本发明属于生物技术领域，具体涉及一种外生菌根真菌种植园的菌根苗木二次接种方法，更具体的，涉及一种块菌(松露)种植园内菌根苗木二次接种的方法
背景技术：
块菌(松露)是外生菌根真菌的一种，属于块菌属，通过形成菌根与很多树木或灌木共生。块菌属中的一些种例如黑孢块菌(tubermelanosporum)以其子实体特有的香味而世界闻名。在欧洲上世纪七十年代，已经有将块菌共生树种幼苗预接种并移栽至管理良好的种植园来收获块菌的做法，在法国，有将近80％-90％的黑孢块菌子实体来源于块菌种植园，通过该预接种的方法已成功地将黑孢块菌引种至澳大利亚、新西兰、美国和南非。对于传统农业来说，块菌种植代表了新的收入机会和农业的多样性。这些年来，如何提高块菌种植园的产菌寿命是现在块菌种植业所面临的新问题，关于对块菌的共生苗木的预接种方法已经非常成熟并有大量文献，但是尚未有对菌根苗木二次接种的报道，本发明创新使用块菌诱导坑的方法进行二次接种，提高了块菌的产出率，延长了块菌种植园的使用时间。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种块菌(松露)种植园内菌根苗木二次接种的方法。
为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下的技术方案：
一种块菌种植园内菌根苗木二次接种的方法，该方法以块菌菌剂辅以蛭石、泥炭、菌肥混匀形成二次接种基质，在菌木周围挖诱导坑，将二次接种基质加入诱导坑中，用土填平，第二年在诱导坑中收获所接种块菌子实体。
根据所述的一种块菌种植园内菌根苗木二次接种的方法，其中所述的块菌菌剂是将块菌子实体粉碎，打碎成匀浆，镜检孢子浓度达到5×106个/g。
根据所述的一种块菌种植园内菌根苗木二次接种的方法，其中所述的菌肥是指市售枯草芽孢杆菌菌肥。
根据所述的一种块菌种植园内菌根苗木二次接种的方法，其中所述的二次接种基质是指将块菌菌剂、泥炭、蛭石和菌肥按照300g块菌菌剂+200g泥炭+50l蛭石+50l菌肥的比例混合，调节水分至18-20％。
根据所述的一种块菌种植园内菌根苗木二次接种的方法，其中所述的诱导坑是指在距离菌根苗木50公分处东、西、南、北四个方向挖边长为0.2m、5-8cm深的诱导坑，每个坑填放二次接种基质250ml，并用翻出的土将坑填平。
根据所述的一种块菌种植园内菌根苗木二次接种的方法，其中所述的在诱导坑中收获是指经过二次接种的菌根苗木，第二年至第四年在诱导坑内收获块菌。
与现有技术相比，本发明具备如下的优益性：
块菌种植园内菌根苗木二次接种的方法操作简单，可以延长一次接种后块菌(松露)种植园的产菌年限，提高农场主收入并增加了农业的多样性。
具体实施方式
下面用本发明的实施例来进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此来限定本发明。
实施例1
印度块菌(tuberindicum)(松露)种植园内锥连栎(quercusfranchetii)二次接种：
一个具有五年历史的印度块菌(tuberindicum)种植园，所栽培共生树种为锥连栎(quercusfranchetii)。
1)制备印度块菌菌剂：将印度块菌子实体打碎成匀浆，镜检其孢子浓度达到5×106个/g，待用；
2)制备二次接种基质：将上一步得到的印度块菌菌剂连同泥炭、蛭石、枯草芽孢杆菌菌肥混匀，按照300g印度块菌菌剂+200g泥炭+50l蛭石+50l菌肥的比例，并调节水分至18％-20％；
3)在锥连栎周围布置诱导坑并接种：选取部分锥连栎进行诱导坑二次接种，在这些锥连栎周围50cm处东、西、南、北四个方向分别布置四个诱导坑，每个坑长、宽均为0.2m，深5-8cm，并将坑内锥连栎根系和菌根用铁锨截断，每个诱导坑底部放入250ml前步制备好的二次接种基质，并用土块填平；
4)收获：对诱导坑内所产生块菌数量以及坑外所产生块菌数量从二次接种后连续三年进行数据统计，结果如下表所示：
表1印度块菌接种园二次接种后块菌产量统计
实施例2
李氏块菌(tuberliyuanum)(松露)种植园内板栗树(castaneamollissima)二次接种：
一个具有五年历史的李氏块菌(tuberliyuanum)种植园，所栽培共生树种为板栗(castaneamollissima)。
1)制备李氏块菌菌剂：将李氏块菌子实体打碎成匀浆，镜检其孢子浓度达到5×106个/g，待用；
2)制备二次接种基质：将上一步得到的李氏块菌菌剂连同泥炭、蛭石、枯草芽孢杆菌菌肥混匀，按照300g李氏块菌菌剂+200g泥炭+50l蛭石+50l菌肥的比例，并调节水分至18％-20％；
3)在板栗周围布置诱导坑并接种：选取部分板栗进行诱导坑二次接种，在这些板栗周围50cm处东、西、南、北四个方向分别布置四个诱导坑，每个坑长、宽均为0.2m，深5-8cm，并将坑内菌根苗木根系和菌根用铁锨截断，每个诱导坑底部放入250ml前步制备好的二次接种基质，并用土填平；
4)收获：对诱导坑内所产生块菌数量以及坑外所产生块菌数量从二次接种后连续三年进行数据统计，结果如下表所示：
表2李氏块菌接种园二次接种后块菌产量统计