一种抗病促生的复配制剂及其应用

本发明涉及医药，具体涉及一种抗病促生的复配制剂及其应用。

背景技术：

1、木霉(trichoderma)是自然界广泛分布的生防真菌，木霉菌适应性强、生长繁殖快，能够迅速利用营养和占据空间，其生防机制主要包括寄生、竞争、抗生、溶菌作用。在木霉菌与病原菌的互作过程中，寄生菌丝分泌一些物质使木霉菌趋向寄主真菌生长，一旦寄主被木霉菌寄生物识别，就会建立寄生关系，使其能直接从寄主菌丝内吸取营养，从而破坏寄主的生长发育，使寄主菌丝失去其原生质体的整体性而断裂或仅剩下空壳，直至死亡。另外，木霉还能分泌多种抗生素类代谢物质及降解病原菌细胞壁的水解酶，如木霉素、胶霉素、抗菌肽、绿木霉素、几丁质酶、葡聚糖酶、纤维素酶等。

2、放线菌能够通过一些机制促进宿主植物的生长或提高其抵抗病虫害的能力。其中，链霉菌次生代谢产物类型丰富，结构类型多样，包括抗生素、酶类、激素等物质，对提高植物的抗病、抗逆性能具有重要的作用。一些抗生素类物质通过抑制病菌分生孢子的萌发和菌丝的生长控制病害的发生发展。酶类代谢产物可通过对病菌细胞壁的溶解作用，导致细胞壁穿孔、畸形等现象，从而对孢子、菌丝有抑制萌发、生长甚至杀死作用。植物激素类代谢产物主要通过诱导植物的防御反应从而提高植株抵御稻瘟病害的能力。

3、病原细菌pseudomonas oryzihabitans、xanthomonas arboricola和病原真菌alternaria alternata、neofusicoccum parvum、pestalotiopsis chamaeropis、colletotrichum gloeosporioides、cytospora chrysosperma、pythium oligandrum共8种是引起四川花椒枝枯、溃疡、干枯、褐斑、黑斑、腐烂的主要病原菌。生防菌可通过代谢产生抑菌活性物质、与病原菌产生拮抗作用等方式达到防病促生的作用，且由于其对环境无污染、无耐药性等优点，具有广阔的应用前景。但是生防菌在田间的稳定性和菌株的定殖能力是影响其稳定发挥生防效果的重要因素。因此，有必要进一步研发抗逆性好、防效稳定的复配制剂。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种抗病促生的复配制剂及其应用，该复配制剂具有多种疾病的抗病效果，还可以促进花椒的株高、地径和根长，在田间防病和促生方面效果显著。

2、为了达到上述目的，本发明提供了一种抗病促生的复配制剂，该复配制剂由螺旋木霉rs05代谢物和奇异链霉菌bd2233组成。

3、其中，上述的奇异链霉菌bd2233已于2022年9月2日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为cgmccno.25634，该奇异链霉菌bd2233的拉丁文名称为streptomyces mirabilis，该奇异链霉菌bd2233为浓度为1×105cfu/ml的菌悬液。

4、上述的螺旋木霉rs05代谢物为对保藏编号为cgmcc no.40012的螺旋木霉rs05的发酵上清液进行萃取和分离所得的物质，该螺旋木霉rs05的拉丁文名称为trichodermaspirale，该物质为根皮苷和紫草素。

5、上述的抗病包括抗pseudomonas oryzihabitans、xanthomonas arboricola、alternaria alternata、neofusicoccum parvum、pestalotiopsis chamaeropis、colletotrichum gloeosporioides、cytospora chrysosperma和pythium oligandrum。

6、上述的促生包括促进花椒的株高、地径和根长的生长。

7、优选地，上述的复配制剂是由螺旋木霉rs05代谢物：奇异链霉菌bd2233菌悬液的体积比为1:3配制而成。

8、本发明还提供了一种奇异链霉菌bd2233，该菌已于2022年9月2日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为cgmcc no.25634，该菌对束梗镰刀菌有抑制作用。

9、本发明还提供了一种上述螺旋木霉rs05代谢物的制备方法，该方法包含：

10、培养保藏编号为cgmcc no.40012的螺旋木霉rs05，并收集发酵上清液；

11、将所得的发酵上清液按等体积加入乙酸乙酯振荡萃取；

12、将所得的萃取液浓缩后，经凝胶柱层析分离，收集洗脱峰样；

13、对收集的洗脱峰样收集其在od214下的第一个特征峰对应的样，即为所述的螺旋木霉rs05代谢物。

14、优选地，上述制备方法中的培养，其培养基包含质量分数为20％的蔗糖、2％的可溶性淀粉、0.1％的胰蛋白胨和0.05％的硫酸镁。

15、本发明提供的复配制剂可被应用于花椒的抗病促生中，其中，抗病包括抗pseudomonas oryzihabitans、xanthomonas arboricola、alternaria alternata、neofusicoccum parvum、pestalotiopsis chamaeropis、colletotrichumgloeosporioides、cytospora chrysosperma、pythium oligandrum；促生包括促进花椒的株高、地径、根长的生长。

16、本发明提供的复配制剂，解决了单一生防菌的稳定性和定殖能力差的问题，抗逆性好、防效稳定，并具有以下优点：

17、本发明提供的螺旋木霉rs05代谢物与奇异链霉菌bd2233复配制剂对花椒具有抗病促生的作用，对pseudomonas oryzihabitans、xanthomonas arboricola、alternariaalternata、neofusicoccum parvum、pestalotiopsis chamaeropis、colletotrichumgloeosporioides、cytospora chrysosperma、pythium oligandrum 8种病原菌均有良好抑制效果，说明该复配制剂具有广谱性，对花椒的病害防治和生长具有显著的效果，比农药和肥料使用更节约成本适于商品化生产，符合可持续发展的战略要求，具有广阔的市场前景。

技术特征：

1.一种抗病促生的复配制剂，其特征在于，该复配制剂由螺旋木霉rs05代谢物和奇异链霉菌bd2233组成；

2.根据权利要求1所述的复配制剂，其特征在于，所述的奇异链霉菌bd2233为浓度为1×105cfu/ml的菌悬液。

3.根据权利要求1所述的复配制剂，其特征在于，所述的复配制剂是由所述的螺旋木霉rs05代谢物与所述奇异链霉菌bd2233菌悬液的体积比为1:3配制而成。

4.一种如权利要求1中所述的螺旋木霉rs05代谢物的制备方法，其特征在于，包含：

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述的培养，其培养基包含质量分数为20％的蔗糖、2％的可溶性淀粉、0.1％的胰蛋白胨和0.05％的硫酸镁。

6.如权利要求1～3中任意一项所述的复配制剂在花椒抗病促生中的应用，其中，所述的抗病包括抗pseudomonasoryzihabitans、xanthomonasarboricola、alternariaalternata、neofusicoccumparvum、pestalotiopsischamaeropis、colletotrichumgloeosporioides、cytosporachrysosperma和pythiumoligandrum中任意一种或两种以上；所述的促生包括促进花椒的株高、地径和根长的生长。

技术总结
本发明公开了一种抗病促生的复配制剂及其应用。该复配制剂包含螺旋木霉RS05代谢物以及奇异链霉菌BD2233，其中，螺旋木霉RS05于2021年12月20日保藏，保藏编号为CGMCCNo.40012，奇异链霉菌BD2233于2022年9月2日保藏，保藏编号为CGMCCNo.25634，两株菌均保藏在中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。经验证，由螺旋木霉RS05代谢物和奇异链霉菌BD2233所制备的复配制剂对花椒具有抗病促生的作用，对花椒的病害防治和生长具有显著的效果。

技术研发人员：李姝江,刘畅,李琳,朱天辉,李书颖,韩珊,刘应高,林恬恬
受保护的技术使用者：四川农业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13