一种提高橡胶树体胚植株再生效率和质量的方法

本发明涉及植物培植领域，具体涉及一种提高橡胶树体胚植株再生效率和质量的方法，本发明提供了油菜素内酯在橡胶树体胚植株再生中的运用方法。

背景技术：

1、天然橡胶是我国四大工业原料中唯一可再生的资源，同时也是重要的战略物资，主要来源于巴西橡胶树。橡胶树生长周期长达70年，其苗木质量对整个天然橡胶产业的发展具有深远的影响。橡胶树苗木继实生苗、芽接苗之后，通过体细胞胚发生技术培育的橡胶树体胚苗(通常称为自根幼态无性系、组培苗)，是目前可进行大规模繁育的组培苗类型，具有速生、高产和高抗的优势，成为橡胶树新一代种苗。

2、现有橡胶树组培技术中，主要集中在胚性愈伤诱导、生长和体胚发生等环节，在植株再生阶段比较欠缺。华玉伟等人采用花药作为外植体，先诱导愈伤并获得初生体胚，再利用体胚诱导次生体胚发生，首次实现了橡胶树体胚苗的规模化繁育；戴雪梅等通过在培养基中添加agno3，观察橡胶树花药愈伤组织形态变化及对体胚发生的情况；李玲等研究了tdz对橡胶树花药愈伤组织诱导和体细胞胚发生的影响；张源源等以4个橡胶树优良品系的花药为外植体，获得了不同品系的愈伤诱导和体胚发生最佳培养基组合；顾晓川等对橡胶树32个品种的花药进行诱导愈伤组织，并进一步诱导体胚发生，将体胚发生效率和遗传关系结合分析不同基因型体胚发生能力的差异。另外在发明专利方面，顾晓川等用花萼为外植体诱导体胚发生(cn113331057b，2022)；黄天带等则采用橡胶树试管苗嫩叶诱导体胚发生和植株再生(cn114467748b，2023)。顾晓川等公开了一种橡胶树次生体胚高效发生方法及其应用(cn115500261b，2023)；陈健妙等公开了橡胶树胚性愈伤组织诱导培养基及橡胶树胚性愈伤组织快速增殖方法(cn107372122b，2019)和橡胶树胚状体诱导培养基、胚性愈伤组织的诱导方法及抗性愈伤组织的培育方法(cn108575761b，2019)。在植株再生阶段，李玲等研究了不同浓度的活性炭对橡胶树体胚植株再生，植株再生率最高为69％；谭德冠等公开了一种橡胶树体细胞胚胎发生和植株再生的方法(cn104823850b，2017)，该发明专利重点在体胚发生效果上，植株再生阶段也并未涉及油菜素内酯。本申请通过在培养基中添加油菜素内酯，有效提高了橡胶树体胚的植株再生效率，植株株高也得到显著增加，提供了一种提高橡胶树体胚植株再生效率和质量的方法。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种提高橡胶树体胚植株再生效率和质量的方法。通过在橡胶树植株再生培养基中添加油菜素内酯，提高橡胶树体胚植株再生的效率，并且提高植株株高、茎粗等指标的质量。

2、为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

3、一种提高橡胶树体胚植株再生效率和质量的方法，包括如下步骤：

4、s1:植株再生培养基准备：改良ms为基本培养基，每升培养基中还含有kt0.1-1.0mg、iaa0.1-0.5mg、ga33.0-4.0mg、油菜素内酯0-1.0mg、蔗糖40.0-60.0g、活性炭1.0g、phytagel 1.0g，调节ph值至5.8；

5、s2:体胚选择：选择发育成熟、具有胚芽的橡胶树初生体胚或次生体胚；

6、s3:植株再生：在超净台上，将选出的体胚接种到植株再生培养基上进行光照培养，使体胚萌发形成完整植株，培养温度为25℃-30℃，时间为20-60天。

7、优选地，所述步骤s1植株再生培养基中，添加油菜素内酯0.01-0.5mg/l。

8、优选地，所述步骤s2体胚选择中，体胚应为具有胚芽、胚根的成熟子叶胚。

9、优选地，所述步骤s3植株再生中，培养时长以植株根系发达、顶叶稳定为佳。

10、本发明的有益效果为：

11、本发明通过在培养基中添加油菜素内酯，经过植株再生培养，观察到植株再生效率提高，且株高等指标质量提高，为橡胶树育苗技术改良提供支持。

技术特征：

1.一种提高橡胶树体胚植株再生效率和质量的方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种提高橡胶树体胚植株再生效率和质量的方法，其特征在于，所述步骤s1植株再生培养基中，添加油菜素内酯0.01-0.5mg/l。

3.根据权利要求1所述的一种提高橡胶树体胚植株再生效率和质量的方法，其特征在于，所述步骤s2体胚选择中，体胚应为具有胚芽、胚根的成熟子叶胚。

4.根据权利要求1所述的一种提高橡胶树体胚植株再生效率和质量的方法，其特征在于，所述步骤s3植株再生中，培养时长以植株根系发达、顶叶稳定为佳。

技术总结
本发明提供了一种提高橡胶树体胚植株再生效率和质量的方法，涉及植物组织培养领域，具体方法包括以下步骤，选择具有胚根、胚芽的成熟体胚接种在含有油菜素内酯的培养基上，经过光照培养20‑60天，观察到植株再生效率提高，且株高、茎粗等指标质量提高。本发明提供了油菜素内酯在橡胶树体胚植株再生中的运用方法，为橡胶树育苗技术改良提供支持。

技术研发人员：彭素娜,邓玉婷,黄天带,顾晓川,戴雪梅,王骋骋,李季
受保护的技术使用者：中国热带农业科学院橡胶研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/2/8