一种灵芝菌种的制备方法

本发明涉及一种灵芝菌种的制备方法。

背景技术：

1、药典收录的灵芝是指多孔菌科真菌赤芝ganoderma lucidum(leyss.ex fr.)karst.或紫芝ganoderma sinense zhao，xu et zhang的干燥子实体。灵芝具有补气安神，止咳平喘的功效，主治心神不宁，失眠，惊悸，咳喘痰多，虚劳证等。

2、菌种是灵芝生产的基础。灵芝菌种通常分为三级：母种、原种和栽培种。一般在25℃条件下，灵芝母种的培养时间为10天左右，灵芝原种的培养时间为30天左右，灵芝栽培种的培养时间为40-60天。灵芝菌种培养周期长，不利于灵芝的快速栽培。如果能缩短周期，有利于灵芝产业降本增效。

技术实现思路

1、本发明提供一种灵芝菌种的制备方法，采用液体培养制种法，显著缩短了菌种培养周期，可用于灵芝的快速栽培。

2、一种灵芝菌种的制备方法，包括如下步骤：

3、s1、提供灵芝培养液；

4、s2、先向所述灵芝培养液中加入海藻酸钠溶液，混合均匀；然后将所得混合液用第一滴管滴加入氯化钙溶液中，形成第一凝胶颗粒；

5、s3、将所述第一凝胶颗粒用无菌水洗净，加入海藻酸钠和明胶的混合溶液中，混合均匀；然后将所得混合液用第二滴管滴加入氯化钙溶液中，形成第二凝胶颗粒，用无菌水洗净，获得灵芝菌种。

6、根据本发明实施例，可采用本领域常规方法制备灵芝培养液。例如通常采用pdb培养基(马铃薯葡萄糖水培养基)，可市购。

7、根据本发明实施例，步骤s2中使所得混合液中海藻酸钠的浓度为2-2.5wt％。这样更有利于第一凝胶颗粒成型，且保持较好的硬度和强度。

8、根据本发明实施例，步骤s3中使所得混合液中海藻酸钠的浓度为2.8-3wt％、明胶的浓度为0.5-1wt％。本步骤s3混合液中海藻酸钠的浓度略高于步骤s2，更有利于增强第二凝胶颗粒对外力的抵抗能力；特别是在添加明胶后硬度、强度及弹性进一步增强，凝胶颗粒既不易破损也不易发生黏连，利于转运；同时在接种后还可保证菌种快速复活。大量实验表明，若海藻酸钠与明胶的浓度及配比不合适，凝胶颗粒容易破损或黏连，或者在接种后凝胶颗粒不易降解，影响菌种恢复生长的速度。

9、根据本发明实施例，所述第二滴管的口径大于所述第一滴管，这样可更方便地制备出第二凝胶颗粒。通常情况下，所述第一滴管的口径为1-3mm，所述第二滴管的口径为4-6mm。

10、根据本发明实施例，所述氯化钙溶液的浓度为2-2.5wt％。

11、目前已知的灵芝均可采用本发明方法。

12、本发明还包括上述方法制备的灵芝菌种。

13、本发明制备的灵芝菌种具有双层凝胶结构，一方面能够保证菌种在凝胶颗粒内部更好地存活，且在接种后可更快地恢复生长；另一方面能够抵抗转运过程中的外力，既不易破损也不易黏连，且在接种后凝胶还可为营养物质被利用，从而快速降解。

技术特征：

1.一种灵芝菌种的制备方法，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述灵芝菌种的制备方法，其中，步骤s2中使所得混合液中海藻酸钠的浓度为2-2.5wt％。

3.根据权利要求1或2所述灵芝菌种的制备方法，其中，步骤s3中使所得混合液中海藻酸钠的浓度为2.8-3wt％、明胶的浓度为0.5-1wt％。

4.根据权利要求1-3任一项所述灵芝菌种的制备方法，其中，步骤s3混合液中海藻酸钠的浓度略高于步骤s2。

5.根据权利要求1-4任一项所述灵芝菌种的制备方法，其中，所述氯化钙溶液的浓度为2-2.5wt％。

6.权利要求1-5任一项所述方法制备的灵芝菌种。

技术总结
本发明涉及一种灵芝菌种的制备方法，包括先向灵芝培养液中加入海藻酸钠溶液，然后将所得混合液用第一滴管滴加入氯化钙溶液中，形成第一凝胶颗粒；无菌水洗净，加入海藻酸钠和明胶的混合溶液中，然后用第二滴管滴加入氯化钙溶液中，形成第二凝胶颗粒，洗净获得灵芝菌种。本发明采用液体培养制种法，显著缩短了菌种培养周期，可用于灵芝的快速栽培。

技术研发人员：陈向东,兰进,张薇薇,颉颖睿,仇冠盛
受保护的技术使用者：中国医学科学院药用植物研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/4/17