一种分子标记辅助选育海南抗病虫水稻恢复系的方法

本发明涉及水稻培育领域，尤其涉及一种分子标记辅助选育海南抗病虫水稻恢复系的方法。

背景技术：

1、水稻是全球最重要的三大粮食作物之一，世界上超过50％人群以稻米为主食，因此水稻的高产、稳产与全球粮食安全和社会稳定密切相关。杂种优势利用能有效地提高农作物产量、品质和抗性。水稻三系成功配套，极大推动了水稻杂种优势的利用和杂交水稻的在中国大规模推广应用，其种植面积占到水稻种植面积的1/2。

2、水稻细胞质雄性不育和恢复基因的发掘和利用极大提升我国杂交水稻的研究。杂交稻的商业化应用需要选育与之配套的优良恢复系。

技术实现思路

1、为了克服现有技术中的至少部分缺陷，本发明实施例提供了分子标记辅助选育海南抗病虫水稻恢复系的方法，将常规育种技术与分子标记辅助技术相结合，通过ssr分子标记检测，选育出多抗基因聚合的海南水稻恢复系。

2、本发明涉及的一种分子标记辅助选育海南水稻优良恢复系的方法，包括以下步骤：

3、s1、选取水稻恢复系材料；

4、s2、系谱选育，利用系谱法对选用的水稻恢复系材料进行选育，从f3代进行不同不育系材料的杂交测配，观察杂种f1代和相应的父本，筛选恢复力强的株系，性状稳定后，进行复测，获得抗性表现突出的稳定优良中间稳定株系；

5、s3、采用分子标记辅助技术与系谱选育配合进行选育，对抗性材料进行ssr分子标记检测，选育出多抗基因聚合优质恢复系，并测配选育多抗、优质杂交水稻新组合。

6、进一步地，所述水稻恢复系材料包括华占、r225、广恢128、湛优15、r3301、华恢8131，特籼占25、r527，湛恢15，导8；不育系广8a、德丰a、y58s、华s、特a、博ⅱa和丰田a。

7、进一步地，所述系谱选育过程中选育的优良中间稳定株系为华s/华恢8131和r527/特籼占25。

8、进一步地，采用分子标记辅助技术与系谱选育配合进行选育包括将所述稳定优良中间稳定株系与广8a、德丰a、y58s、特a、博ⅱa、丰田a等测配，经杂种f1代观察及测产，经过调查考种及测产，已选育出多个抗性强，品质优，配合力强的恢复系。

9、进一步地，采用分子标记辅助技术与系谱选育配合进行选育获得的配合力强的恢复系育成多抗、强配合力的恢复系r818，即华s/华恢8131。

10、进一步地，还包括利用ssr分子标记检测恢复系材料r818进行抗性基因检测。

11、进一步地，所述ssr分子标记检测中的pcr反应体系25μl：模板dna 2.5μl，taq酶、buffer混合液12.5μl，引物各1μl，水8μl，扩增产物用3％的琼脂糖凝胶电泳，35min。

12、进一步地，所述抗性基因包括稻瘟病抗性基因pi-1，分子标记rm244，序列为

13、f:atcgatcgatcttcacgagg

14、r:tgctataaaaggcattcggg；

15、xa-7白叶枯病抗性基因，分子标记为m5，序列为

16、f:cgatcttactggctctgcaactctgt

17、r:gcatgtctgtgtcgattcgtccgtacga，

18、bph3+bph14+bph15稻飞虱抗性基因

19、与bph3紧密连锁的ssr标记为rm16553，序列为：

20、f:tttgcttagtcggcagatgtcc

21、r:cataagaacgtacctccactgatcc

22、与bph14紧密连锁的ssr标记为mrg2329，序列为：

23、f:gcacatacagaaatggtgaa，r:ggcaagggacatgtagtaac，

24、与bph15紧密连锁的ssr标记为ms5，序列为：

25、f:ttgtgggtcctcatctcctc，

26、r:tgacaactttgtgcaagatcaaa。

27、本发明的有益之处在于：检测结果表明恢复系r818(华s×华恢8131)聚合了rm244稻瘟病抗性基因，xa-5+xa-7白叶枯病抗性基因，bph3+bph14+bph15稻飞虱抗性基因，即通过本发明分子标记辅助选育海南水稻优良恢复系的方法，能够快速的筛选出较优的恢复系，从而为水稻的杂交和商业化提供可靠的指导。

28、为让本发明的上述和其他目的、特征和优点能更明显易懂，下文特举较佳实施例，并配合所附图式，作详细说明如下。

技术特征：

1.一种分子标记辅助选育海南水稻优良恢复系的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的分子标记辅助选育海南水稻优良恢复系的方法，其特征在于，所述水稻恢复系材料包括华占、r225、广恢128、湛优15、r3301、华恢8131，特籼占25、r527，湛恢15，导8；不育系广8a、德丰a、y58s、华s、特a、博ⅱa和丰田a。

3.根据权利要求2所述的分子标记辅助选育海南水稻优良恢复系的方法，其特征在于，所述系谱选育过程中选育的优良中间稳定株系为华s/华恢8131和r527/特籼占25。

4.根据权利要求3所述的分子标记辅助选育海南水稻优良恢复系的方法，其特征在于，采用分子标记辅助技术与系谱选育配合进行选育包括将所述稳定优良中间稳定株系与广8a、德丰a、y58s、特a、博ⅱa、丰田a等测配，经杂种f1代观察及测产，经过调查考种及测产，已选育出多个抗性强，品质优，配合力强的恢复系。

5.根据权利要求4所述的分子标记辅助选育海南水稻优良恢复系的方法，其特征在于，采用分子标记辅助技术与系谱选育配合进行选育获得的配合力强的恢复系育成多抗、强配合力的恢复系r818，即华s/华恢8131。

6.根据权利要求5所述的分子标记辅助选育海南水稻优良恢复系的方法，其特征在于：还包括利用ssr分子标记检测恢复系材料r818进行抗性基因检测。

7.根据权利要求5所述的分子标记辅助选育海南水稻优良恢复系的方法，其特征在于，所述ssr分子标记检测中的pcr反应体系25μl：模板dna2.5μl，taq酶、buffer混合液12.5μl，引物各1μl，水8μl，扩增产物用3％的琼脂糖凝胶电泳，35min。

8.根据权利要求6所述的分子标记辅助选育海南水稻优良恢复系的方法，其特征在于，所述抗性基因包括稻瘟病抗性基因pi-1，分子标记rm244，序列为

技术总结
本发明涉及的一种分子标记辅助选育海南水稻优良恢复系的方法，包括以下步骤：选取水稻恢复系材料；利用系谱法对选用的水稻恢复系材料进行选育，从F3代进行不同不育系材料的杂交测配，观察杂种F1代和相应的父本，筛选恢复力强的株系，性状稳定后，进行复测，获得抗性表现突出的稳定优良中间稳定株系；采用分子标记辅助技术与系谱选育配合进行选育，对抗性材料进行SSR分子标记检测，选育出多抗基因聚合优质恢复系，并测配选育多抗、优质杂交水稻新组合。本发明的有益效果是：将常规育种技术与分子标记辅助技术相结合，通过SSR分子标记检测，选育出多抗基因聚合的海南水稻恢复系。

技术研发人员：唐清杰,韩义胜,严小微,邢福能,翟李楠,林义开
受保护的技术使用者：海南省农业科学院粮食作物研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13