本发明涉及一种黄金柏初代培养方法，属于苗木繁殖技术领域。
背景技术：
黄金柏(Cupressus macrocarpa Goldcrest)又称金冠大果柏木，金叶桧。为柏科柏木属的一种色叶植物。常绿小灌木，产地自美国加州。性喜冷凉，耐高温。树形呈球形。尤以霜后色彩最为美丽，貌似黄金故名为黄金柏。播种扦插是其中的一种繁殖方式。可作为盆栽，庭院绿化，街道，公路两侧的栽植树种，也是是高速公路中隔离带绿化树种的最新替代树种，还是住家院子向阴处的优先选择的树木，是我国重要的园林柏类。黄金柏为新引树种，为进一步加快黄金柏的推广应用，希望通过对黄金柏芽诱导快繁技术的研究，促进黄金柏扩繁技术的发展。
目前现有技术中，黄金柏属于较易污染品种，其启动培养的污染率往往高达50％以上，并且芽诱导率较低，无法满足培养要求。
技术实现要素：
发明目的：为了解决上述技术问题，本发明提供了一种黄金柏初代培养方法。
技术方案：为了实现上述发明目的，本发明公开了一种黄金柏初代培养方法，包括以下步骤：
(1)培养基配制：选择基础培养基，加入蔗糖和琼脂，再加入6-苄氨基腺嘌呤和萘乙酸，调节pH值，灭菌，即得；
(2)外植体采集：选择带腋芽和顶芽的黄金柏茎作为外植体，剪取枝条时每个枝条上存留至少一个侧芽；
(3)外植体的消毒：取上述外植体，清洗，消毒；
(4)接种培养：将步骤(3)所得外植体旧伤口剪去，插入步骤(1)所得培养基中，置于培养室内培养。
作为优选，所述步骤(1)中基础培养基为MS培养基。
作为另一种优选，所述步骤(1)中蔗糖和琼脂的浓度分别为30g/L和7g/L。
作为另一种优选，所述步骤(1)中6-苄氨基腺嘌呤的浓度为0.8-1.2mg/L，所述萘乙酸的浓度为0.1-0.3mg/L。
作为另一种优选，所述步骤(1)中pH值为5.8～6.0，灭菌条件为：121℃高压下灭菌25min。
作为另一种优选，所述步骤(3)中清洗的方法为：先用洗衣粉加水漂洗3-5遍，再用自来水冲洗，直至外植体干净。
作为另一种优选，所述步骤(3)中消毒的方法为：在无菌环境下，依次用75％的酒精漂洗30s，无菌水漂洗1次，升汞进行5min的漂洗，无菌水漂洗3次后，残留的水分用无菌滤纸吸取。
作为另一种优选，所述步骤(4)中培养的条件为：1600Lx的光照强度，每天进行16h光照，温度稳定在(25±2)℃，以及75％的湿度。
技术效果：相对于现有技术，本发明方法不仅具有现有技术中组培繁殖的优势，还通过特定的消毒方法，与其它处理方法相结合，能够显著降低黄金柏组培中的污染率，解决其较易污染的问题，同时还能显著提高芽诱导率。
具体实施方式
实施例1
(1)培养基配制：选择MS培养基作为基础培养基，加入蔗糖和琼脂，其浓度分别为30g/L和7g/L，再加入6-苄氨基腺嘌呤和萘乙酸，其浓度分别为0.8mg/L和0.3mg/L，调节pH值为5.8～6.0，121℃高压下灭菌25min，即得；
(2)外植体采集：选择带腋芽和顶芽的黄金柏茎作为外植体，剪取枝条时每个枝条上存留至少一个侧芽；
一般选用遗传性状品质优越发育良好的新萌芽枝条，距地面一半处的芽比较好，选择发育条件好，除了顶芽之外较紧实未萌芽的作为实验本体，剪取枝条时每个枝条上存留至少一个侧芽。而本次实验所采用的材料黄金柏，由于放置过几天，本发明组培时选取带有腋芽幼嫩的茎作外植体。
(3)外植体的消毒：取上述外植体，清洗，方法为：先将外植体放入烧杯中，加入洗衣粉水漂洗3-5遍，再用自来水冲洗1h直至外植体干净；消毒，方法为：开启紫外灯，在无菌室的工作台下进行消毒，在实验工作台上将冲刷洁净的外植体用75％的酒精漂洗30s，然后用无菌水漂洗1次，再用1％次氯酸钠进行浸泡15min，然后再用灭菌水冲洗3次，最后再用升汞进行5min的漂洗，然后用无菌水漂洗3次后，残留的水分用无菌滤纸吸取；
(4)接种培养：将步骤(3)所得外植体旧伤口剪去，插入步骤(1)所得培养基中，置于培养室内培养，条件为：1600Lx的光照强度，每天进行16h光照，温度稳定在(25±2)℃，以及75％的湿度。
实施例2：
(1)培养基配制：选择MS培养基作为基础培养基，加入蔗糖和琼脂，其浓度分别为30g/L和7g/L，再加入6-苄氨基腺嘌呤和萘乙酸，其浓度分别为1.2mg/L和0.1mg/L，调节pH值为5.8～6.0，121℃高压下灭菌25min，即得；
(2)外植体采集：选择带腋芽和顶芽的黄金柏茎作为外植体，剪取枝条时每个枝条上存留至少一个侧芽；
一般选用遗传性状品质优越发育良好的新萌芽枝条，距地面一半处的芽比较好，选择发育条件好，除了顶芽之外较紧实未萌芽的作为实验本体，剪取枝条时每个枝条上存留至少一个侧芽。而本次实验所采用的材料黄金柏，由于放置过几天，本发明组培时选取带有腋芽幼嫩的茎作外植体。
(3)外植体的消毒：取上述外植体，清洗，方法为：先将外植体放入烧杯中，加入洗衣粉水漂洗3-5遍，再用自来水冲洗1h直至外植体干净；消毒，方法为：开启紫外灯，在无菌室的工作台下进行消毒，在实验工作台上将冲刷洁净的外植体用75％的酒精漂洗30s，然后用无菌水漂洗1次，再用1％次氯酸钠进行浸泡15min，然后再用灭菌水冲洗3次，最后再用升汞进行5min的漂洗，然后用无菌水漂洗3次后，残留的水分用无菌滤纸吸取；
(4)接种培养：将步骤(3)所得外植体旧伤口剪去，插入步骤(1)所得培养基中，置于培养室内培养，条件为：1600Lx的光照强度，每天进行16h光照，温度稳定在(25±2)℃，以及75％的湿度。
实施例3：
(1)培养基配制：选择MS培养基作为基础培养基，加入蔗糖和琼脂，其浓度分别为30g/L和7g/L，再加入6-苄氨基腺嘌呤和萘乙酸，其浓度分别为1.0mg/L和0.2mg/L，调节pH值为5.8～6.0，121℃高压下灭菌25min，即得；
(2)外植体采集：选择带腋芽和顶芽的黄金柏茎作为外植体，剪取枝条时每个枝条上存留至少一个侧芽；
一般选用遗传性状品质优越发育良好的新萌芽枝条，距地面一半处的芽比较好，选择发育条件好，除了顶芽之外较紧实未萌芽的作为实验本体，剪取枝条时每个枝条上存留至少一个侧芽。而本次实验所采用的材料黄金柏，由于放置过几天，本发明组培时选取带有腋芽幼嫩的茎作外植体。
(3)外植体的消毒：取上述外植体，清洗，方法为：先将外植体放入烧杯中，加入洗衣粉水漂洗3-5遍，再用自来水冲洗1h直至外植体干净；消毒，方法为：开启紫外灯，在无菌室的工作台下进行消毒，在实验工作台上将冲刷洁净的外植体用75％的酒精漂洗30s，然后用无菌水漂洗1次，再用1％次氯酸钠进行浸泡15min，然后再用灭菌水冲洗3次，最后再用升汞进行5min的漂洗，然后用无菌水漂洗3次后，残留的水分用无菌滤纸吸取；
(4)接种培养：将步骤(3)所得外植体旧伤口剪去，插入步骤(1)所得培养基中，置于培养室内培养，条件为：1600Lx的光照强度，每天进行16h光照，温度稳定在(25±2)℃，以及75％的湿度。
实验例
取同一批黄金柏进行初代培养，分别设为对照1组、对照2组、实施例1、2和3组；
对照1组，按照常规的现有技术进行培养；
对照2组，按照实施例3方法，去掉消毒方法中“再用1％次氯酸钠进行浸泡15min，然后再用灭菌水冲洗3次”的步骤；
实施例1、2和3组分别按照本发明实施例1、2和3方法进行培养；
各组培养时间为20天，考察最终污染率、死亡率以及芽诱导率，结果见下表1
表1各组培养结果考察
由上表1结果可得，相比较对照1组和对照2组，本发明培养方法，能够显著降低黄金柏的污染率和死亡率，有效解决了现有技术中黄金柏污染率高达50％以上的缺陷，并且还能有效提高芽诱导率。