温室内进行水培，每升水含有30g蔗糖，每隔3d换一次水并剪掉旧 剪口，当水培的一年生枝条上的芽抽生为1. 5?2. 0cm时，剪取嫩芽，去除展开叶片，在自来 水下冲洗6?811，用75%酒精处理88,0.1%升汞处理71^11;
[0006] 步骤二，进行消毒处理后，用超声波清洗机清洗3min，再用无菌水冲洗3?4次，将 处理好的嫩芽接种到MS+6-BA0. 5mg/L+IBA0. lmg+PVP (聚乙烯吡咯烷酮）500mg/L的培养基 中进行培养，每升培养基附加30g蔗糖，8g琼脂，然后放置在光照16h/d、光照20001u X，26°C 条件下进行培养；
[0007] 步骤三，将获得的烟富6号无菌外植体接种MS+6-BA0. 5mg/L+IBA0. lmg/L琼脂8g/ L，光照20001ux的培养基中进行继代培养，每升附加30g蔗糖，8g琼脂；
[0008] 步骤四，选择继代培养获得的生长健壮，高度大于1. 5cm，生长时间为20天的芽 子，接种于1/2MS+IBA1. Omg/L (蔗糖30g/L，琼脂8g/L)生根培养基中进行生根培养；
[0009] 步骤五，当组培苗根长度达到2cm后，移到室外遮阴炼苗10?12天左右，然后将 培养容器瓶口打开，自然光下进行开瓶炼苗2?4天后，将生根苗从培养基中取出，放入浓 度为0. 1 %多菌灵溶液中浸泡5min，并把根部多余的培养基清洗干净，最后用清水冲洗2? 3次，然后用纯锯末移栽到的营养钵中。
[0010] 进一步，在步骤五中，移栽苗的管理方式为：移栽后将生根苗在遮阴网下进行管 理，第一周采用浓度为0. 1 %多菌灵溶液进行喷灌，第二周每天用水喷灌一次，保持移栽基 质湿润透气。待生根苗抽生出新芽之后即可移出遮阴网。
[0011] 本发明提供的苹果品种烟富6号组培快繁的方法，通过采用培养基为 MS+6-BA0. 5mg/L+IBA0. lmg+PVP500mg/L的培养基初代培养，成活率为30. 77%，有利于烟 富6号组培苗的建立；采用MS+6-BA0. 5mg/L+IBA0. lmg/L处理的继代培养，扩繁系数高达 5. 64 ;采用生根培养基1/2MS+IBA1. Omg/L的生根培养且生根率达45. 8% ;用纯锯末进行炼 苗移栽，成活率达75% ;重复的对烟富6号品种进行继代培养，生根培养和移栽能够在较短 的时间内实现苹果品种烟富6号无病毒苗木的快速的繁殖。通过组织培养技术保留了烟富 6号品种的优良特性，有利于烟富6号优良品种的保存，为苹果烟富6号的无病毒苗木提供 了高效便捷的繁育技术，促进苹果产业的进一步发展。
【专利附图】
【附图说明】
[0012] 图1是本发明实施例提供的苹果品种烟富6号组培快繁的方法流程图。
【具体实施方式】
[0013] 为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明 进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于 限定本发明。
[0014] 下面结合附图及具体实施例对本发明的应用原理作进一步描述。
[0015] 如图1所示，本发明实施例的苹果品种烟富6号组培快繁的方法包括以下步骤：
[0016] S101 :以苹果品种烟富6号为材料，选择生长健壮无病虫害的母树，于3月份取1 年生枝条，放置25°C的温室内进行水培，每升水含有30g蔗糖，每隔3d换一次水并剪掉旧剪 口，当水培的一年生枝条上的芽抽生为1. 5?2. 0cm时，剪取嫩芽，去除展开叶片，在自来水 下冲洗6?8h，用75 %酒精处理8s，0. 1 %升萊处理7min ;
[0017] S102 :进行消毒处理后，用超声波清洗机清洗3min，再用无菌水冲洗3?4次，将 处理好的嫩芽接种到MS+6-BA0. 5mg/L+IBA0. lmg+PVP (聚乙烯吡咯烷酮）500mg/L的培养基 中进行培养，每升培养基附加30g蔗糖，8g琼脂，然后放置在光照16h/d、光照20001u X，26°C 条件下进行培养；
[0018] S103 :将获得的烟富6号无菌外植体接种最优培养基处理，即MS+6-BA0. 5mg/ L+IBAO. lmg/L琼脂8g/L，光照20001ux的培养基中进行继代培养，每升附加30g蔗糖，8g琼 脂；
[0019] S104 :选择继代培养获得的生长健壮，高度大于1. 5cm，生长时间为20天的芽子， 接种于1/2MS+IBA1. Omg/L (蔗糖30g/L，琼脂8g/L)生根培养基中进行生根培养；
[0020] S105 :当组培苗根长度达到2cm后，移到室外遮阴炼苗10?12天左右，然后将培 养容器瓶口打开，自然光下进行开瓶炼苗2?4天后，将生根苗从培养基中取出，放入浓度 为0. 1 %多菌灵溶液中浸泡5min，并把根部多余的培养基清洗干净，最后用清水冲洗2?3 次，然后用纯锯末移栽到的营养钵中。
[0021] 在步骤S105中，移栽苗的管理方式为：移栽后将生根苗在遮阴网下进行管理，第 一周采用浓度为〇. 1%多菌灵溶液进行喷灌，第二周每天用水喷灌一次，保持栽培基质湿润 透气。待生根苗抽生出新芽之后即可移出遮阴网。
[0022] 本发明的具体步骤如下：
[0023] 步骤一，初代培养
[0024] 苹果品种烟富6号为材料，选择生长健壮无病虫害的母树，于3月份取1年生枝 条，放置25°C的温室内进行水培（每升水含有30g蔗糖），每隔3d换一次水并剪掉旧剪口， 当水培的一年生枝条上的芽抽生为1. 5?2. 0cm时，剪取嫩芽，去除展开叶片，在自来水下 冲洗6?8h，用75%酒精处理8s，0. 1 %升汞处理7min，进行消毒处理后，用超声波清洗机 清洗3min，再用无菌水冲洗3?4次，将处理好的嫩芽接种到MS+6-BA0. 5mg/L+IBA0. lmg/ L+不同浓度处理（0、0. 3、0. 5、0. 7、1.0g/L)的聚乙烯吡咯烷酮（PVP)的培养基中进行培 养，每升培养基附加30g蔗糖，8g琼脂，每个三角瓶接3个芽，每处理15瓶，然后放置在光 照16h/d、光照20001u X，26°C条件下进行培养，14d后分别调查污染率、褐化率、成活率，得 出烟富6号的初代培养是最适宜的培养基为MS+6-BA0. 5mg/L+IBA0. lmg+PVP500mg/L (蔗糖 30g/L，琼脂 8g/L);
[0025] 步骤二，继代培养
[0026] 将获得的无菌外植体接种到含有不同浓度6-BA行继代培养，每升附加30g蔗糖， 8g琼脂，每瓶3株，每个处理10瓶，重复3次，烟富6号的最优培养基为，即MS+6-BA0. 5mg/ L+IBAO. lmg/L (琼脂 8g/L，光照 20001ux);
[0027] 步骤三，生根培养
[0028] 选择继代培养获得的生长健壮，高度大于1. 5cm的植株，生长时间为20天的芽 子，接种于1/2MS+不同浓度IBA处理（0、1.0、0. 9、1.0、1. lmg/L)的生根培养中进行生 根培养，每瓶接种3个，每个处理10瓶，重复3次，得到烟富6号最适宜的生根培养基为 1/2MS+IBA1. Omg/L (蔗糖 30g/L，琼脂 8g/L);
[0029] 步骤四，炼苗移栽
[0030] 当组培苗根长度达到2cm后，移到室外遮阴炼苗10?12天左右，然后将培养容器 瓶口打开，自然光下进行开瓶炼苗2?4天后，将生根苗从培养基中取出，放入浓度为0. 1% 多菌灵溶液中浸泡5min，并把根部多余的培养基清洗干净，最后用清水冲洗2?3次，然后 移栽到容量相同的不同基质处理（纯锯末、锯末+基质、纯基质、基质+珍珠岩）的营养钵 中，移栽苗的管理方式为：将生根苗在遮阴网下进行管理，第一周采用浓度为〇. 1 %多菌灵 溶液进行喷灌，第二周每天用水喷灌一次，保持移栽基质湿润透气。于14天后统计炼苗移 栽成活率，得出用纯锯末的炼苗移栽成活率最好。
[0031] 通过以下的实验和数据对本发明的原理做进一步的说明：
[0032] 1、参考表1不同浓度PVP处理对外植体生长的影响；
[0033] 表1不同浓度PVP处理对外植体生长的影响
[0034]
【权利要求】
1. 一种苹果品种烟富6号组培快繁的方法，其特征在于，该苹果品种烟富6号组培快繁 的方法包括以下步骤： 步骤一，以苹果品种烟富6号为材料，用超声波清洗机清洗3min，再用无菌水冲洗3? 4次，将处理好的嫩芽接种到聚乙烯吡咯烷酮500mg/L的培养基中进行培养；每升培养基加 3〇g蔗糖，8g琼脂，然后放置在光照16h/d、光照20001u X，26°C条件下进行培养； 步骤二，将获得的无菌外植体接种到MS+6-BA0. 5mg/L+IBA0. lmg/L，光照20001ux的培 养基中进行继代培养，每升培养基中加30g蔗糖，8g琼脂； 步骤三，选择继代培养获得的生长健壮，高度大于1. 5cm的植株，生长时间为20天的芽 子，接种于1/2MS+IBA1. Omg/L生根培养基中进行生根培养，每升培养基中附加30g蔗糖。
2. 如权利要求1所述的苹果品种烟富6号组培快繁的方法，其特征在于，在步骤五中， 在步骤一用超声波清洗机清洗之前，以苹果品种烟富6号为材料，选择生长健壮无病虫害 的母树，于3月份剪取1年生枝条，放置25°C的温室内进行水培，水培为每升水含有30g蔗 糖，每隔3d换一次水并剪掉水培枝条的旧剪口，当水培的一年生枝条上的芽抽生为1. 5? 2. 0cm时，剪取嫩芽，去除展开叶片，在自来水下冲洗6?8h，用75%酒精处理8s，0. 1%升 萊处理7min。
3. 如权利要求1所述的苹果品种烟富6号组培快繁的方法，其特征在于，在步骤五中， 在步骤三的生根培养步骤之后，组培苗根长度达到2cm，移到室外遮阴炼苗10?12天，然后 将培养容器瓶口打开，自然光下进行开瓶炼苗2?4天后，将生根苗从培养基中取出，放入 浓度为〇. 1 %多菌灵溶液中浸泡5min，并把根部多余的培养基清洗干净，最后用清水冲洗 2?3次，然后用纯锯末移栽到的营养钵中。
4. 如权利要求3所述的苹果品种烟富6号组培快繁的方法，其特征在于，在步骤五中， 移栽苗的管理方式为：移栽后将生根苗在遮阴网下进行管理，第一周采用浓度为〇. 1 %多 菌灵溶液进行喷灌，第二周每天用水喷灌一次，保持移栽基质湿润透气，待生根苗抽生出新 芽之后即移出遮阴网。
【文档编号】A01G31/00GK104054549SQ201410333455
【公开日】2014年9月24日 申请日期:2014年7月14日 优先权日:2014年7月14日
【发明者】韩明玉, 王超, 张东, 陈锡龙, 韩静, 赵彩平 申请人:西北农林科技大学