本发明涉及一种方法，尤其是一种脱除百合组培苗短小杆菌属内生菌的方法，属于植物培育。
背景技术：
1、百合是世界五大切花之一，深受世界各国人民喜爱。百合的组织培养繁殖系数大，扩繁速度快，可获得无毒种苗，并且能实现周年工厂化生产，目前已经成熟应用于百合新品种培育、优良株系快速繁殖、种球脱毒及种质资源保存等方面。但由于外植体细胞内或细胞间存在内生菌，用常规的消毒方法难以将其彻底消灭，致使百合在增殖培养、扩繁过程中，因培养基中滋生了内生菌而导致增殖速率降低，造成组培苗生长减缓，玻璃化苗增加，甚至会引起组培苗移栽困难和死亡的问题，严重影响了百合组培苗的扩繁。中国专利201310225467.1公开了一种百合组织培养中脱除外植体内生菌的方法，该方法主要针对增殖培养前外植体中内生菌的消除，没有涉及增殖扩繁过程中组培苗产生内生菌如何处理的方法。因此，有必要对现有技术加以改进。
技术实现思路
1、为解决短小杆菌属内生菌在百合组培苗扩繁过程中污染的问题，本发明提供一种脱除百合组培苗中短小杆菌属内生菌的方法，以生产优质百合组培苗。
2、本发明通过下列技术方案完成：一种脱除百合组培苗中短小杆菌属内生菌的方法，其特征在于包括以下步骤：
3、1）切除被短小杆菌属内生菌污染的组培苗的叶片和鳞茎盘；
4、2）将步骤1）的组培苗放入质量浓度为0.5%的三氯异氰尿酸、和质量浓度为0.5%的十二烷基磺酸钠、且质量比为1:1的混合液中，浸泡10～15 min，其中三氯异氰尿酸的有效氯含量不低于50%；
5、3）将步骤2）的组培苗用无菌水漂洗三次，每次30 s；
6、4）将步骤3）的组培苗接入含50 mg/l硫酸链霉素的ms培养基中；
7、将步骤4）的组培苗放置在温度22±1℃、光照时间10—14h/d的培养室中，培养2～3周，观察短小杆菌属内生菌污染情况；
8、6）若没有污染，继续培养2周，之后将组培苗接入ms+6-ba 1.0 mg/l+naa 0.5 mg/l增殖培养基中进行增殖培养；
9、7）若有污染，重复步骤1）—4），如此重复2～3次，即可清除短小杆菌属内生菌。
10、所述步骤2）是在培养瓶内完成的，并不断用手晃动培养瓶。
11、所述步骤3）是用镊子将组培苗夹出培养瓶，再放入盛有无菌水的培养瓶中漂洗。
12、所述步骤4）是在盛有含50 mg/l硫酸链霉素的ms培养基的培养瓶中完成的。
13、本发明具有下列良好的技术效果：能有效去除百合组培苗中的短小杆菌属内生菌，为组培苗的增殖、扩繁培养创造良好条件，彻底解决百合在增殖培养、扩繁过程中，容易因滋生短小杆菌属内生菌而导致增殖速率降低，造成组培苗生长减缓，玻璃化苗增加，甚至会引起组培苗移栽困难和死亡的问题，且本发明快速、高效、经济，效果显著，抑菌率可达到90%以上。
1.一种脱除百合组培苗中短小杆菌属内生菌的方法，其特征在于包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的脱除百合组培苗中短小杆菌属内生菌的方法，其特征在于所述步骤2）是在培养瓶内完成的，并不断用手晃动培养瓶。
3.根据权利要求1所述的脱除百合组培苗中短小杆菌属内生菌的方法，其特征在于所述步骤3）是用镊子将组培苗夹出培养瓶，再放入盛有无菌水的培养瓶中漂洗。
4.根据权利要求1所述的脱除百合组培苗中短小杆菌属内生菌的方法，其特征在于所述步骤4）是在盛有含50 mg/l硫酸链霉素的ms培养基的培养瓶中完成的。