本发明涉及属于养殖技术领域，尤其涉及一种巴马油鱼杂交三倍体人工繁殖技术。
背景技术：
巴马油鱼原名巴马繐唇鲃（crossocheilusbamaensisfang,sp.nov.）、巴马拟缨鱼（pseudocrossocheilusbamaensisfang），主产于中国广西巴马县境内的盘阳河，以及红水河干流，是广西江河土著名贵小型经济鱼类。其肉质鲜美、食用价值极高、而且具有一定的药用价值，被誉为“水下人参”，是中国著名长寿之乡广西巴马县的“巴马三宝”之一。
巴马油鱼栖息、生存、生长和繁殖对环境条件的要求特别，人工养殖中性腺发育慢，雌、雄鱼性腺发育不同步，至今无法进行规模化人工养殖。目前巴马油鱼食用鱼市场售价在200元/kg以上，且有价无市（鱼）。旺盛的市场需求，急需开展其规模化人工繁育，通过人工繁育苗种的推广养殖，缓解其市场供求矛盾。1982年以来，广西区内多个部门先后开展了与巴马油鱼相关的初步研究试验，但至今仍未能突破其规模化人工繁殖关键技术，鱼鲜市场上巴马油鱼养殖产品尚处在空白阶段。加上多年来人工滥捕、盗捕，江河鱼种质资源接近枯竭。开展巴马油鱼人工驯化养殖及规模化繁殖技术研究，向社会批量供应人工繁育苗种，有助于带动巴马油鱼养殖业的发展和贫困山区农民养殖致富，符合国家目前和未来若干年的产业规划和供给侧改革方向；对实现巴马油鱼增殖放流、保护江河鱼类资源、推动巴马油鱼产业化以及当地旅游观光业的发展有重要意议。
巴马油鱼生长缓慢，种群数量急剧减少，大规模养殖已无种苗提供，贫困山区人民群众迫切需要一种能大规模养殖的优良品种，早日脱贫致富，加上巴马油鱼种群退化严重，急需品种改良，全面提高巴马油鱼的养殖量，多倍体育种是解决改良种群品质及规模繁育的关键手段和方法，由于三倍体育苗的关键是在找出合适的多倍体种苗，通过基因重组，培育出性状优良的多倍体鱼，三倍体体鱼具有生长速度快个体大，肉质好，不育，抗逆行性强，成活率高的特点，人工诱导三倍体育种技术是上世纪60年代开始兴起的一种高科技手段，分为人工诱导雌核（雄核）发育二倍体诱导；人工诱导鱼体三倍体基因，二倍体与四倍体杂交获得三种方法，其中二倍体与四倍体杂交获得三倍体鱼是最简单和最直接有效的方法，选择适宜的四倍体鱼成为选育三倍体鱼的核心，根据对相同科类及亚科类鱼种的染色体比选，选择出相近科和亚科鱼类多倍体染色体鱼作为杂交亲鱼，采用远源杂交技术，从而培育出三倍体杂交巴马油鱼。
技术实现要素：
针对上述问题，本发明提供一种巴马油鱼杂交三倍体人工繁殖技术，可以向社会提供苗种，推广池塘、水库的人工养殖，由于三倍体鱼类的不育性又不破坏种质资源，渔民获得经济效益的同时可对加快渔业创新，改善人民生活，促进农村经济繁荣，不仅可以使贫困山区民众获得能大规模养殖的优良品种，早日脱贫致富，还可以实现规模化养殖，提升巴马油鱼的品质，为巴马油鱼的改良物种提供技术上的支持。
为解决技术问题，本发明采用的技术方案：一种巴马油鱼杂交三倍体人工繁殖技术，包括以下步骤：
（1）鱼池建造
选择在广西巴马县或周边模拟盘阳河内环境建造鱼池，并做好鱼池的消毒杀菌，最后放入盘阳河水或洁净的山泉水及地下河水，并保持一定的流动性，用流水刺激亲鱼。
（2）亲鱼的选择
每年4-6月和9-12月和选择体质健壮、无病无伤，性腺发育良好的巴马油鱼公鱼亲鱼和鲃亚科四倍体亲鱼雌鱼进行人工催产；性成熟的巴马油鱼雄鱼吻部白色珠星明显，手摸有明显的刺突，轻压腹部即有白色浓稠的精液流出；鲃亚科四倍体亲鱼雌鱼腹部膨大，偶见卵巢轮廓，泄殖孔微红，触摸腹部，手感有一定的饱满、柔软度。
选择用成熟的中华倒刺鲃，倒刺鲃及黑脊倒刺鲃作为鲃亚科四倍体亲鱼与巴马油鱼进行杂交。
（3）注射催产剂
鲃亚科四倍体雌亲鱼采用一针注射，注射部位为胸腔；巴马油鱼雄鱼采用一针注射，注射部位为胸腔，注射时避光遮阳；
鲃亚科四倍体雌亲鱼催产剂选择马来酸地欧酮按每公斤体重3-5mg和促黄体素释放激素a2按每公斤体重9-18μg及hcg每公斤1000-1500iu进行肌肉注射，巴马油鱼雄鱼视成熟情况适当减少剂量或不注射；
人工催产时水温控制在18～25℃，注射24小时后施行人工助产。
（4）产卵前亲鱼的管理
亲鱼催产剂注射后，放入建造好的鱼池中，遮光并保持环境安静。
（5）人工授精
亲鱼催产剂注射后24小时进行干法人工授精的方法进行人工授精；受精卵采用脱粘或用人工鱼巢收集受精卵。
（6）人工孵化
将人工授精得到的受精卵经清洗、去除杂质，防霉消毒后，放入孵化池用遮阴网遮阳孵化；保持微流水，孵化水温度保持18-25c°,水体溶氧量5mg/l以上。
（7）苗种培育
鱼苗出膜后3-5天腰点出现，鱼苗平游，投喂专用开口饵料，14天后，逐步过渡到投喂专用全价配合饲料粉料，当体长达到3cm以上，训饲人工捏合配合饲料沉底料。
进一步：所述鱼池的环境可以自己模拟制造，要求：水色、透明度、水温、溶氧、ph值含量与广西巴马县盘阳河水接近。
进一步：所述开口饵料为蛋黄或蛋黄、豆浆混合或采用粉碎到400目的市售蛋白含量43%的鳗鱼料粉料或以上材料的混合料。
进一步：所述催产剂选用促黄体生成素释放激素类似物lrh-a2、马来酸地欧酮dom及hcg。
进一步：所述鲃亚科四倍体亲鱼雌鱼采用一针注射，注射促黄体生成素释放激素类似物lrh-a2＋马来酸地欧酮dom及hcg，剂量9-18uglrh-a2＋3-5mgdom/kg+1000-1500iu/kg。巴马油鱼雄鱼采用一针注射，注射部位为胸腔，巴马油鱼雄鱼巴马油鱼雄鱼视成熟情况适当减少剂量或不注射。
进一步：所述亲鱼催产剂注射后，放入建造好的鱼池中，遮光并保持环境安静，半小时后用流水刺激1-2小时，之后间隔3小时用流水刺激一次。
进一步：所述干法人工授精包括以下步骤：所述干法人工授精包括以下步骤：首先将雌鱼的鱼卵挤入擦干的器皿中，再挤入雄鱼精液，用鸡、鸭毛搅拌均匀，然后加入5%葡萄糖水搅匀，静止1-2分钟，再加入清水搅匀，静止1-2分钟。脱粘采用10%的400目滑石粉水，人工搅拌脱粘30分钟，得脱粘卵。
进一步：所述鱼池孵化水温控制在22-25℃，采用流水孵化，水体溶氧量5mg/l以上。。
进一步：所述鲃亚科四倍体亲鱼选择用成熟的中华倒刺鲃，倒刺鲃及黑脊倒刺鲃作为杂交三倍体亲鱼。
进一步：所述鲃亚科四倍体亲鱼与巴马油鱼可以反交产生。
本发明的有益效果：针对上述问题，本发明提供一种巴马油鱼杂交三倍体人工繁殖技术，可以向社会提供苗种，推广池坝塘、水库的人工养殖，由于三倍体鱼类的不育性又不破坏种质资源，渔民获得经济效益的同时可对加快渔业创新，改善人民生活，促进农村经济繁荣，不仅可以使贫困山区民众获得能大规模养殖的优良品种，早日脱贫致富，还可以实现规模化养殖，提升巴马油鱼的品质，为巴马油鱼的改良物种提供技术上的支持。
具体实施方式
下面实施过程对本发明做进一步说明，以方便技术人员理解。
实施例1:巴马油鱼杂交三倍体人工繁殖技术，包括以下步骤：
（1）鱼池建造
选择在广西巴马县或周边模拟盘阳河内环境建造鱼池，并做好鱼池的消毒杀菌，最后放入盘阳河水或洁净的山泉水及地下河水，并保持一定的流动性，用流水刺激亲鱼。
（2）亲鱼的选择
每年4-6月和9-12月和选择体质健壮、无病无伤，性腺发育良好的巴马油鱼公鱼亲鱼和鲃亚科四倍体亲鱼雌鱼进行人工催产；性成熟的巴马油鱼雄鱼吻部白色珠星明显，手摸有明显的刺突，轻压腹部即有白色浓稠的精液流出；鲃亚科四倍体亲鱼雌鱼腹部膨大，偶见卵巢轮廓，泄殖孔微红，触摸腹部，手感有一定的饱满、柔软度。
选择用成熟的中华倒刺鲃，倒刺鲃及黑脊倒刺鲃作为鲃亚科四倍体亲鱼与巴马油鱼进行杂交。
（3）注射催产剂
鲃亚科四倍体雌亲鱼采用一针注射，注射部位为胸腔；巴马油鱼雄鱼采用一针注射，注射部位为胸腔，注射时避光遮阳；
鲃亚科四倍体雌亲鱼催产剂选择马来酸地欧酮按每公斤体重3mg和促黄体素释放激素a2按每公斤体重12μg及每公斤1200iu进行肌肉注射，巴马油鱼雄鱼视成熟情况适当减少剂量或不注射；
人工催产时水温控制在22℃，注射24小时后施行人工助产。
（4）产卵前亲鱼的管理
亲鱼催产剂注射后，放入建造好的鱼池中，遮光并保持环境安静。
（5）人工授精
亲鱼催产剂注射后24小时进行干法人工授精的方法进行人工授精；受精卵采用脱粘或用人工鱼巢收集受精卵。
（6）人工孵化
将人工授精得到的受精卵经清洗、去除杂质，防霉消毒后，放入孵化池用遮阴网遮阳孵化；保持微流水，孵化水温度保持22c°；用氧气泵向水体充氧，要求水体溶氧量5mg/l以上。
（7）苗种培育
鱼苗出膜后3-5天腰点出现，鱼苗平游，投喂专用开口饵料，14天后，逐步过渡到投喂专用全价配合饲料粉料，当体长达到3cm以上，训饲人工捏合配合饲料沉底料。
以上所述的仅为本发明的较佳实施例，凡在本发明的精神和原则范围内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。