一种大鼠高脂血症模型的建立方法与流程

本发明属于医药，具体涉及一种大鼠高脂血症模型的建立方法。

背景技术：

1、高脂血症(hyperlipidemia，hlp)是一种常见的代谢紊乱性疾病，由于脂肪代谢紊乱而造成血浆脂质失衡，临床上主要表现为血液中总胆固醇(total cholesterol，tc)、甘油三酯(triglyceride，tg)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein-cholesterol，ldl-c)水平升高或高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein-cholesterol，hdl-c)水平降低。这种血脂异常会增加多种疾病发生的潜在风险，如心脑血管疾病、脂肪肝和动脉粥样硬化等。目前人们生活质量大大提高，生活方式也发生了很大的变化，生活节奏加快以及不健康的饮食方式等导致了高脂血症的发生率逐渐增加，并且年轻趋势明显，已成为关乎全体健康的重要问题。

2、越来越多的研究表明，肠道菌群的失调和宿主的代谢表型改变在疾病的发生和发展过程中起着至关重要的作用。肠道微生态与高脂血症、肥胖及其相关代谢性疾病的发生、发展密切相关，具有参与食物消化吸收、营养与物质代谢过程，增强宿主的免疫等功能。禁食和热量限制对宿主代谢健康的益处已得到充分证实，如使肠道菌群的多样性及总量下降，改变肠道菌群数目等。短链脂肪酸(short-chain fatty acids，scfa)被认为是维持机体健康的重要信息介质，为宿主代谢提供能量，与肠道微生物的代谢直接相关。短链脂肪酸大多数产生在盲肠和近端结肠，肠道菌群可通过代谢产物短链脂肪酸来影响脂代谢，因此现代研究提出肠道微生态与机体健康密切相关，肠道菌群可能是高脂血症防治的新靶点。

3、制备高效、合理、稳定的高脂血症动物模型以及探讨实验中高脂血症的发病机制对于预防和治疗高脂血症至关重要。目前，国内外研究中最常见的高脂血症动物模型建立方法是高脂饲喂法，即通过高脂膳食诱导在饮食方面进行干预，该方法的形成机制与大多数高脂血症患者的高血脂病因和发病机制相似，但是在实验中，我们发现长期的高脂膳食诱导导致大鼠的食欲下降、摄食量不足以及进食个体差异较大，从而造成模型不稳定，降低了模型制备的效率。

4、为此，本研究采用高脂饲料限量饲喂的喂养方式建立稳定的高脂血症大鼠模型，基于肠道菌群变化与短链脂肪酸代谢特征分析从宿主-肠道菌群-代谢角度探讨高脂血症可能的微观机制，以期为高脂血症发病机制的研究提供新方向；并对建立的模型大鼠血清生化指标、肝脏病理、肠道菌群及短链脂肪酸的变化进行比较分析，以期为降脂药物的研发提供动物模型建立方法。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供了一种大鼠高脂血症模型的建立方法，既降低高脂饲料对大鼠食欲的影响，而且能提高大鼠高脂血症模型制备的稳定性，本方法建模成本相对低、稳定性高，对大鼠食欲影响小，更符合动物福利。

2、本发明提供了如下技术方案之一：

3、一种大鼠高脂血症模型的建立方法，包括如下步骤：

4、每天定量饲喂大鼠高脂饲料，然后不限量饲喂维持饲料，自由饮水，连续饲喂4周；

5、所述高脂饲料中含蛋白质24％-28％，粗纤维6％-9％，脂肪20％-22％；所述维持饲料中含蛋白质21％-24％，粗纤维4％-6％，脂肪3％-4％。

6、进一步地，所述高脂饲料中含蛋白质26％，粗纤维8％，脂肪21.5％；所述维持饲料中含蛋白质23.76％，粗纤维5％，脂肪3.5％。

7、进一步地，上述高脂饲料的营养成分组成为：蛋黄粉10％，猪油10％，蔗糖5％，胆固醇1.5％，胆盐0.25％，次粉14.06％，玉米29.3％，豆粕14.87，麸皮8.79％，鱼粉1.47％，磷酸氢钙1.47％，豆油0.88％，石粉1.1％，酵母0.37％，食盐0.29％，胆碱(50％)0.29％，蛋氨酸0.15％，多矿0.15％，复合多维0.06％。

8、进一步地，上述维持饲料的营养成分组成为：次粉 19.2％，玉米 40％，豆粕20.3％，麸皮12％，鱼粉 2％，磷酸氢钙 2％，豆油 1.2％，石粉 1.52％，酵母0.5％，食盐0.4％，胆碱(50％)0.4％，蛋氨酸0.2％，多矿0.2％，复合多维0.08％。

9、进一步地，所述大鼠为8周龄sd大鼠，雌雄各半。

10、进一步地，每天饲喂大鼠高脂饲料的量为76-82g；优选80g。

11、进一步地，上述大鼠高脂血症模型的建立方法，还包括以下步骤：饲喂4周后分别检测正常对照组和实验组大鼠血清tc、tg、ldl-c、hdl-c水平，与正常对照组比较，血清tg或tc或ldl-c升高，差异有显著性，判定高脂模型成立。

12、本发明的有益效果：

13、1、本发明方法建立的大鼠高脂血症模型可形成稳定的高脂血症病理症状，其症状4周即可出现，并可持续稳定8周以上的高脂血症。该方法降低了传统方法的高脂饲料饲喂量，减轻了高脂饲料对大鼠食欲的影响，克服了传统方法的建模摄食量下降、体质量和血脂水平参差不齐等缺点。

14、2、采用本发明方法诱导建立大鼠高脂血症动物模型费用低，稳定性好，能较好的模拟人类发病状态，因此，既可用于预防高脂血症功能性食品的研究，也可用于降低血脂药物的筛选，应用价值显著。

技术特征：

1.一种大鼠高脂血症模型的建立方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述大鼠高脂血症模型的建立方法，其特征在于，所述高脂饲料中含蛋白质26％，粗纤维8％，脂肪21.5％；所述维持饲料中含蛋白质23.76％，粗纤维5％，脂肪3.5％。

3.根据权利要求1或2所述大鼠高脂血症模型的建立方法，其特征在于，所述高脂饲料的成分组成为：蛋黄粉10％，猪油10％，蔗糖5％，胆固醇1.5％，胆盐0.25％，次粉14.06％，玉米29.3％，豆粕14.87，麸皮8.79％，鱼粉1.47％，磷酸氢钙1.47％，豆油0.88％，石粉1.1％，酵母0.37％，食盐0.29％，胆碱(50％)0.29％，蛋氨酸0.15％，多矿0.15％，复合多维0.06％。

4.根据权利要求1或2所述大鼠高脂血症模型的建立方法，其特征在于，所述维持饲料的成分组成为：次粉19.2％，玉米40％，豆粕20.3％，麸皮12％，鱼粉2％，磷酸氢钙2％，豆油1.2％，石粉1.52％，酵母0.5％，食盐0.4％，胆碱(50％)0.4％，蛋氨酸0.2％，多矿0.2％，复合多维0.08％。

5.根据权利要求1所述大鼠高脂血症模型的建立方法，其特征在于，所述大鼠为8周龄sd大鼠，雌雄各半。

6.根据权利要求1所述大鼠高脂血症模型的建立方法，其特征在于，每天饲喂大鼠高脂饲料的量为76-82g。

7.根据权利要求6所述大鼠高脂血症模型的建立方法，其特征在于，每天饲喂大鼠高脂饲料的量为80g。

8.根据权利要求1所述大鼠高脂血症模型的建立方法，其特征在于，还包括以下步骤：饲喂4周后分别检测正常对照组和实验组大鼠血清tc、tg、ldl-c、hdl-c水平，与正常对照组比较，血清tg或tc或ldl-c升高，差异有显著性，判定高脂模型成立。

技术总结
本发明属于医药技术领域，具体一种大鼠高脂血症模型的建立方法。该方法包括每天定量饲喂大鼠高脂饲料，然后不限量饲喂维持饲料，自由饮水，连续饲喂4周的步骤。本方法既降低高脂饲料对大鼠食欲的影响，而且能提高大鼠高脂血症模型制备的稳定性，建模成本相对低、稳定性高，对大鼠食欲影响小，更符合动物福利。

技术研发人员：杨宗统,李晓晶,盖辉,徐东川,隋在云,袁敏
受保护的技术使用者：山东省中医药研究院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15