本发明涉及植物的组织培养，尤其是涉及一种白及高效繁育方法。
背景技术：
1、由于白及种子细小，无胚乳，发育不完全，在自然条件下很难萌发生长，种子直播的栽培管理要求较高，仅靠分株繁育，繁育效率低，而且耗种量大，很难满足大量栽培的需要。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种白及高效繁育方法，利用白及种子为外植体，采用组织培养技术进行繁育，具有繁育速度快，效率高等优点。
2、根据本发明的一个目的，本发明提供一种白及高效繁育方法，包括如下步骤：
3、s1，种子来源
4、留种株选择品种特性纯正、生长健壮的植株，在4-5月份盛花期进行授粉，母本在授粉后立即摘除唇瓣，及时挂牌标志；
5、s2，种子质量检测方法及分级
6、对种子进行质量检测并进行分级；
7、s3，培养基配方
8、播种培养基：1/2ms+naa 0mg·l-1～0.5mg·l-1，附加蔗糖30g·l-1，琼脂粉7g·l-1，ph值为5.8；
9、增殖培养基：ms+6-ba 0.5mg·l-1～1.5mg·l-1+naa 0.1mg·l-1～0.5mg·l-1；附加蔗糖30g·l-1，琼脂粉7g·l-1，ph值为5.8；
10、生根培养基：1/2ms+naa 0.1mg·l-1～0.5mg·l-1+香蕉泥40g·l-1～80g·l-1+土豆泥40g·l-1～80g·l-1+活性炭2g·l-1；附加蔗糖30g·l-1，琼脂粉7g·l-1，ph值为5.8；
11、s4，外植体的采集与消毒
12、s4.1外植体的采集
13、于10月～11月，选择连续3d以上的晴天，选取3年生优良母株，采集饱满、无病虫害，果龄5个月以上，尚未开裂的成熟蒴果；
14、s4.2外植体消毒
15、采用酒精、次氯酸钠或氯化汞等对白及蒴果进行常规消毒；
16、s5，播种培养
17、用消过毒的手术刀切开消毒后备用的蒴果顶部，用无菌镊子将种子均匀抖落在播种培养基上，立即盖上瓶盖，做好标记后，移至培养室进行培养；
18、s6，增殖培养
19、待初代培养中的小苗长到约2cm高后，在无菌的接种器皿中，将聚集的小苗切分成小芽丛或单个壮芽，再将小芽丛接种到新鲜的增殖培养基上继续培养；继代培养周期为40d～60d；
20、s7，生根壮苗培养
21、待继代培养中的幼苗或丛生芽长到约4cm～8cm时，将其切分成单芽后接种到生根壮苗培养基中，培养30d～40d后，幼苗可生根3条以上；
22、s8，炼苗移栽
23、s8.1炼苗
24、生根壮苗培养后，初步形成假鳞茎和根系，叶片数≥2片的组培苗即可进入炼苗；
25、s8.2移栽
26、移栽苗标准：组培苗炼苗20d～40d后，假鳞茎直径≥3mm，株高≥6cm，根≥3条，叶片数≥2片，叶色浓绿，植株生长健壮的苗即可移栽至基质中驯化；
27、移栽季节：移栽应避开寒冷的11月至次年2月，选择风小、阳光弱的天气或时段进行；
28、移栽步骤：小心从培养瓶中轻轻取出试管苗，清水洗去粘附于苗上的培养基，用500倍的50％多菌灵或75％百菌清浸泡5min，晾至根系发白，即可植入疏松、保水、透气的基质中驯化；
29、s8.3移栽后管理
30、光照强度不超过20000lx，温度10℃～30℃，湿度65％～90％；新根萌动后可喷施叶面肥，氮、磷、钾比例分别为30﹕10﹕10和20﹕20﹕20的两种叶面肥1000倍液交替喷施，每7d～10d一次。同时做好红蜘蛛、蜗牛等病虫害防治；
31、s9，出圃标准
32、植入基质后假鳞茎直径≥6mm，株高≥9cm，根≥5条，叶片≥2片，茎粗≥1.0mm，植株生长健壮的苗即可出圃。
33、进一步地，s4.1中，采集后的蒴果自然阴干后，装于透气的容器中，置于通风、凉爽、干燥的环境中保存，保存时间不超过12个月为宜；或者置于4±1℃冰箱中保存，其保存时间不超过24个月。
34、进一步地，s4.2中，将蒴果用75％的乙醇浸泡30s后，用无菌水冲洗3次；用0.1％氯化汞消毒液浸泡材料10min后，用无菌水冲洗3～5次，并用无菌滤纸将蒴果上的水分吸干备用。
35、进一步地，s5中，培养条件为：温度为(28±2)℃，光照强度为2000lx～3000lx，光照时间为12h～16h/d；培养10d后种子开始萌发，20d～30d后肉眼可见一片小叶片，50d～70d后芽可长至1～2cm高；初代培养阶段，污染率应低于30％。
36、进一步地，s6中，每个培养瓶中接种小芽丛或单芽的数量为15～20株，并分布均匀；继代培养的温度、光照强度和光照时间同播种培养。
37、进一步地，s7中，生根壮苗培养的温度、光照强度和光照时间同播种培养。
38、进一步地，s8.1中，将组培苗连同容器一起移至与栽培环境相近的环境中，透光率50％～70％，温度10℃～30℃，自然光照炼苗20d～40d，以使组培苗适应自然光照和昼夜温差。
39、有益效果
40、本发明利用白及种子为外植体，采用组织培养技术进行繁育，具有繁育速度快，效率高等优点。
1.一种白及高效繁育方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的白及高效繁育方法，其特征在于，s4.1中，采集后的蒴果自然阴干后，装于透气的容器中，置于通风、凉爽、干燥的环境中保存，保存时间不超过12个月为宜；或者置于4±1℃冰箱中保存，其保存时间不超过24个月。
3.根据权利要求1所述的白及高效繁育方法，其特征在于，s4.2中，将蒴果用75％的乙醇浸泡30s后，用无菌水冲洗3次；用0.1％氯化汞消毒液浸泡材料10min后，用无菌水冲洗3～5次，并用无菌滤纸将蒴果上的水分吸干备用。
4.根据权利要求1所述的白及高效繁育方法，其特征在于，s5中，培养条件为：温度为(28±2)℃，光照强度为2000lx～3000lx，光照时间为12h～16h/d；培养10d后种子开始萌发，20d～30d后肉眼可见一片小叶片，50d～70d后芽可长至1～2cm高；初代培养阶段，污染率应低于30％。
5.根据权利要求1所述的白及高效繁育方法，其特征在于，s6中，每个培养瓶中接种小芽丛或单芽的数量为15～20株，并分布均匀；继代培养的温度、光照强度和光照时间同播种培养。
6.根据权利要求1所述的白及高效繁育方法，其特征在于，s7中，生根壮苗培养的温度、光照强度和光照时间同播种培养。
7.根据权利要求1所述的白及高效繁育方法，其特征在于，s8.1中，将组培苗连同容器一起移至与栽培环境相近的环境中，透光率50％～70％，温度10℃～30℃，自然光照炼苗20d～40d，以使组培苗适应自然光照和昼夜温差。