一种云芝葡聚糖与盐酸吗啉胍的抗病毒组合物的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种含有云芝葡聚糖与盐酸吗啉胍的抗病毒组合物，所述抗病毒组合物可用于防治由植物病毒引起的植物病毒病，且能够促进作物生长、提高植物抗病性。经实验证明，该制剂对黄瓜花叶病毒病和烟草花叶病毒病具有良好的预防和治疗作用，且对人畜、环境高度安全，符合当前农药发展的方向，具有良好的开发应用潜力。
【专利说明】-种云芝葡聚糖与盐酸吗嘟舰的抗病毒组合物
【技术领域】
[0001] 本发明涉及农药领域，特别是农用抗病毒剂领域；具体而言，涉及一种农用抗病毒 组合物及其制备方法和应用，特别是涉及一种含有云芝葡聚糖与盐酸吗晰脈的抗病毒组合 物。 技术背景
[0002] 植物病毒病是农业生产中一类种类繁多、发生普遍、危害严重的病害。其中，黄瓜 花叶病毒病（化州mber mosaic virus，CMV)能侵染千余种单、双子叶植物，可经闽虫和种子 传播，是寄主范围最多、分布最广、最具经济重要性的植物病毒之一。作物感染CMV后发病 流行速度极快，生长发育停滞，严重影响农作物的产量和质量，造成严重的经济损失。
[0003] 目前，对病毒病害的控制主要通过种植无毒种子、脱毒苗木和繁殖材料，清除感病 植株及其传毒介体，加强栽培管理等措施，而至今生产上尚无有效的防治药剂。近20年来， 随着天然产物化学、药理学研究的不断深入，对多糖的研究引起国内外学者的极大兴趣。
[0004] 真菌多糖是指各种真菌的子实体和菌丝体所产生的一类代谢产物，一般由10个 W上的单糖通过糖巧键连接而成，具有抗细菌、抗病毒的功能。
[0005] 云芝葡聚糖作为真菌多糖的一种，具有抑制肿瘤，抗溃瘍，抗真菌、霉菌和病毒等 多种药理作用。
[0006] 盐酸吗晰脈化学名称为；N - N - (2-脈基一己亚氨基）一吗晰盐酸盐。分子式： CeHnNsO ?肥1 ;分子量；207. 66 ;该化合物主要用于流感病毒及疮疹病毒感染。对多种病毒 (包括流感病毒、副流感病毒、鼻病毒、冠状病毒、腺病毒等）有抑制作用。在植物上也具有 抗病毒的作用。
【发明内容】
[0007] 本发明的目的在于，克服云芝葡聚糖和盐酸吗晰脈单独使用效果较差，容易产生 抗性的缺点。两者按一定比例复配使用具有协同增效作用，不容易产生抗性，进而提供了一 种高效，低毒，低残留，环境友好，高性价比的抗病毒组合物。
[0008] 本发明是该样实现的：
[0009] -种含云芝葡聚糖和盐酸吗晰脈的抗病毒剂，其特征在于，该抗病毒剂由W下原 料按重量百分比制成：云芝葡聚糖；1%?7%，盐酸吗晰脈0. 5?5%，表面活性剂；2%? 6%，抗冻剂；1%?5%，防腐剂；0. 1%?0.5%，稳定剂；1%?3%，余量为水，原料的重量 百分比之和为100%。
[0010] 优选地，云芝葡聚糖和盐酸吗晰脈的重量比为1 : 1-4 : 1;更优选二者的重量比 为 3 ;1 或 4:1。
[0011] 所述的表面活性剂为焼基酷聚氧己帰離类、苯己基酷聚氧己帰離类、壬基酷聚氧 己帰離类中的其中一种；
[0012] 所述的抗冻剂为己二醇或丙二醇；
[0013] 所述的稳定剂为液体顿锋或液体巧锋；
[0014] 所述的防腐剂为苯甲酸、苯甲酸轴、山梨酸、山梨酸钟、丙酸巧其中一种。
[0015] 进一步地，本发明还涉及上述抗病毒剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法包 括W下按配方称取云芝葡聚糖和盐酸吗晰脈溶解于适量水中，加入配方量的表面活性剂、 抗冻剂、防腐剂和稳定剂，并加水补足到100%，揽拌均匀，即得云芝葡聚糖与盐酸吗晰脈的 抗病毒剂。
[0016] 优选地，所述云芝葡聚糖通过如下方法制得：
[0017] 步骤一，将云芝子实体进行干燥处理，置于高速组织捣碎机中充分捣碎，制成云芝 粉，过40目筛；
[0018] 步骤二，将采过筛后的云芝粉用酶-超声波联用法提取云芝葡聚糖，提取方法是： 称取一定量的云芝粉于20倍体积的水中，加入浓度为1.5%的纤维素酶溶液，在温度为 55C，pH为6. 5的条件下，酶解20min，随后超声提取20min ;
[0019] 步骤H，将提取液过滤并减压浓缩，除去蛋白，并用活性炭进行脱色处理，然后将 滤液离也得上清液，上清液中加入浓度为95%的己醇进行沉淀，沉淀物用无水己醇进行滤 洗，真空干燥得到云芝葡聚糖。
[0020] 进一步地，本发明还涉及所述含云芝葡聚糖与盐酸吗晰脈的抗病毒剂用于防治植 物病毒病的用途。
[0021] 所述植物病毒为；黄瓜花叶病毒（化州mber Mosaic Virus)，烟草花叶病毒 (Tobacco mosaic virus)。
[0022] 除非另有说明，本说明书中的"％ "均为重量百分比。
[0023] 本发明制备的含云芝葡聚糖与盐酸吗晰脈的抗病毒剂，可用于防治由植物病毒引 起的植物病毒病，且能够促进作物生长、提高植物抗病性。经实验证明，该制剂对黄瓜花叶 病毒病（化州mber mosaic virus, CMV)和烟草花叶病毒病具有良好的预防和治疗作用，且 对人畜、环境高度安全，符合当前农药发展的方向，具有良好的开发应用潜力。
【具体实施方式】
[0024] 经 申请人:的研究表明，云芝葡聚糖作为生物效应调节剂，不仅可W通过诱导植物 增强自身防御反应，对病毒产生抗性；而且能和病毒表面蛋白外壳直接结合，从而直接抑制 病毒的生长繁殖；还具有无毒、易被降解、对环境无污染的优良特性，该使其有可能作为一 种新型绿色农药，在农业生产中发挥重要作用。盐酸吗晰脈作为医药用的抗病毒剂，在农业 上使用安全，效果优良。二者复配使用具有协同增效作用，效果好，无抗性。
[0025] W下结合实施例对本发明作进一步的详细说明，需要说明的是，该些实施例仅供 本领域的技术人员充分理解本发明，本发明不限于该些实施例。
[0026] 在W下的实施例中，云芝葡聚糖母粉由西北农林科技大学植保学院提供，含量 40 %，也可W按W下步骤制备：
[0027] 步骤一，将云芝子实体进行干燥处理，置于高速组织捣碎机中充分捣碎，制成云芝 粉，过40目筛；
[0028] 步骤二，将采过筛后的云芝粉用酶-超声波联用法提取云芝葡聚糖，提取方法是：
[0029] 称取一定量的云芝粉于20倍体积的水中，加入浓度为1. 5%的纤维素酶溶液，在 温度为55°C，抑为6. 5的条件下，酶解20min，随后超声提取20min ;
[0030] 步骤H，将提取液过滤并减压浓缩，除去蛋白（Sevag法），并用活性炭进行脱色处 理，然后将滤液离也得上清液，上清液中加入浓度为95%的己醇进行沉淀，沉淀物用无水己 醇进行滤洗，真空干燥得到云芝葡聚糖。
[0031] 盐酸吗晰脈（西安近代农用化学药品有限公司生产）。
[0032] 制备实施例1 ; (1000公斤）
[0033] 云芝葡聚糖10公斤，盐酸吗晰脈50公斤，辛基酷聚氧己帰離30公斤，己二醇15 公斤，苯甲酸3公斤，顿锋12公斤，水880公斤。
[0034] 称取10公斤云芝葡聚糖和50公斤盐酸吗晰脈溶解于400公斤水中，再加入表面 活性剂辛基酷聚氧己帰離30公斤，抗冻剂己二醇15公斤，防腐剂苯甲酸3公斤，稳定剂顿 锋12公斤，补足剩余的水480公斤，加完上述物料后揽拌1小时，即得到所需产品。
[0035] 制备实施例2 ; (1000公斤）
[0036] 云芝葡聚糖50公斤，盐酸吗晰脈20公斤，壬基酷聚氧己帰離40公斤，丙二醇30 公斤，苯甲酸轴2公斤，液体巧锋15公斤，水843公斤。
[0037] 称取50公斤云芝葡聚糖和20公斤盐酸吗晰脈溶解于400公斤水中，再加入表面 活性剂壬基酷聚氧己帰離40公斤，抗冻剂丙二醇30公斤，防腐剂苯甲酸轴2公斤，稳定剂 液体巧锋15公斤，补足剩余的水443公斤，加完上述物料后揽拌1小时，即得到所需产品。 [00測药效试验
[003引室内生物学试验：
[0040] 本发明组合物W云芝葡聚糖与盐酸吗晰脈不同比列组合为有效成分，经室内生物 测定试验发现，两者复配之后对抗性植物病毒病有明显的协同增效作用，防效均比相应的 单剂药剂效果好。具体用W下生物测定实例加W说明。
[0041] 实例一云芝葡聚糖与盐酸吗晰脈不同比列组合对黄瓜花叶病毒（CMV)的作用机 理及防治效果
[004引 1、试验药剂：
[0043] 云芝葡聚糖与盐酸吗晰脈分别W 1 : 1、3 : 1、4 : 1的重量比的抗病毒组合物， 同时设单剂处理；
[0044] 供试作物：
[0045] 觅色黎烟lenopodium amaranticolor)，由西北农林科技大学植物保护学院病理 实验室提供；
[0046] 黄瓜花叶病毒（化州mber Mosaic Virus)简称CMV,由西北农林科技大学植物保护 学院病理实验室提供。
[0047] 2、试验方法；参照《农药生物测定试验准则NY/T1156. 2-2006》，本试验分别采用 半叶枯斑法和盆栽试验。
[0048] 4、数据统计分析：用SAS6. 12统计软件进行分析。根据试验数据计算出对病毒病 的防效（％ )，求出毒力回归方程式、相关系数（r)、EC50和共毒系数。
[0049] 5、评价方法：参照《农药生物测定试验准则NY/T 1156. 2-2006》，根据 Sun&Johnson(1960)的共毒系数法（CTC)来评价药剂混用的增效作用，即CTC《80为枯抗 作用，80<CTC<120为相加作用，CTC > 120为增效作用。
[0050] 6、结果与分析
[0051] 云芝葡聚糖与盐酸吗晰脈二者不同比例的混配组合对黄瓜花叶病毒的毒力测定 结果见表1。
[0052] 表1云芝葡聚糖与盐酸吗晰脈二者不同比例的混配组合对黄瓜花叶病毒的毒力 测定结果
[0053]
【权利要求】
1. 一种含云芝葡聚糖和盐酸吗啉胍的抗病毒剂，其特征在于，该抗病毒剂由以下原料 按重量百分比制成：云芝葡聚糖：1%?7%，盐酸吗啉胍0.5?5%，表面活性剂：2%? 6%，抗冻剂：1%?5%，防腐剂：0. 1 %?0. 5%，稳定剂：1%?3%，余量为水，原料的重量 百分比之和为100%。
2. 根据权利要求1所述的抗病毒剂，其特征在于，云芝葡聚糖和盐酸吗啉胍的重量比 为 1 : 1-4 : 1。
3. 根据权利要求2所述的抗病毒剂，其特征在于，云芝葡聚糖和盐酸吗啉胍的重量比 为 3 :1 或 4:1。
4. 根据权利要求1所述的抗病毒剂，其特征在于，所述的表面活性剂为烷基酚聚氧乙 烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚类、壬基酚聚氧乙烯醚类中的其中一种；所述的抗冻剂为乙二 醇或丙二醇；所述的稳定剂为液体钡锌或液体钙锌；所述的防腐剂为苯甲酸、苯甲酸钠、山 梨酸、山梨酸钾、丙酸钙其中一种。
5. 根据权利要求1至4任一所述的抗病毒剂的制备方法，其特征在于， 进一步地，本发明还涉及上述抗病毒剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法为按配 方称取云芝葡聚糖和盐酸吗啉胍溶解于适量水中，加入配方量的表面活性剂、抗冻剂、防腐 剂和稳定剂，并加水补足到100%，搅拌均匀，即得云芝葡聚糖与盐酸吗啉胍的抗病毒剂。
6. 根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述云芝葡聚糖通过如下方法制得： 步骤一，将云芝子实体进行干燥处理，置于高速组织捣碎机中充分捣碎，制成云芝粉， 过40目筛； 步骤二，将采过筛后的云芝粉用酶-超声波联用法提取云芝葡聚糖，提取方法是：称取 一定量的云芝粉于20倍体积的水中，加入浓度为1. 5%的纤维素酶溶液，在温度为55°C，pH 为6. 5的条件下，酶解20min，随后超声提取20min ; 步骤三，将提取液过滤并减压浓缩，除去蛋白，并用活性炭进行脱色处理，然后将滤液 离心得上清液，上清液中加入浓度为95%的乙醇进行沉淀，沉淀物用无水乙醇进行滤洗，真 空干燥得到云芝葡聚糖。
7. 根据权利要求1至4任一所述的抗病毒剂用于防治植物病毒病的用途。
8. 根据权利要求7的用途，其特征在于，所述植物病毒为：黄瓜花叶病毒（Cucumber Mosaic Virus)，烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus)。
【文档编号】A01P1/00GK104397005SQ201410654140
【公开日】2015年3月11日 申请日期:2014年11月17日 优先权日:2014年11月17日
【发明者】唐满仓, 马玉明, 叶龙江, 唐少燃 申请人:陕西恒田化工有限公司