一种快速获得大量茶小绿叶蝉若虫的方法

1.本发明属于昆虫扩繁技术领域，具体涉及一种快速获得大量茶小绿叶蝉若虫的方法。


背景技术：

2.茶小绿叶蝉是茶园的首要害虫，其相关研究是茶园病虫害研究的重点，需要大量虫源；此外美人茶一般以茶小绿叶蝉为害的夏秋茶的茶青为原料，但茶园内的茶小绿叶蝉的虫口数量受天气、采摘和茶枝修剪等影响波动较大，缺乏稳定的虫源，影响美人茶产业的稳定性。
3.根据现有文献报道，茶小绿叶蝉的饲养主要依靠从茶园人工捕捉叶蝉成虫，室内放到茶枝上进行饲养和产卵，以获取新羽化的成虫。但是，茶小绿叶蝉善于跳跃，人工捕捉费时费力；成虫个体小，连翅体长2-3mm，人工捕捉过程中虫体易受损伤，成虫存活率较低；人工捕捉的成虫放到茶枝上饲养，需经历交尾、孕卵、产卵、孵化和羽化等阶段，最终获得新羽化的成虫，此饲养周期长。
4.茶小绿叶蝉的雌性成虫主要在嫩枝中产卵，其卵粒在蓝光刺激条件下将产生自体荧光，可以在不解剖植物组织的情况下，利用蓝光照射茶树嫩枝，便捷有效地观察到叶蝉卵粒或直接统计叶蝉的产卵量（yao et al 2020）。
5.因此，利用茶小绿叶蝉的产卵习性和卵的自体荧光特性，发明一种不需要人工捕虫、不需要经历叶蝉雌雄交尾、雌虫孕卵和产卵阶段，可以快速获得大量茶小绿叶蝉若虫的方法具有重要的应用价值。


技术实现要素：

6.针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于设计提供一种快速获得大量茶小绿叶蝉若虫的方法的技术方案。该方法能够快速、大量的获取茶小绿叶蝉各龄期若虫。
7.本发明具体通过以下技术方案实现：一种快速获得大量茶小绿叶蝉若虫的方法，其包括如下步骤：（1）采集茶枝：在茶园选取至少8叶位茎段未木质化的茶树新梢，往下从木质化部位剪取后带回室内，放入水中保鲜待用；（2）筛选带卵茶枝：在室内，佩戴防蓝光眼镜，使用蓝光光源照射步骤（1）剪回的茶枝嫩梢，茶小绿叶蝉卵粒在蓝光照射下呈现绿色光点，以此筛选出带有绿色光点的茶枝；（3）保存带卵茶枝：将步骤（2）筛选出的带卵嫩梢简单修剪后插入浸泡过清水的花泥中，然后置于保鲜盒内培育；（4）卵的孵化：将步骤（3）中带卵茶枝的保鲜盒整体放入养虫笼内，在室内培育，直至茶小绿叶蝉卵粒孵化；其中室内环境条件设定为温度25
±
2℃、相对湿度75
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5%以及光周期16l:8d (h)；（5）获取若虫：2-7天内，茶枝上的卵将陆续孵化，能够获得各龄期的若虫；如需要
特定虫龄，需将同一天孵化的若虫转移到其他无卵茶枝上饲养，并记录蜕皮情况，按所需虫龄收取若虫。
8.进一步，所述步骤（1）中剪取茶梢时，保留5cm长度的木质化茎段以备室内水培。
9.进一步，所述步骤（2）中使用460 nm波长、200 w光强的蓝色光源。
10.进一步，所述步骤（3）中浸泡过清水的花泥用保鲜膜包裹，防止水分蒸发。
11.进一步，所述步骤（4）中室内环境条件设定为温度25
±
2℃、相对湿度75
±
5%以及光周期16l:8d (h)。
12.进一步，所述步骤（5）中7天内不要更换新鲜茶枝，每隔三天需剪掉茶枝根部的腐烂部分。
13.本发明具有以下有益效果：（1）本发明采用蓝光监测法直接筛选出带有茶小绿叶蝉卵的茶枝，可省略交尾、孕卵和产卵等阶段，缩短室内饲养周期，快速、大量的获得茶小绿叶蝉各龄期的若虫；（2）本发明不需要人工捕虫，避免人工捕捉费时费力且捕捉的成虫存活率低等低效费力的昆虫饲养问题。
附图说明
14.图1为使用蓝光检测法观察到的茶小绿叶蝉卵粒。
具体实施方式
15.本发明用下列实施例来进一步说明本发明，但本发明的保护范围并不限于下列实施例。
16.实施例1：为实验室提供3龄若虫（1）采集茶枝：2019年5月13日，在位于浙江省杭州市中国农业科学院茶叶研究所附近的龙井43茶园，选取100支至少8叶位尚未木质化的新梢，长度约15-20 cm。从已木质化的部位剪取茶梢时，保留5cm长度的木质化茎段，剪切后将茶梢带回室内，并立即置于装有水的量杯中，以防茶梢过早失水干枯。
17.（2）筛选带卵茶枝：在实验室条件下，佩戴ptk防蓝光眼镜，然后使用蓝光灯（460 nm波长、200 w光强）照射从茶园剪回的新鲜茶梢。由于茶小绿叶蝉主要将卵散产于嫩梢第2-4叶位的茎段，因此重点检查这一区域，如茎段上显示5个以上的绿色光点（即叶蝉卵粒），如图1所示，则将此茶梢挑出，单独放入另一个装水的大烧杯中待用，图1显示的白色光点，实际为绿色光点。100支嫩梢中共有84支有5个以上的绿色光点，其中61支光点超过10个。
18.（3）卵的孵化：当天将筛选出的带卵茶梢修剪后插入浸泡过清水的花泥中，浸泡过清水的花泥用保鲜膜包裹，防止水分蒸发，然后置于保鲜盒内培育，实验室条件为温度25
±
2℃、相对湿度75
±
5%以及光周期16l:8d (h)，直至茶小绿叶蝉卵粒孵化。
19.（4）获取若虫：观察卵粒孵化情况，将同一天孵化的若虫集中饲养，记录好孵化日期以及每一次蜕皮的时间，待卵粒孵化后3-5 d，一共获取茶小绿叶蝉3龄若虫约970头。
20.实施例2：为美人茶生长的茶园提供1龄若虫实施例2与实施例1的不同在于，步骤4中将，用毛笔将每天孵化出来的1龄若虫轻轻扫入牛皮纸袋,供给美人茶生长的茶园。
21.以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的涵盖范围。


技术特征：
1.一种快速获得大量茶小绿叶蝉若虫的方法，其特征在于包括如下步骤：（1）采集茶枝：在茶园选取至少8叶位茎段未木质化的茶树新梢，往下从木质化部位剪取后带回室内，放入水中保鲜待用；（2）筛选带卵茶枝：在室内，佩戴防蓝光眼镜，使用蓝光光源照射步骤（1）剪回的茶枝嫩梢，茶小绿叶蝉卵粒在蓝光照射下呈现绿色光点，以此筛选出带有绿色光点的茶枝；（3）保存茶枝：将步骤（2）筛选出的带卵嫩梢简单修剪后插入浸泡过清水的花泥中，然后置于保鲜盒内培育；（4）卵的孵化：将步骤（3）中带卵茶枝的保鲜盒整体放入养虫笼内，在室内培育，直至茶小绿叶蝉卵粒孵化；（5）获取若虫：2-7天内，茶枝上的卵将陆续孵化，能够获得各龄期的若虫；如需要特定虫龄，则将同一天孵化的若虫转移到其他无卵茶枝上饲养，并记录蜕皮情况，按所需虫龄收取若虫。2.如权利要求1所述的一种快速获得大量茶小绿叶蝉若虫的方法，其特征在所述步骤（1）中剪取茶梢时，保留5cm长度的木质化茎段，以便室内水培。3.如权利要求1所述的一种快速获得大量茶小绿叶蝉若虫的方法，其特征在所述步骤（2）中使用460 nm波长、200 w光强的蓝色光源。4.如权利要求1所述的一种快速获得大量茶小绿叶蝉若虫的方法，其特征在所述步骤（3）中浸泡过清水的花泥用保鲜膜包裹，防止水分蒸发。5.如权利要求1所述的一种快速获得大量茶小绿叶蝉若虫的方法，其特征在所述步骤（4）中室内环境条件设定为温度25
±
2℃、相对湿度75
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5%以及光周期16l:8d (h)。6.如权利要求1所述的一种快速获得大量茶小绿叶蝉若虫的方法，其特征在所述步骤（5）中7天内不要更换新鲜茶枝，每隔三天需剪掉茶枝根部的腐烂部分。

技术总结
一种快速获得大量茶小绿叶蝉若虫的方法，属于昆虫扩繁技术领域。主要包括以下步骤：从茶园采集茶枝嫩梢，佩戴防蓝光眼镜，利用蓝光照射茶枝，筛选出有绿色荧光光点的带卵茶枝，置于养虫笼内培育，以花泥保水，直至茶小绿叶蝉卵粒孵化，2-7天内可获取大量若虫。本发明方法利用茶小绿叶蝉的产卵习性和卵的自体荧光特性，筛选带卵茶枝孵化若虫，不需要人工捕虫、不需要经历叶蝉雌雄交尾、雌虫孕卵和产卵阶段，大大缩短了茶小绿叶蝉若虫的室内饲养周期，可以快速获得大量茶小绿叶蝉若虫。可以快速获得大量茶小绿叶蝉若虫。可以快速获得大量茶小绿叶蝉若虫。


技术研发人员：张惠宁 姚其 单瑶 焦龙 蔡晓明 边磊 陈宗懋
受保护的技术使用者：中国农业科学院茶叶研究所
技术研发日：2022.09.15
技术公布日：2022/12/22