本发明属于农药技术领域，涉及一种用于防治农业害虫的杀虫组合物，更特别涉及将所述杀虫组合物配制成微乳剂，用于玉米粘虫、甘蓝菜青虫、小菜蛾、茶尺蠖、茶蚜、茶小绿叶蝉等农业害虫的防治。
技术背景
植物病虫害的发生和危害是制约农业可持续发展的重要因素，据联合国粮农组织估计，全世界每年因病虫危害造成的农作物损失达20％～40％，由此而导致的经济损失达1200亿美元。我国每年也因病虫害而造成数百亿元的经济损失。因此，防治植物病虫害是确保农业可持续发展的重要途径。
在农业害虫防治方面，化学防治是最主要的一种防治措施，我国杀虫剂生产经历了以无机化合物为主的杀虫剂时代、高效杀虫剂时代、超高效杀虫剂时代以及特异性杀虫剂或“非杀生性”杀虫剂时代四个时期。但长期使用化学农药防治害虫，容易导致3r问题，因此，低毒、低残留、易降解的植物源杀虫剂等生物杀虫剂可以弥补化学农药的不足。目前，已商品化的植物杀虫剂主要有印楝素、苦参碱、苦皮藤素、除虫菊素、鱼藤酮等，相对于化学杀虫剂，可用的植物源杀虫剂产品的种类和数量还比较少，同时，由于植物杀虫剂具有杀虫速度慢、杀虫效果受施药技术影响大、容易分解等缺点，在现有杀虫剂市场中还不具有明显的竞争力。为了发挥植物杀虫剂本身的优势，提高其杀虫效果，提高市场竞争力，通过对植物杀虫材料进行复配，是一个有效的手段。
苦葛属豆科葛属，别名峨眉葛藤，广泛分布于我国西藏、云南、四川、广西等地，资源极为丰富。李彪等和施蕊等研究发现，苦葛正丁醇提取物对玉米螟和菜粉蝶具有一定的拒食和毒杀作用同时，苦葛正丁醇提取物对玉米缢管蚜也具有毒杀作用，是一种潜在的植物源杀虫剂，具有生物农药低毒、低残留、易降解、杀虫速效性强等优点。
苦参碱是由豆科植物苦参的干燥根、植株、果实经乙醇等有机溶剂提取制成的，是生物碱，苦参碱是天然植物性农药,对人畜低毒,是广谱杀虫剂，具有触杀和胃毒作用。对蔬菜刺吸式口器昆虫蚜虫、鳞翅目昆虫菜青虫、茶毛虫、小菜蛾，以及茶小绿叶蝉、白粉虱等都具有理想的防效。将速效性强的苦葛提取物和持效期长的广谱杀虫剂印楝素进行复配，可以提高植物杀虫剂对害虫防治的效果。目前，尚未发现将苦葛提取物与苦参碱进行复配用于农业害虫防治的相关报道。
技术实现要素：
本发明提供包含苦葛提取物和苦参碱的复配杀虫组合物，二者具有增效作用，进一步地，将二者制备成微乳剂，防治甘蓝菜青虫、小菜蛾、玉米粘虫、茶树茶尺蠖、茶蚜、小绿叶蝉等农业害虫。
基于这一目的，本发明的技术方案为：
一种杀虫组合物，其特征在于，所述杀虫组合物中的活性成分为重量比为1:4～4:1苦葛提取物与苦参碱的组合物。
优选地，二者的重量比为1:2～4:1；更优选地，两者的重量比为3:1。
所述的苦葛提取物制备方法为：将苦葛的根剪成l-2cm长的小段，于80℃烘箱中烘干，粉碎过50目筛，收集备用；使用75％乙醇水溶液在70℃下进行回流提取，每次8h，提取3次，收集浸提液，过滤除去残渣，减压浓缩浸提液，收集得到干燥的浸膏；将浸膏加水稀释，用正丁醇萃取，萃取溶剂和浓缩物水液的比例为4：1，萃取液浓缩干燥，浓缩液用ab-8树脂静态吸附过夜；用水和甲醇比例为3：7的混合溶剂洗脱，将洗脱液浓缩干燥，即为苦葛提取物。
进一步地，本发明还提供一种微乳剂，其特征在于，其包含上述杀虫组合物和助剂；其中杀虫组合物的用量为1～20重量％，助剂为溶剂20～40重量％、乳化剂10～25重量％，助溶剂5～15重量％，防冻剂3～5重量％，其余用水补足100重量％。
所述溶剂为甲醇；
所述乳化剂为苯乙烯基苯基聚氧乙烯醚、烷基酚聚氧乙烯醚、多芳基酚聚氧乙烯醚磷酸酯中的一种或者多种的组合；
所述助溶剂为异丙醇、正丁醇的一种或混合物；
所述防冻剂为乙二醇。
优选地，有效成分的用量为5～15重量％；更优选地，有效成分的用量为10重量％；
更进一步，本发明提供上述杀虫组合物和/或微乳剂防治甘蓝菜青虫、小菜蛾、玉米粘虫、茶树茶尺蠖、茶蚜或小绿叶蝉的用途。
除非另有说明，本说明书中的“％”均为“重量百分比”。
本申请微乳剂的制备方法：将计量好的各成分按比例投入乳化剪切机中；高速剪切30分钟，即可得到该产品，稀释后喷雾使用。
有益效果：本发明的杀虫组合物相比单剂具有良好的增效作用，增效系数在130以上。此外，本发明制备的微乳剂是一种水基化的新型环保剂型，药粒微细，易于渗透昆虫体壁，从而对有害昆虫起到更好的毒杀作用。本发明的微乳剂所用有效成分为植物药剂，对非靶标生物和环境安全，对人畜无害，适合在多种作物上使用，能有效地防治甘蓝菜青虫、小菜蛾、玉米粘虫、茶树茶尺蠖、茶蚜、小绿叶蝉等农业害虫。同时，使用混配剂型，相对于单剂来说，杀虫谱广、具有增效作用，且能有效的降低使用成本，降低害虫抗药性。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，本发明用以下具体实例进行说明，但本发明不局限于这些具体实施例。
苦葛提取物制备方法：将苦葛的根剪成l-2cm长的小段，于80℃烘箱中烘干，粉碎过50目筛，收集备用。使用75％乙醇水溶液在70℃下进行回流提取，每次8h，提取3次，收集浸提液，过滤除去残渣，减压浓缩浸提液，收集得到干燥的浸膏。将浸膏加水稀释，用正丁醇萃取，萃取溶剂和浓缩物水液的比例为4：1，萃取液浓缩干燥，浓缩液用ab-8树脂静态吸附过夜。用水和甲醇比例为3：7的混合溶剂洗脱，将洗脱液浓缩干燥，即为苦葛提取物。
一、制备实施例
实施例1：
苦葛提取物2wt％；苦参碱8wt％；甲醇30wt％，苯乙烯基苯基聚氧乙烯醚10wt％；异丙醇10wt％；乙二醇3wt％；余量用水补足。
实施例2：
苦葛提取物2.5wt％；苦参碱7.5wt％；甲醇30wt％，苯乙烯基苯基聚氧乙烯醚10wt％；异丙醇10wt％；乙二醇3wt％；余量用水补足。
实施例3：
苦葛提取物3.3wt％；苦参碱6.7wt％；甲醇30wt％，苯乙烯基苯基聚氧乙烯醚10wt％；异丙醇10wt％；乙二醇3wt％；余量用水补足。
实施例4：
苦葛提取物5wt％；苦参碱5wt％；甲醇30wt％，苯乙烯基苯基聚氧乙烯醚10wt％；异丙醇10wt％；乙二醇3wt％；余量用水补足。
实施例5：
苦葛提取物6.7wt％；苦参碱3.3wt％；甲醇30wt％，苯乙烯基苯基聚氧乙烯醚10wt％；异丙醇10wt％；乙二醇3wt％；余量用水补足。
实施例6：
苦葛提取物7.5wt％；苦参碱2.5wt％；甲醇30wt％，苯乙烯基苯基聚氧乙烯醚10wt％；异丙醇10wt％；乙二醇3wt％；余量用水补足。
实施例7：
苦葛提取物8wt％；苦参碱2wt％；甲醇30wt％，苯乙烯基苯基聚氧乙烯醚10wt％；异丙醇10wt％；乙二醇3wt％；余量用水补足。
实施例8：
苦葛提取物3wt％；苦参碱1wt％；甲醇30wt％，苯乙烯基苯基聚氧乙烯醚10wt％；异丙醇10wt％；乙二醇3wt％；余量用水补足。
实施例9：
苦葛提取物6wt％；苦参碱2wt％；甲醇30wt％，苯乙烯基苯基聚氧乙烯醚10wt％；异丙醇10wt％；乙二醇3wt％；余量用水补足。
实施例10：
苦葛提取物9wt％；苦参碱3wt％；甲醇30wt％，苯乙烯基苯基聚氧乙烯醚10wt％；异丙醇10wt％；乙二醇3wt％；余量用水补足。
实施例11：
苦葛提取物12wt％；苦参碱4wt％；甲醇30wt％，苯乙烯基苯基聚氧乙烯醚10wt％；异丙醇10wt％；乙二醇3wt％；余量用水补足。
二、生物实施例
1、室内杀菌活性测定
1.1药剂毒力测定
参照农药室内生物测定试验准则，采用浸虫法测定供试单剂对3龄粘虫幼虫的毒杀活性。将苦葛提取物和苦参碱各设5个处理浓度(用二甲基亚砜溶剂稀释)。取粘虫3龄幼虫在各浓度药液中浸渍10s，取出，用吸水纸吸干多余药液，置于放有新鲜食物的干净容器中。二甲基亚砜作对照。每个浓度处理20头，重复4次。然后将处理过的试虫放入人工智能气候箱培养(28℃±1℃、rh＝80％)中饲养。72h后检查死、活虫数，以不能正常爬行为死亡。计算虫口死亡率，校正死亡率，并按机率分析法求出两单剂的毒力回归曲线与lc50值。
1.2苦葛提取物物和苦参碱的复配作用研究
将苦葛提取物和苦参碱进行复配：将两种原药按有效成分配制成4:1，3:1，2:1，1:1，1:2，1:3，1:4共7个配比(质量比)。上述配方分别按药剂毒力测定方法进行毒力测定。
对混剂联合作用进行评价，以lc50值为基础，通过计算混剂共毒系数评价混剂联合作用类型。
ctc≥120为增效作用，80≤ctc<120为相加作用，ctc<80为拮抗作用。
2.试验结果
2.1药剂毒力测定结果
表12种药剂对粘虫的室内毒力测定结果
从表1可以看出，苦葛粗提物对3龄粘虫幼虫的lc50为304.2060μg/ml；苦参碱对3龄粘虫幼虫的lc50为605.5420μg/ml。
表2苦葛提取物与苦参碱复配对3龄粘虫幼虫的室内毒力测定结果
由表2可知，苦葛提取物和苦参碱复配的所有比例均表现出一定的增效作用，但不同复配比例增效系数有所差异。其中，苦葛粗提物和苦参碱的复配比例为3：1时，共毒系数最高，为205.3626。
二、大田实验
1.试验方法
菜青虫和小菜蛾试验在成都市双流区开展；玉米粘虫试验在仁寿县开展；茶尺蠖和茶蚜试验在雅安市名山县开展。试验地土壤类型为粘土，土壤肥力中等，小区栽培条件一致。小区面积20m2，中间设置隔离行。在菜青虫、小菜蛾、粘虫和茶尺蠖防治试验中，各实施例按有效成分20g/hm2的使用剂量对着植株喷雾，药剂对照为0.3％苦参碱乳油和10％苦葛提取物微乳剂，用量均为有效成分20g/hm2；在茶蚜、茶小绿叶蝉防治试验中，各实施例按有效成分2g/hm2的使用剂量对着植株喷雾，药剂对照为2％苦参碱水剂和10％苦葛提取物微乳剂，用量均为有效成分2g/hm2；，以喷施清水作为空白对照，试验每处理重复4次，随机区组进行小区排列。施药后1d、3d、7d和14d调查各小区内的虫数，根据清水对照区与处理区的虫数计算防治效果，并进行差异显著性分析。
式中：ta—处理区防治后存活的个体数量；tb—处理区防治前存活的个体数量；
ca—对照区防治后存活的个体数量；cb—对照区防治后存活的个体数量。
10％苦葛提取物微乳剂的制备：称取苦葛根提取物10kg，溶解于20kg正丁醇中，再加入烷基酚聚氧乙烯醚5kg，十二烷基苯磺酸钙15kg，在温度为45℃的搅拌条件下混合；在搅拌的同时，缓慢滴加水离子水50kg，滴加结束后继续搅拌1h，即得到10％苦葛提取物微乳剂100kg。所得的制剂在稳定性、外观等检测指标上均符合国家微乳剂性能指标要求。
2.试验结果
测定了苦葛提取物和苦参碱11个复配微乳剂对玉米粘虫、甘蓝菜青虫、小菜蛾、茶尺蠖、茶蚜、茶小绿叶蝉的田间防治效果，见表3、表4、表5、表6、表7和表8。
从表3、表4表5和表6表中可以看出，不同实施例对玉米粘虫、甘蓝菜青虫、小菜蛾和茶尺蠖均有不同程度的防治作用。其中，当苦葛提取物和苦参碱有效成分为10wt％，在两者配比为3：1时(实施例6)，对以上害虫防治效果最好，高于其它配比(实施例1，实施例2，实施例3，实施例4，实施例5，实施例7和对照药剂处理)。当有效成分含量低于10wt％时(实施例8和实施例9)，对玉米粘虫等虫害的防治效果明显下降；当有效成分含量高于10wt％时(实施例10和实施例11)，对玉米粘虫等虫害的防治效果无明显提高。由此可以看出，当苦葛提取物和苦参碱有效成分为10wt％，且两者配比为3：1为最佳有效成分含量和配比，对小玉米粘虫、甘蓝菜青虫、小菜蛾和茶尺蠖有很好的防治效果。
从表7和表8表中数据可以看出，不同实施例对茶蚜、茶小绿叶蝉均有不同程度的防治作用，效果均明显高于对照药剂0.3％苦参碱乳油和10％苦葛提取物微乳剂。其中，当苦葛提取物和苦参碱有效成分为10wt％，在两者配比为3：1时(实施例6)，对茶蚜、茶小绿叶蝉防治效果最好，高于其它配比(实施例1，实施例2，实施例3，实施例4，实施例5，实施例7和对照药剂处理)。当有效成分含量低于10wt％时(实施例8和实施例9)，对茶蚜、茶小绿叶蝉的防治效果显著下降；当有效成分含量高于10wt％时(实施例10和实施例11)，对茶蚜、茶小绿叶蝉的防治效果也明显低于实施例6。由此可以看出，当苦葛提取物和苦参碱有效成分为10wt％，且两者配比为3：1为最佳有效成分含量和配比，对茶蚜、茶小绿叶蝉有很好的防治效果。
以上结果说明，当苦葛提取物和苦参碱有效成分为10wt％，在两者配比为3：1时(实施例6)，对玉米粘虫、甘蓝菜青虫、小菜蛾、茶尺蠖、茶蚜、茶小绿叶蝉有很好的田间防治效果，且优于其它实施例(实施例1，实施例2，实施例3，实施例4，实施例5，实施例7，实施例8，实施例9,实施例10，实施例11和对照药剂处理)。
表3不同实施例处理防治玉米粘虫的田间效果
表4不同实施例处理防治菜青虫的田间效果
表5不同实施例处理防治小菜蛾的田间效果
表6不同实施例处理防治茶尺蠖的田间效果
表7不同实施例处理防治茶蚜的田间效果
表8不同实施例处理防治茶小绿叶蝉的田间效果
本发明的一种包含苦葛提取物与苦参碱的杀虫组合物及其用途已通过具体的实施例进行了描述。本领域技术人员可以借鉴本发明的内容适当改变原料、工艺条件等环节来实现相应的其它目的，其相关改变都没有脱离本发明的内容，所有类似的替换和改动对于本领域技术人员来说是显而易见的，都被视为包括在本发明的范围之内。