小型猪严重烧伤休克模型的制作方法与流程

本发明涉及动物模型，更具体地说，它涉及小型猪严重烧伤休克模型的制作方法。

背景技术：

1、烧伤属于突发事故或灾难，是人类重大创伤之一。根据世界卫生组织统计，全世界每年约有110万例各种类型的烧伤，其中30万人死于烧伤。休克是烧伤患者早期主要的死亡原因，研究显示58％的烧伤死亡发生在伤后休克期内，烧伤死亡伤员中36％死于休克造成的低灌注损伤，28％死于继发的多脏器功能衰竭和脓毒症。严重烧伤后早期的复苏策略一直是烧伤休克临床研究的热点和难点，有许多问题亟待解决，动物体内实验研究是解决问题的关键途径。动物模型可极大地提高对疾病的病因和进展的理解。为了探究烧伤休克的病理生理学变化并评估新的治疗方法，科研人员一直在探寻与人类更相似的动物模型作为疾病研究的标准工具。

2、猪是医学基础科学实验中最常用的动物模型之一，猪的循环系统结构和血流动力学特点与人类极其相似，被认为是休克研究“一种理想的非临床模型系统”。实验用小型猪(如巴马小型猪、小型猪和yucatan小型猪)由于其体重小便于操作、适应性强、抗病性强和饲养成本低等特点，逐渐成为烧创伤休克研究的主要动物模型。

3、然而，目前国内外现有文献中对严重烧伤小型猪休克模型的制作方法不一致，细节描述不充分，缺乏再现性，难以复制。为了促进严重烧伤休克新疗法和复苏方案的探索研究，迫切需要开发一种制作规范、易于复制的标准化小型猪烧伤休克模型。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供小型猪严重烧伤休克模型的制作方法，该模型包括了麻醉、管道留置、致伤面积精确划定、致伤方法和创面深度评估方法，并通过血流动力学指标、组织灌注指标系统评价了动物伤后发生休克的病理生理学特征，为烧伤休克复苏以及重度烧伤相关研究提供稳定可靠的动物模型。

2、本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：小型猪严重烧伤休克模型的制作方法，所述模型的制备方法包括致伤前准备和致伤过程2个阶段；

3、所述致伤前准备包括麻醉、气管插管、经尿道留置导尿和留置动静脉导管4个步骤；

4、所述致伤过程包括划定致伤区域、配置凝固汽油和致伤3个步骤。

5、本发明进一步设置为：所述麻醉的具体操作如下：麻醉前15分钟按0.1mg/kg肌肉注射阿托品注射液将舒泰50与盐酸噻拉嗪注射液按5:4体积比混合后，以0.1ml/kg肌肉注射诱导麻醉。诱导麻醉后将麻醉药物混合液按照1:9的体积比溶于0.9％nacl溶液中制备麻醉稀释液，使用微量注射泵以10ml/h的速度经耳缘静脉注射维持麻醉。

6、本发明进一步设置为：所述气管插管的具体操作如下：采用尺寸为20cm×2.0cm的动物直片喉镜辅助行气管插管。

7、本发明进一步设置为：所述经尿道留置导尿操作具体如下：在可视喉镜的引导下经尿道留置一次性硅胶双腔foley尿管，一次性硅胶双腔foley尿管再连接一次性子母式集尿袋。

8、本发明进一步设置为：所述留置动静脉导管具体操作如下：动物颈部皮肤消毒后铺无菌单，超声引导下经颈静脉留置双腔深静脉导管，缝合固定，腹股沟皮肤消毒铺无菌单，超声引导下经股动脉留置热稀释导管，接压力检测套装，静脉导管端连接注射液温度电缆和注射液温度探头，动脉导管端连接温度测量电缆和一次性压力传感器。

9、本发明进一步设置为：所述划定致伤区域具体操作如下：理发器剃净躯干部毛发，计算小型猪体表总面积。采用“体表标志物定位法”划定体表总面积的50％为致伤区域。动物取俯卧位，在脊柱正中线上以两耳后中点至尾根部的连线为长(l1)；动物更换为侧卧位，以肱骨大结节(肩关节前侧，a点)至的脊柱正中线垂直连线的距离为宽(w1)，在侧躯干标记长方形区域，记为s1区域；以腹股沟外侧起点(b点)至s1区域的垂直连线为宽(w2)，以肱骨大结节(肩关节前侧)至臀后线连线为长(l2)标记长方形，记为s2区域；s1与s2之和不足体表总面积25％的部分，在动物侧腹部与s2相邻部位划定s3区域，使得s1、s2、s3之和为体表总面积的25％；按照上述步骤划定对侧躯干致伤区域。

10、本发明进一步设置为：所述配置凝固汽油的具体操作如下：将3g凝固汽油粉和1.5ml二甲酚缓慢加入100ml 92号无铅汽油中，边加边搅拌，呈浆糊状即可使用，在40℃水浴加温可加速其溶解。

11、本发明进一步设置为：所述致伤的具体操作如下：将实验猪搬运至室外空旷、通风场地，放置于隔热防火材料上；致伤前10min静脉注射布托啡诺止痛；采用“侧卧两步致伤法”烧伤动物。首先左侧卧位固定动物，采用湿棉垫及防火材料覆盖保护动物右侧躯干和前后肢标记的预定致伤区域外的皮肤；按照1ml/10cm2剂量在致伤区域使用软毛刷均匀涂抹凝固汽油，点燃凝固汽油，秒表计时40秒，即可实现皮肤ⅲ度烧伤，立即以湿棉垫盖灭火苗，扑灭后更换干燥大棉垫；以同样方式右侧卧位固定实验猪后致伤；动物致伤完成后立即转运回恒温试验台，仰卧位固定。

12、综上所述，本发明具有以下有益效果：该模型包括了麻醉、管道留置、致伤面积精确划定、致伤方法和创面深度评估方法，并通过血流动力学指标、组织灌注指标系统评价了动物伤后发生休克的病理生理学特征，为烧伤休克复苏以及重度烧伤相关研究提供稳定可靠的动物模型。

技术特征：

1.小型猪严重烧伤休克模型的制作方法，其特征是：所述模型的制备方法包括致伤前准备和致伤过程2个阶段；

2.根据权利要求1所述的小型猪严重烧伤休克模型的制作方法，其特征是：

3.根据权利要求1所述的小型猪严重烧伤休克模型的制作方法，其特征是：

4.根据权利要求1所述的小型猪严重烧伤休克模型的制作方法，其特征是：

5.根据权利要求1所述的小型猪严重烧伤休克模型的制作方法，其特征是：

6.根据权利要求1所述的小型猪严重烧伤休克模型的制作方法，其特征是：

7.根据权利要求1所述的小型猪严重烧伤休克模型的制作方法，其特征是：

8.根据权利要求1所述的小型猪严重烧伤休克模型的制作方法，其特征是：

技术总结
本发明公开了小型猪严重烧伤休克模型的制作方法，涉及动物模型技术领域，其技术方案要点是：所述模型的制备方法包括致伤前准备和致伤过程2个阶段；所述致伤前准备包括麻醉、气管插管、经尿道留置导尿和留置动静脉导管4个步骤；所述致伤过程包括划定致伤区域、配置凝固汽油和致伤3个步骤。该模型包括了麻醉、管道留置、致伤面积精确划定、致伤方法和创面深度评估方法，并通过血流动力学指标、组织灌注指标系统评价了动物伤后发生休克的病理生理学特征，为烧伤休克复苏以及重度烧伤相关研究提供稳定可靠的动物模型。

技术研发人员：李大伟,申传安,刘兆兴,张文,臧宇,马景龙,杨键秋
受保护的技术使用者：中国人民解放军总医院第四医学中心
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15