一种地毯草组织培养繁育方法

本发明属于植物栽培，具体涉及一种地毯草组织培养繁育方法。

背景技术：

1、地毯草(axonopus compressus(swartz)beauv.)，又名大叶油草，是禾本科地毯草属的一种多年生草本植物。原产南美洲巴西和墨西哥，现已引种到广大的热带和亚热带国家和地区。由于其低矮、弹性好、繁殖容易、蔓延快且成坪性好，也是一种优良的暖季型草坪草。在草坪草的分类上属于暖地型草坪草。在我国热带亚热带地区，目前大面积应用的主要为地毯草，该草种的匍匐茎蔓延迅速，每节上都能生根和抽出新植株，植物体平铺地面而形成毯状的草坪。地毯草是一种具有较强耐荫性的c4型阳性的暖季型草坪草，除了在园林中可以广泛用作草坪地被外还可以在一些较荫湿的特殊地带作为绿化和防护之用。同时具有耐热、耐水淹、耐贫瘠、耐重金属污染，对管理的要求低等优点。因而被广泛用于公共绿地草坪、水土保持和公路护坡草坪。地毯草在不同生境下经过长期的自然适应，可能会形成不同的生态型，其中有可能出现抗性较好的生态型。地毯草可通过种子繁殖，也通过常规的分株方式可以进行繁殖。但是地毯草并不耐旱，并且还有病毒和真菌的感染，需要建立生物技术繁育再生体系，以加强生物技术育种的工作。至今还没有报道通过组织培养技术进行繁育的报道。

技术实现思路

1、本发明的目的是针对上述不足，提供一种地毯草组织培养繁育方法。

2、本发明采取的技术方案如下：

3、一种地毯草组织培养繁育方法，其包括以下步骤：以地毯草茎段为外植体，经消毒后置于诱导培养基中进行诱导培养，得到不定芽；将不定芽转移至增殖培养基中进行增殖培养获得从生芽；将丛生芽转入生根培养基中进行生根培养，得到组培苗，组培苗经壮苗、炼苗后移栽至基质中获得地毯草种苗。

4、优选地，外植体的消毒步骤具体为：以地毯草茎段为外植体，去除老叶，在清水中冲洗10min后，用75％乙醇消毒30s，随后在无菌水中清洗三次，再将茎段放入0.1％的升汞中消毒15min，最后再用无菌水清洗五次，每次3min。

5、优选地，所述诱导培养基的组成为：ms培养基+30g/l蔗糖+3g/l植物凝胶+1.0mg/l6-ba，ph为6.0；所述诱导培养的温度为25±1℃，光照时间为12h/12h l/d，光照强度为80μmol m-2s-1ppfd。

6、优选地，所述诱导培养的时间30-50天。

7、优选地，所述增殖培养基的组成为：ms培养基+30g/l蔗糖+3g/l植物凝胶+1.0-3.0mg/l6-ba+0.01-0.1mg/l naa，ph 5.8-6.0；所述增殖培养的条件为：培养的温度为25±1℃，光照时间为12h/12h l/d，光照强度为80μmol m-2s-1ppfd。

8、优选地，所述增殖培养的时间30天。

9、优选地，所述生根培养基为ms培养基+30g/l蔗糖+3g/l植物凝胶+iaa或iba或naa0-2mg/l，ph 5.8-6.0；所述生根培养的的条件为：培养的温度为25±1℃，光照时间为12h/12h l/d，光照强度为80μmol m-2s-1ppfd。

10、优选地，所述生根培养的时间15-30天。

11、优选地，所述基质的组成为泥炭土、体积比泥炭土:蛭石＝1:1或体积比泥炭土:沙子＝1:1。

12、优选地，所述壮苗培养1-2月，炼苗2天。

13、本发明的有益效果为：

14、本发明以地毯草的茎段为外植体，成功建立繁芽和再生体系。在用不同细胞分裂素繁育丛芽的过程中，我们发现6-ba对不定芽诱导的效果比激动素(kin)好。地毯草在ms培养基附加3.0mg/l 6-苄基嘌呤(6-ba)和0.1mg/l萘乙酸(naa)的培养基上能够繁育大量的丛生小苗，每月繁殖系数可达12.88。将幼苗转移到不含植物生长调节剂的ms培养基中培养1至2月，可以诱导生根，生根苗再移栽到泥炭土基质中，一个月后存活率可达100％。采用本发明技术能够短期内获得大量的地毯草小苗，可以提供高品质，生长一致的苗木。

15、本发明技术简单实惠，切实可行，应用价值高，为地毯草的大量繁殖和其生物技术打下了基础。

技术特征：

1.一种地毯草组织培养繁育方法，其特征在于，包括以下步骤：以地毯草茎段为外植体，经消毒后置于诱导培养基中进行诱导培养，得到不定芽；将不定芽转移至增殖培养基中进行增殖培养获得从生芽；将丛生芽转入生根培养基中进行生根培养，得到组培苗，组培苗经壮苗、炼苗后移栽至基质中获得地毯草种苗。

2.根据权利要求1所述的地毯草组织培养繁育方法，其特征在于，外植体的消毒步骤具体为：以地毯草茎段为外植体，去除老叶，在清水中冲洗10min后，用75％乙醇消毒30s，随后在无菌水中清洗三次，再将茎段放入0.1％的升汞中消毒15min，最后再用无菌水清洗五次，每次3min。

3.根据权利要求1所述的地毯草组织培养繁育方法，其特征在于，所述诱导培养基的组成为：ms培养基+30g/l蔗糖+3g/l植物凝胶+1.0mg/l 6-ba，ph为6.0；所述诱导培养的温度为25±1℃，光照时间为12h/12h l/d，光照强度为80μmol m-2s-1ppfd。

4.根据权利要求1或3所述的地毯草组织培养繁育方法，其特征在于，所述诱导培养的时间30-50天。

5.根据权利要求1所述的地毯草组织培养繁育方法，其特征在于，所述增殖培养基的组成为：ms培养基+30g/l蔗糖+3g/l植物凝胶+1.0-3.0mg/l 6-ba+0.01-0.1mg/l naa，ph5.8-6.0；所述增殖培养的条件为：培养的温度为25±1℃，光照时间为12h/12h l/d，光照强度为80μmol m-2s-1ppfd。

6.根据权利要求1或5所述的地毯草组织培养繁育方法，其特征在于，所述增殖培养的时间30天。

7.根据权利要求1所述的地毯草组织培养繁育方法，其特征在于，所述生根培养基为ms培养基+30g/l蔗糖+3g/l植物凝胶+iaa或iba或naa 0-2mg/l，ph 5.8-6.0；所述生根培养的的条件为：培养的温度为25±1℃，光照时间为12h/12h l/d，光照强度为80μmolm-2s-1ppfd。

8.根据权利要求1或7所述的地毯草组织培养繁育方法，其特征在于，所述生根培养的时间15-30天。

9.根据权利要求1所述的地毯草组织培养繁育方法，其特征在于，所述基质的组成为泥炭土、体积比泥炭土:蛭石＝1:1或体积比泥炭土:沙子＝1:1。

10.根据权利要求1所述的地毯草组织培养繁育方法，其特征在于，所述壮苗培养1-2月，炼苗2天。

技术总结
本发明公开了一种地毯草组织培养繁育方法，包括以下步骤：以地毯草茎段为外植体，经消毒后置于诱导培养基中进行诱导培养，得到不定芽；将不定芽转移至增殖培养基中进行增殖培养获得从生芽；将丛生芽转入生根培养基中进行生根培养，得到组培苗，组培苗经壮苗、炼苗后移栽至基质中获得地毯草种苗。采用本发明技术能够短期内获得大量的地毯草小苗，可以提供高品质，生长一致的苗木。

技术研发人员：马国华,熊玉萍,张新华,李媛,卞展,吴坤林,曾宋君
受保护的技术使用者：中国科学院华南植物园
技术研发日：
技术公布日：2024/3/27