一种快速构建急性肾功能不全模型的方法

本发明属于动物模型，具体涉及一种快速构建急性肾功能不全模型的方法。

背景技术：

1、急性肾功能不全(aki)是由各种病因引起的肾功能快速下降而出现的临床综合征。根据病因发生的解剖部位可以分为：肾前性，肾性，肾后性。肾前性aki指因各种原因引起肾实质血流灌注减少，导致gfr降低和肾小球滤过减少，约占aki的55％。肾性aki指出现肾实质损伤，以肾缺血和肾毒性药物或毒素导致的急性肾小管坏死(atn)最为常见，其他还包括急性间质性肾炎(ain)、肾小球疾病和肾血管疾病等，约占aki的40％。肾后性aki系尿路感染所致，梗阻可发生在从肾盂到尿道的尿路中任何部位，约占aki的5％。在过去的半个世纪中急性肾功能衰竭被认为是由肾缺血引起的血液动力学疾病，而这一观点的建立正是源于动物模型的发现。

2、目前的aki动物模型的造模方法主要在小鼠身上通过手术部分切除肾组织、肾动脉结扎、使用毒性化学物质等，均对实验动物有较强的损伤，且操作繁杂、模型检测血量不足、模型动物死亡风险较高、造成的肾脏损伤无法逆转。此外，aki的病理类型多样，其中针对免疫性肾病没有较好的动物模型构建方法。因此寻找一种构建时间更短、构建效率更高、动物可检测血量更多、表征免疫性肾病特征、根据实验需求可以逆转肾功能的急性肾功能不全模型是目前面临的难题。

技术实现思路

1、本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种快速构建急性肾功能不全模型的方法。

2、为实现上述发明目的，本发明采用的技术方案为：

3、一种快速构建急性肾功能不全模型的方法，包括如下步骤：将多发性骨髓瘤来源的m蛋白或轻链蛋白移植入大鼠体内。

4、其中，所述的m蛋白的来源包括下述中的任一种：

5、(1)分泌型多发性骨髓瘤临床患者进行血浆置换后的废弃血浆；所述废弃血浆中含高浓度m蛋白，可通过收集所述废弃血浆、分离纯化获得m蛋白溶液。

6、(2)分泌型多发性骨髓瘤细胞系的培养上清液；可通过收集所述细胞系的培养上清液、分离纯化获得m蛋白溶液。

7、(3)商品化的轻链蛋白；轻链蛋白是m蛋白的主要成分，单独使用轻链蛋白也可以达到相应效果。

8、如果需要构建特定病理类型的急性肾功能不全动物模型(如igg-λ)，可以选用相应病理类型(如igg-λ)的骨髓瘤患者或商品化轻链蛋白。

9、所述的大鼠优选为wistar大鼠。进一步的，所述的大鼠优选为六至八周龄的wistar大鼠。

10、所述的m蛋白移植入大鼠体内的剂量优选为4-10mg/100g体重。

11、所述的m蛋白移植入大鼠体内的方式优选为将含m蛋白的溶液注射至大鼠体内。所述的注射途径包括尾静脉注射、腹腔注射、阴茎背静脉注射等，优选为尾静脉注射。

12、更进一步地，所述的方法还包括如下步骤：大鼠注射m蛋白后，每日观察大鼠状态及尿量变化，动态观测肾功能是否下降。约48h后根据检测结果及动物状态判断模型是否建立成功。如尿量减少、肾功能持续下降(如血尿素氮持续升高、血肌酐持续升高或肾小球滤过率持续降低)、大鼠精神状态变差则模型建立成功。

13、本发明的有益效果如下：本发明提供的快速构建急性肾功能不全模型的方法较传统手术部分切除肾组织、肾动脉结扎、使用毒性化学物质等构建模型方法而言，操作简便、模型检测血量充足、模型动物死亡风险较低、对操作人员无毒害。多发性骨髓瘤的m蛋白注射入wistar大鼠体内，通过肾组织直接内吞、肾血流粘度升高等多种机制快速造成急性肾功能不全。此外，经过早期解救的大鼠肾功能可以逆转。本发明快速构建急性肾功能不全模型的方法为肾脏病学、血液病学的科学研究提供了重要的基础。

技术特征：

1.一种快速构建急性肾功能不全模型的方法，其特征在于，包括如下步骤：将多发性骨髓瘤来源的m蛋白或轻链蛋白移植入大鼠体内。

2.根据权利要求1所述的快速构建急性肾功能不全模型的方法，其特征在于：

3.根据权利要求1所述的快速构建急性肾功能不全模型的方法，其特征在于：构建特定病理类型的急性肾功能不全动物模型，选用相应病理类型的骨髓瘤患者或轻链蛋白。

4.根据权利要求1所述的快速构建急性肾功能不全模型的方法，其特征在于：所述的大鼠为wistar大鼠。

5.根据权利要求4所述的快速构建急性肾功能不全模型的方法，其特征在于：所述的大鼠为六至八周龄的wistar大鼠。

6.根据权利要求1所述的快速构建急性肾功能不全模型的方法，其特征在于：所述的m蛋白移植入大鼠体内的剂量为4-10mg/100g体重。

7.根据权利要求1所述的快速构建急性肾功能不全模型的方法，其特征在于：所述的m蛋白移植入大鼠体内的方式为将含m蛋白的溶液注射至大鼠体内。

8.根据权利要求7所述的快速构建急性肾功能不全模型的方法，其特征在于：所述的注射途径包括尾静脉注射、腹腔注射、阴茎背静脉注射。

9.根据权利要求1所述的快速构建急性肾功能不全模型的方法，其特征在于：还包括如下步骤：大鼠注射m蛋白后，每日观察大鼠状态及尿量变化，动态观测肾功能是否下降；48h后根据检测结果及动物状态判断模型是否建立成功。

10.根据权利要求9所述的快速构建急性肾功能不全模型的方法，其特征在于：大鼠尿量减少、肾功能下降、精神状态变差则模型建立成功。

技术总结
本发明公开了一种快速构建急性肾功能不全模型的方法，属于动物模型技术领域。本发明方法包括如下步骤：将多发性骨髓瘤来源的M蛋白或轻链蛋白移植入大鼠体内，M蛋白移植入大鼠体内的剂量为4‑10mg/100g体重，移植方式为注射。大鼠注射M蛋白后，每日观察大鼠状态及尿量变化，动态观测肾功能是否下降，约48h后根据检测结果及动物状态判断模型是否建立成功。所述的M蛋白的来源包括：分泌型多发性骨髓瘤临床患者进行血浆置换后的废弃血浆、分泌型多发性骨髓瘤细胞系的培养上清液、轻链蛋白。本发明方法较传统方法而言，操作简便、模型检测血量充足、模型动物死亡风险较低、对操作人员无毒害，为肾脏病学、血液病学的研究提供了基础。

技术研发人员：周芙玲,武天之,李瑞航,魏明睿,韦舒译
受保护的技术使用者：武汉大学中南医院
技术研发日：
技术公布日：2024/3/24