一种飞扬草组织培养的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明研究了一种飞扬草组织培养的快速繁殖方法，包括飞扬草无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根诱导、炼苗移栽等步骤，本发明采用组织培养方法可以培育优良品种，增殖系数高，操作简单可控，短期内获得大量的飞扬草幼苗。
【专利说明】 一种飞扬草组织培养的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及飞扬草组织培养的快繁方法，属于植物【技术领域】。
【背景技术】
[0002]飞扬草，EupHorbia Airte，又名乳籽草、飞相草、大飞扬，大戟科，草本，产于江西、湖南、福建、台湾、广东、广西、海南、四川、贵州和云南。生于路旁、草丛、灌丛及山坡，多见于砂质土。分布于世界热带和亚热带。辛、酸，凉；有小毒。归肺、膀胱、大肠经。清热解毒，利湿止痒，通乳。用于肺痈，乳痈，疔疮肿毒，牙疳，痢疾，泄泻，热淋，血尿，湿疹，脚癣，皮肤瘙痒，产后少乳，目前对飞扬草的使用皆采用野外采集，利用率低，组织培养方法可以提供大规模种苗。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是提供一种飞扬草植株再生的快速繁殖方法，本发明采用组织培养方法可以培育优良品种，增殖系数高，操作简单可控，短期内获得大量的飞扬草幼苗。
[0004]本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:
取飞扬草幼嫩的叶片，流水冲洗33min，超净工作台上过氧化氢消毒处理13min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的飞扬草幼嫩叶片接入KM-8P+ZT1.0mg/L+NAA0.lmg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖的培养基中进行愈伤组织诱导，pH5.8，光照强度ΙΟΟΟΙχ，光照时间8h/d，温度24±2°C，诱导出来的愈伤组织放入培养基KM-8P+ZT1.0-1.2mg/L+IBA0.3-0.4mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照30001x，温度24±2°C，分化出来的芽苗接入MS+S-33070.8-1.0mg/L培养基中进行生根诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照12000Ix，温度24±2°C，待试管苗长约5cm，根长约2cm时，取出放入红壤土 --腐殖土 =3:1，栽植一周后喷施3倍的MS溶液于叶面，自动喷雾保持水分和湿度，温度控制在30°C，光照ΙΟΟΟΟΙχ，光期16h，一个月后统计成活率。
[0005]采用本发明制备的飞扬草成活率高，周期短，产量大，能耗少，利于大规模种植。
[0006]下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0007]实施例1
取飞扬草幼嫩的叶片，流水冲洗33min，超净工作台上过氧化氢消毒处理13min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的飞扬草幼嫩叶片接入KM-8P+ZT1.0mg/L+NAA0.lmg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖的培养基中进行愈伤组织诱导，pH5.8，光照强度ΙΟΟΟΙχ，光照时间8h/d，温度24±2°C，诱导出来的愈伤组织放入培养基KM-8P+ZT1.0mg/L+IBA0.3mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照30001x，温度24±2°C，分化出来的芽苗接入MS+S-33070.8mg/L培养基中进行生根诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照120001x，温度24 ±2 °C，待试管苗长约5cm，根长约2cm时，取出放入红壤土:腐殖土 =3:1，栽植一周后喷施3倍的MS溶液于叶面，自动喷雾保持水分和湿度，温度控制在30°C，光照ΙΟΟΟΟΙχ,光期16h，一个月后统计成活率，成活率87%。
[0008]实施例2
取飞扬草幼嫩的叶片，流水冲洗33min，超净工作台上过氧化氢消毒处理13min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的飞扬草幼嫩叶片接入KM-8P+ZT1.0mg/L+NAA0.lmg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖的培养基中进行愈伤组织诱导，pH5.8，光照强度ΙΟΟΟΙχ，光照时间8h/d，温度24±2°C，诱导出来的愈伤组织放入培养基KM-8P+ZT1.2mg/L+IBA0.4mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照30001x，温度24±2°C，分化出来的芽苗接入MS+S-33071.0mg/L培养基中进行生根诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照120001x，温度24 ±2 °C，待试管苗长约5cm，根长约2cm时，取出放入红壤土:腐殖土 =3:1，栽植一周后喷施3倍的MS溶液于叶面，自动喷雾保持水分和湿度，温度控制在30°C，光照ΙΟΟΟΟΙχ,光期16h，一个月后统计成活率，成活率89%。
[0009]实施例3
取飞扬草幼嫩的叶片，流水冲洗33min，超净工作台上过氧化氢消毒处理13min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的飞扬草幼嫩叶片接入KM-8P+ZT1.0mg/L+NAA0.lmg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖的培养基中进行愈伤组织诱导，pH5.8，光照强度ΙΟΟΟΙχ，光照时间8h/d，温度24±2°C，诱导出来的愈伤组织放入培养基KM-8P+ZT1.2mg/L+IBA0.3mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照30001x，温度24±2°C，分化出来的芽苗接入MS+S-33071.0mg/L培养基中进行生根诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照120001x，温度24 ±2 °C，待试管苗长约5cm，根长约2cm时，取出放入红壤土:腐殖土 =3:1，栽植一周后喷施3倍的MS溶液于叶面，自动喷雾保持水分和湿度，温度控制在30°C，光照ΙΟΟΟΟΙχ,光期16h，一个月后统计成活率，成活率91%。
【权利要求】
1.一种飞扬草组织培养的快速繁殖方法，包括飞扬草无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根诱导、炼苗移栽，其主要步骤如下: (I)取飞扬草幼嫩的叶片，对其进行消毒处理； (2 )取步骤(I)消毒处理过的飞扬草幼嫩叶片接入KM-8P+ZT1.0mg/L+NAA0.1mg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖的培养基中进行愈伤组织诱导，pH5.8，光照强度ΙΟΟΟΙχ，光照时间8h/d，温度 24±2°C ; (3)取步骤(2)诱导出来的愈伤组织放入培养基KM-8P+ZT1.0-1.2mg/L+IBA0.3-0.4mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L,琼脂7g/L，ρΗ5.8，光照30001χ，温度 24±2°C ； (4)取步骤(3)分化出来的芽苗接入MS+S-33070.8-1.0mg/L培养基中进行生根诱导，附加蔗糖 20g/L，琼脂 7g/L，ρΗ5.8，光照 120001χ，温度 24±2°C ； (5)取步骤(4)的试管苗进行炼苗移栽。
2.按照权利要求1所述的一种飞扬草组织培养的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(I)中所述飞扬草无菌叶片的获得为，取飞扬草幼嫩的叶片，流水冲洗33min，超净工作台上过氧化氢消毒处理13min，无菌水冲洗5次。
3.按照权利要求1所述的一种飞扬草组织培养的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(5)中飞扬草炼苗移栽的方法为待试管苗长约5cm，根长约2cm时，取出放入红壤土:腐殖土=3:1，栽植一周后喷施3倍的MS溶液于叶面，自动喷雾保持水分和湿度，温度控制在30°C，光照ΙΟΟΟΟΙχ，光期16h，一个月后统计成活率。
【文档编号】A01H4/00GK104255523SQ201410540657
【公开日】2015年1月7日 申请日期:2014年10月14日 优先权日:2014年10月14日
【发明者】刘东锋, 杨成东 申请人:南京帝道农业科技有限公司