一种小果冬青组培苗瓶外生根的方法与流程

本发明属于小果冬青育苗，具体涉及一种小果冬青组培苗瓶外生根的方法。

背景技术：

1、冬青属植物具有较高的观赏价值、药用价值和生态价值，受到全世界植物学家、园艺学家的追捧。我国是冬青属物种多样性和遗传多样性最为丰富的国家之一，拥有种类繁多的特有遗传资源。小果冬青（ ilex micrococca）为冬青科冬青属落叶高大乔木，是华东地区优良的速生用材和观赏树种。其树干通直，高达20米，树姿雄伟，较耐干旱，材质优良，为我国南方重要的家具、农具、造纸用材树种；其树皮经提取可制栲胶，还可作染料。小果冬青在5月叶绿密多，繁花似锦，有沁人心脾的淡淡香味；待到10月叶橙黄赤红，累累红果艳丽夺目，远看似花近看是果，经久不落，观赏性极强，是近年来园林应用的优良观赏树之一。此外，小果冬青的根部和叶片均可入药，具有清热解毒和镇痛的疗效。

2、小果冬青兼具速生、用材、观赏、药用等多种功能，具有广阔的市场前景。随着江苏城镇化建设加快和美丽中国建设的推进，城乡绿化对优新苗木品种的要求不断提高，小果冬青作为优良乡土树种，极具开发潜力和应用价值。目前，由于小果冬青种子细小、坚硬、发芽率低，人工驯化繁殖存在难度，严重阻碍了小果冬青的有效开发利用。因此，当前急需突破小果冬青种苗繁育技术，提高种苗科技含量，为小果冬青产业开发提供技术支持。

技术实现思路

1、本发明所要解决的技术问题是针对上述现有技术的不足，提供一种小果冬青组培苗瓶外生根的方法，结合多年的研究和生产经验，建立了小果冬青组培体系，并采用组培苗瓶外生根技术，该技术能够将组培苗生根与移栽驯化结合起来，简化传统育苗程序，对小果冬青组培快繁体系的优化具有重要技术意义。

2、为实现上述技术目的，本发明采取的技术方案为：

3、一种小果冬青组培苗瓶外生根的方法，包括：

4、（1）组培苗培养：在超净工作台上和无菌条件下，将小果冬青组培苗接种在含有增殖培养基的培养瓶中，然后将其置于led灯为光源的环境下生长，得到健壮无菌组培苗；

5、（2）生根剂配制：每升生根剂溶液的配制方法如下：将800~1000 mg吲哚丁酸用乙醇溶解后，用清水定容至1 l；

6、（3）移栽基质准备：将ph值为5.8~6.2的泥炭基质分装于育苗盒中，浇透水备用，并对基质进行消毒杀菌；

7、（4）瓶苗选择与炼苗：选择步骤（1）中6~8 cm的健壮无菌组培苗，将健壮无菌组培苗移至炼苗室，在自然光条件下先放置2 d，后将瓶盖每天上午下午各打开1次，每次打开时间为1 h，持续2 d；

8、（5）组培苗瓶外扦插：将完成炼苗的组培苗取出，洗净粘在植株基部的培养基，按单株剪下，摘除底部发黄破损叶片，在步骤（2）配置的生根剂中浸泡30 s，栽入步骤（3）备好的育苗盒中，浇透水；

9、（6）扦插后管理：在扦插完毕并浇透水的幼苗上方用保鲜膜覆盖包裹培养，培养1~2周后撤去保鲜膜，每隔3天喷洒一次多菌灵和百菌清混合药剂直到幼苗基部开始长出根系。

10、为优化上述技术方案，采取的具体措施还包括：

11、上述的步骤（1）的增殖培养基为：每升wpm培养基 + 1.0 mg 萘乙酸+ 0.3 mg 6-苄基腺嘌呤+ 40 g蔗糖 + 6 g卡拉胶，ph值为6.4。

12、上述的wpm培养基由常量元素、微量元素、铁盐和有机成分组成；

13、所述常量元素为：nh4no3、ca(no3)2·4h2o、cacl2·2h2o、mgso4·7h2o、kh2po4、k2so4，其含量分别为200 mg/l、278 mg/l、48 mg/l、185 mg/l、85 mg/l、495 mg/l；

14、所述微量元素为：mnso4·h2o、znso4·7h2o、h3bo3、na2moo4·2h2o、cuso4·5h2o、cocl2.6 h2o，其含量分别为22.3 mg/l、8.6 mg/l、6.2 mg/l、0.25 mg/l、0.025 mg/l、0.025mg/l；

15、所述铁盐为：na2·edta、feso4·7h2o，其含量分别为37.3 mg/l、27.8 mg/l；

16、所述有机成分为：肌醇、甘氨酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、烟酸，其含量分别为100mg/l、2 mg/l、1 mg/l、0.5 mg/l、0.5 mg/l。

17、上述的步骤（1）的光照强度为1500~2000 lx，每日光照时间为14 h，温度20±2℃，相对湿度60~65 %。

18、上述的步骤（3）选用12孔、孔深5.8 cm的塑料育苗盘，基质占育苗盘3/4体积；基质每立方用20g 50%多菌灵可湿性粉剂进行消毒杀菌。

19、上述的步骤（3）所述泥炭用800倍多菌灵处理消毒；800倍的多菌灵通过取浓度50%的多菌灵1 g用800 ml的水稀释得到。

20、上述的步骤（5）中生根剂浸泡组培苗基部1~2 cm，栽苗深度为1.5~2 cm

21、上述的步骤（6）的培养温度控制在20~25℃，湿度保持85%以上，光强为1500~2000lx，光照时间为16h/d；每隔3天喷洒一次0.1 % 的多菌灵和百菌清混合药剂。

22、本发明具有以下有益效果：

23、本发明结合多年的研究和生产经验，总结了小果冬青组培苗瓶外生根技术，与瓶内生根相比，该技术是瓶内快速繁殖与扦插技术相结合的繁殖方法，继代增殖苗经过处理后，在有菌和自养环境中进行移栽生根，有效地将试管苗生根和驯化结合起来，能够降低生产成本，节省组培空间，缩短组培育苗周期1个月以上，对小果冬青组培快繁体系的优化具有重要技术意义。

24、本发明与常规的组织培养方法相比，省去了瓶内生根环节，育苗周期缩短1个月以上，操作简便，实用性强；

25、本发明中无需经过组培瓶内生根程序，生根和驯化同时进行，25~30 d 幼苗基部开始长出根系，2个月后得到健壮的生根苗，育苗周期短，生根率大于90 %，根系发达，幼苗生长健壮，移栽成活率大于95 %，成苗一致性好，能够降低生产成本并且节省组培空间，对于小果冬青组培产业化水平提升具有重要意义；

26、本发明中的瓶外生根技术能够降低生产成本40 %左右，节省组培空间50 %以上，对于小果冬青组培产业化水平提升具有重要意义。

技术特征：

1.一种小果冬青组培苗瓶外生根的方法，其特征在于，包括：

2. 根据权利要求1所述的一种小果冬青组培苗瓶外生根的方法，其特征在于，所述步骤（1）的增殖培养基为：每升wpm培养基 + 1.0 mg 萘乙酸+ 0.3 mg 6-苄基腺嘌呤+ 40 g蔗糖 + 6 g卡拉胶，ph值为6.4。

3.根据权利要求2所述的一种小果冬青组培苗瓶外生根的方法，其特征在于，所述wpm培养基由常量元素、微量元素、铁盐和有机成分组成；

4. 根据权利要求1所述的一种小果冬青组培苗瓶外生根的方法，其特征在于，所述步骤（1）的光照强度为1500~2000 lx，每日光照时间为14 h，温度20±2 ℃，相对湿度60~65%。

5. 根据权利要求1所述的一种小果冬青组培苗瓶外生根的方法，其特征在于，所述步骤（3）选用12孔、孔深5.8 cm的塑料育苗盘，基质占育苗盘3/4体积；基质每立方用20g 50%多菌灵可湿性粉剂进行消毒杀菌。

6. 根据权利要求1所述的一种小果冬青组培苗瓶外生根的方法，其特征在于，步骤（3）所述泥炭用800倍多菌灵处理消毒；800倍的多菌灵通过取浓度50 %的多菌灵1 g用800 ml的水稀释得到。

7. 根据权利要求1所述的一种小果冬青组培苗瓶外生根的方法，其特征在于，所述步骤（5）中生根剂浸泡组培苗基部1~2 cm，栽苗深度为1.5~2 cm。

8. 根据权利要求1所述的一种小果冬青组培苗瓶外生根的方法，其特征在于，所述步骤（6）的培养温度控制在20~25℃，湿度保持85%以上，光强为1500~2000lx，光照时间为16h/d；每隔3天喷洒一次0.1 % 的多菌灵和百菌清混合药剂。

技术总结
本发明公开了一种小果冬青组培苗瓶外生根的方法，包括：（1）组培苗培养；（2）生根剂配制；（3）移栽基质准备；（4）瓶苗选择与炼苗；（5）组培苗瓶外扦插；（6）扦插后管理。本发明建立了有效的小果冬青组培苗瓶外生根技术，无需经过组培瓶内生根程序，生根和驯化同时进行，25~30 d幼苗基部开始长出根系，2个月后得到健壮的生根苗，育苗周期短，生根率大于90%，移栽成活率大于95%，能够降低生产成本并且节省组培空间，对于小果冬青组培产业化水平提升具有重要意义。

技术研发人员：黄婧,周鹏,张敏,李飞,陈亚辉
受保护的技术使用者：江苏省林业科学研究院
技术研发日：
技术公布日：2024/2/21